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公开(公告)号：CN116804210A
公开(公告)日：2023-09-26
申请号：CN202211571355.7
申请日：2022-12-08
Applicant: 复旦大学附属中山医院
IPC: C12N15/864 , C12N15/52 , C12N15/64 , C12Q1/18 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及一种肠道病毒载体及其应用，属于生物医药技术领域。本发明提供一种肠道病毒载体，肠道病毒载体以EV71复制子EV71replicon为骨架，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供一种可表达其他膜蛋白的或可表达分泌蛋白的肠道病毒载体，以及构建方法。本发明还提供了带有膜蛋白报告基因的CA16感染性克隆(CA16‑memHiBiT)，并拯救出重组病毒。通过本发明克服了肠道病毒载体自身的限制，使其能表达包括胞内、胞外和膜上等各种形式的外源蛋白，从而拓展了肠道病毒载体的应用范围。
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公开(公告)号：CN116218907B
公开(公告)日：2025-04-22
申请号：CN202310134693.2
申请日：2023-02-20
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明公开了带有HiBiT新型报告基因的肠道病毒感染性克隆及其构建方法和应用，包括带有HiBiT新型报告基因的肠道病毒EVA71、CVA16、CVA10及CVA7感染性克隆，在EVA71、CVA16、CVA7及CVA10感染性克隆的基础上首次使用HiBiT作为报告基因，制备EVA71‑HiBiT、CVA16‑HiBiT、CVA7‑HiBiT及CVA10‑HiBiT感染性克隆，进一步通过感染性克隆拯救报告病毒，在体外通过细胞病变、空斑、WB、流式实验验证报告病毒的生物学活性及其遗传稳定性。本发明所涉及的病毒克隆或报告病毒在抗肠道病毒的药物以及中和抗体高通量筛选领域具有广泛应用价值。
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公开(公告)号：CN116286681A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202211397902.4
申请日：2022-11-09
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明涉及一种带荧光素酶基因Nluc的CA16病毒的感染性克隆及其构建和应用，将OP293089株CA16的基因组P1区构建至pcDNA中，P2和P3区构建至pUC57载体中，P1和P2+P3区与pSVA载体重组构建CA16感染性克隆；再引入Nluc荧光素酶报告基因，从而构建pSVA‑CA16‑Nluc感染性克隆。拯救出CA16‑Nluc病毒后，通过实验验证其具有与亲本病毒类似的活性。CA16‑Nluc在Vero细胞中连续传代后，通过实验验证其在体外细胞培养中具有遗传稳定性。此外，该感染性克隆可用于高通量筛药，在病毒复制和致病机制的基础性研究、药物高通量筛选以及中和抗体筛选等方面应用广泛。
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公开(公告)号：CN116218907A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202310134693.2
申请日：2023-02-20
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明公开了带有HiBiT新型报告基因的肠道病毒感染性克隆及其构建方法和应用，包括带有HiBiT新型报告基因的肠道病毒EVA71、CVA16、CVA10及CVA7感染性克隆，在EVA71、CVA16、CVA7及CVA10感染性克隆的基础上首次使用HiBiT作为报告基因，制备EVA71‑HiBiT、CVA16‑HiBiT、CVA7‑HiBiT及CVA10‑HiBiT感染性克隆，进一步通过感染性克隆拯救报告病毒，在体外通过细胞病变、空斑、WB、流式实验验证报告病毒的生物学活性及其遗传稳定性。本发明所涉及的病毒克隆或报告病毒在抗肠道病毒的药物以及中和抗体高通量筛选领域具有广泛应用价值。
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