公开(公告)号：CN113307853A

公开(公告)日：2021-08-27

申请号：CN202110679829.9

申请日：2021-06-18

Applicant: 宁夏农林科学院枸杞科学研究所

Inventor： 曹有龙 ,  唐琳 ,  樊云芳 ,  秦欢 ,  张曦燕 ,  李婷婷 ,  陈晓军 ,  赵建华 ,  李彦龙 ,  王亚军 ,  张波

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

Abstract: 本发明公开了一种黑果枸杞花青素合成相关的MYB转录抑制因子LrMYB3及其应用。属于基因工程技术领域。本发明通过黑果枸杞的转录组数据，根据注释结果和MYB转录因子的表达量差异，筛选克隆到了参与花青素合成的MYB转录抑制因子：LrMYB3，属于R2R3类MYB转录因子。多重序列比对和进化树分析表明其属于FaMYB1‑like类转录抑制因子。qRT‑PCR分析显示LrMYB3在黑果枸杞的各个组织中均有表达，并随着果实的成熟而表达水平逐渐升高。亚细胞定位和转录活性检测实验表明，LrMYB3是定位于细胞核中的没有激活功能的转录因子。

公开(公告)号：CN113307853B

公开(公告)日：2022-05-20

申请号：CN202110679829.9

申请日：2021-06-18

Applicant: 宁夏农林科学院枸杞科学研究所

Inventor： 曹有龙 ,  唐琳 ,  樊云芳 ,  秦欢 ,  张曦燕 ,  李婷婷 ,  陈晓军 ,  赵建华 ,  李彦龙 ,  王亚军 ,  张波

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

Abstract: 本发明公开了一种黑果枸杞花青素合成相关的MYB转录抑制因子LrMYB3及其应用。属于基因工程技术领域。本发明通过黑果枸杞的转录组数据，根据注释结果和MYB转录因子的表达量差异，筛选克隆到了参与花青素合成的MYB转录抑制因子：LrMYB3，属于R2R3类MYB转录因子。多重序列比对和进化树分析表明其属于FaMYB1‑like类转录抑制因子。qRT‑PCR分析显示LrMYB3在黑果枸杞的各个组织中均有表达，并随着果实的成熟而表达水平逐渐升高。亚细胞定位和转录活性检测实验表明，LrMYB3是定位于细胞核中的没有激活功能的转录因子。

公开(公告)号：CN113444731B

公开(公告)日：2022-11-04

申请号：CN202110679791.5

申请日：2021-06-18

Applicant: 宁夏农林科学院枸杞科学研究所

Inventor： 曹有龙 ,  唐琳 ,  樊云芳 ,  秦欢 ,  安巍 ,  李婷婷 ,  陈晓军 ,  戴国礼 ,  秦垦 ,  尹跃 ,  秦小雅 ,  梁晓婕

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明公开了一种黑果枸杞花青素合成相关的MYB转录抑制因子LrETC1及其应用。属于基因工程技术领域。本发明筛选克隆到了参与花青素合成的MYB转录抑制因子：LrETC1，其基因cDNA共240bp，编码79个氨基酸；通过蛋白序列数据库分析显示属于R3类MYB转录因子。多重序列比对和进化树分析表明其属于AtCPC‑like类转录抑制因子。是定位于细胞核中的没有激活功能的转录因子。通过农杆菌介导的遗传转化获得LrETC1转基因拟南芥株系，与野生型相比，种子的种皮呈现出浅棕色，在高蔗糖浓度胁迫条件下的拟南芥幼苗无色素积累且相关结构基因的表达水平显著下调。

公开(公告)号：CN114990254A

公开(公告)日：2022-09-02

申请号：CN202210620701.X

申请日：2022-06-01

Applicant: 宁夏农林科学院枸杞科学研究所

Inventor： 樊云芳 ,  陈晓军 ,  曹有龙 ,  秦垦 ,  安巍 ,  张英 ,  彭海 ,  李甜甜

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于枸杞品种鉴定的MNP标记位点、引物组合物和试剂盒及其应用，所述MNP标记位点为在枸杞基因组上筛选的在枸杞种群内具有多个核苷酸多态性的基因组区域，包括枸杞基因组GCA_019175385.1上MNP‑1～MNP‑500的标记位点。所述引物如SEQIDNO.1～SEQIDNO.1000所示。所述MNP标记位点数量多、分型准确性高、品种区分力强，满足枸杞品种真实性鉴定和实质性派生品种鉴定的需求；所述引物互不干扰，鉴定流程高效、鉴定结果重现性强，满足DNA指纹数据库构建的要求；可应用于枸杞品种鉴定，在中药产品的新品种培育、知识产权保护、产品质量控制等方面具有极大的应用价值。

公开(公告)号：CN113444731A

公开(公告)日：2021-09-28

申请号：CN202110679791.5

申请日：2021-06-18

Applicant: 宁夏农林科学院枸杞科学研究所

Inventor： 曹有龙 ,  唐琳 ,  樊云芳 ,  秦欢 ,  安巍 ,  李婷婷 ,  陈晓军 ,  戴国礼 ,  秦垦 ,  尹跃 ,  秦小雅 ,  梁晓婕

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明公开了一种黑果枸杞花青素合成相关的MYB转录抑制因子LrETC1及其应用。属于基因工程技术领域。本发明筛选克隆到了参与花青素合成的MYB转录抑制因子：LrETC1，其基因cDNA共240bp，编码79个氨基酸；通过蛋白序列数据库分析显示属于R3类MYB转录因子。多重序列比对和进化树分析表明其属于AtCPC‑like类转录抑制因子。是定位于细胞核中的没有激活功能的转录因子。通过农杆菌介导的遗传转化获得LrETC1转基因拟南芥株系，与野生型相比，种子的种皮呈现出浅棕色，在高蔗糖浓度胁迫条件下的拟南芥幼苗无色素积累且相关结构基因的表达水平显著下调。

公开(公告)号：CN118165909A

公开(公告)日：2024-06-11

申请号：CN202410284071.2

申请日：2024-03-13

Applicant: 宁夏农林科学院枸杞科学研究所

Inventor： 樊云芳 ,  陈晓军 ,  李姝瑶 ,  戴国礼 ,  秦小雅 ,  尹跃 ,  梁晓婕

IPC: C12N5/04 ,  C12N15/82 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种基于枸杞原生质体的瞬时转化的方法。属于生物技术领域。本发明采用了枸杞的“胶带三明治法”在无菌叶片上去除下表皮，并在酶解前使用甘露醇预处理。只需4小时即可获得2.34×106g‑1·FW的原生质体，活力比率达91.26％。通过将原生质体与含有质粒DNA的溶液在40％PEG4000和0.2M甘露醇的条件下孵育20分钟，实现了约40％的转染效率。此外，采用亚细胞定位研究验证了转化系统的可靠性和有效性。本发明建立了一种高效的枸杞原生质体分离和PEG介导转化系统，为分子研究奠定了基础，并提供了一种新的转化途径，可用于后续的生物育种工作。