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公开(公告)号：CN116656660A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202211706161.3
申请日：2022-12-29
申请人： 天津科技大学 , 茂德科技(天津)有限公司
摘要： 本发明涉及酶工程技术领域，尤其涉及一种提高蔗糖异构酶热稳定性的突变体及其重组菌株。所述蔗糖异构酶突变体的氨基酸如SEQ ID NO.1所示。所述蔗糖异构酶突变体是在分散泛菌(Pantoea dispersa)来源的野生型蔗糖异构酶的基础上，发生第199位氨基酸由Ala突变成Leu获得的，其热稳定性较野生型提高了32.51％。利用本发明中的蔗糖异构酶突变体进行催化实验，催化产物中异麦芽酮糖的纯度可达到100％。本发明为蔗糖异构酶工业化应用方面奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116042497B
公开(公告)日：2024-07-30
申请号：CN202211220201.3
申请日：2022-09-29
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，涉及工业微生物育种，特别涉及一种解淀粉芽孢杆菌底盘菌株及其应用。本发明提供了一种解淀粉芽孢杆菌基因工程菌，该基因工程菌基因组中缺失了噬菌体蛋白合成相关基因簇，作为适宜的底盘菌株，还可以进一步异源过表达耐酸性高温α‑淀粉酶基因。本发明从实验和生产中的实际情况出发，分析影响高密度发酵菌体裂解的不良因素，通过对基因工程宿主的改造，最终获得了一种能够减缓菌体自溶以及高产耐酸性高温α‑淀粉酶的基因工程菌株，并且为构建耐酸性高温α‑淀粉酶高产底盘菌株提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN113913357B
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202111182462.6
申请日：2021-10-11
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，涉及工业微生物的育种，特别涉及一种生产碱性蛋白酶的底盘菌株及其构建方法与用途。本发明提供了一种解淀粉芽孢杆菌基因工程菌株，该基因工程菌株不表达解淀粉芽孢杆菌基因组上的六种胞外蛋白酶基因aprE，bpr，vpr，mpr，nprE，epr，胞外多糖基因簇eps，聚谷氨酸基因簇pgs和核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的噬菌体相关基因，优选的还异源过表达碱性蛋白酶基因aprE。本发明从实验和生产中的实际情况出发，分析影响发酵性能的不良因素，通过对基因工程宿主的改造和基因精简，最终获得了一种能够高产碱性蛋白酶的底盘菌株，并且为构建蛋白酶高产底盘菌株提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN115125247A
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN202210671305.X
申请日：2022-06-14
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N9/56 , C12N1/21 , C12R1/11
摘要： 本发明通过对枯草芽孢杆菌来源的启动子分析改造获得了一种强度提高的新型组合启动子pα2‑α2。本发明还提供包含该组合启动子的表达载体、表达系统。本发明所述组合启动子用于控制基因表达，尤其应用于解淀粉芽孢杆菌代谢工程领域，可将碱性蛋白酶表达活性提高144％，为介导解淀粉芽胞杆菌表达系统中异源碱性蛋白酶基因的表达奠定基础，推动碱性蛋白酶的高效表达及工业化生产。
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公开(公告)号：CN115125245B
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202210671295.X
申请日：2022-06-14
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N15/12 , C12N1/21 , C12R1/07
摘要： 本发明通过对芽孢杆菌来源的启动子‑10区序列定向改造获得了一种强度提高的启动子突变体，核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还提供包含该启动子突变体的表达载体、表达系统。本发明所述启动子突变体用于控制基因表达，尤其应用于解淀粉芽孢杆菌代谢工程领域，可以将绿色荧光蛋白GFP异源表达活性提高至178％，介导解淀粉芽胞杆菌表达系统中异源蛋白的表达奠定基础。
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公开(公告)号：CN114752582B
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202210321130.X
申请日：2022-03-24
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/81 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P19/14 , C12R1/19 , C12R1/84
摘要： 本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株，获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。相同条件下，本发明突变体可在400mmol/L葡萄糖的激活下最高达到249.61％的相对活力，在葡萄糖浓度为2mol/L时，其相对活力仍能达到98.37％，具有良好的葡萄糖耐受能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN114752582A
公开(公告)日：2022-07-15
申请号：CN202210321130.X
申请日：2022-03-24
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/81 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P19/14 , C12R1/19 , C12R1/84
摘要： 本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株，获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。相同条件下，本发明突变体可在400mmol/L葡萄糖的激活下最高达到249.61％的相对活力，在葡萄糖浓度为2mol/L时，其相对活力仍能达到98.37％，具有良好的葡萄糖耐受能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN114703165A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210376425.7
申请日：2022-04-02
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株，获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体T331Q，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。相同条件下，本发明突变体可在400mmol/L葡萄糖的激活下最高达到239.0％的相对活力，在葡萄糖浓度为1.5mol/L时，其相对活力仍能达到112.61％，具有良好的葡萄糖耐受能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN115125247B
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202210671305.X
申请日：2022-06-14
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N9/56 , C12N1/21 , C12R1/11
摘要： 本发明通过对枯草芽孢杆菌来源的启动子分析改造获得了一种强度提高的新型组合启动子pα2‑α2。本发明还提供包含该组合启动子的表达载体、表达系统。本发明所述组合启动子用于控制基因表达，尤其应用于解淀粉芽孢杆菌代谢工程领域，可将碱性蛋白酶表达活性提高144％，为介导解淀粉芽胞杆菌表达系统中异源碱性蛋白酶基因的表达奠定基础，推动碱性蛋白酶的高效表达及工业化生产。
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公开(公告)号：CN115011582B
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202210525603.8
申请日：2022-05-06
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/81 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P19/02 , C12P7/22 , C12R1/84 , C12R1/19
摘要： 本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株，获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体A354P，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。相同条件下，突变体A354P的比活力为36.71U/mg，较野生型提高了40.28％；而且突变体A354P可在600mmol/L葡萄糖的激活下最高达到190.29％的相对活力，相比野生型具有显著提高的葡萄糖耐受能力；突变体A354P对于虎杖苷也具有更强的水解能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。
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