公开(公告)号：CN116286681A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202211397902.4

申请日：2022-11-09

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 章树业 ,  喻锐 ,  王敏 ,  刘丽珍 ,  闫静静 ,  范俊 ,  张晓燕 ,  徐建青

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/10 ,  C12N15/66 ,  C12N15/86 ,  C12N15/53 ,  C12N15/65 ,  C12N1/02

Abstract: 本发明涉及一种带荧光素酶基因Nluc的CA16病毒的感染性克隆及其构建和应用，将OP293089株CA16的基因组P1区构建至pcDNA中，P2和P3区构建至pUC57载体中，P1和P2+P3区与pSVA载体重组构建CA16感染性克隆；再引入Nluc荧光素酶报告基因，从而构建pSVA‑CA16‑Nluc感染性克隆。拯救出CA16‑Nluc病毒后，通过实验验证其具有与亲本病毒类似的活性。CA16‑Nluc在Vero细胞中连续传代后，通过实验验证其在体外细胞培养中具有遗传稳定性。此外，该感染性克隆可用于高通量筛药，在病毒复制和致病机制的基础性研究、药物高通量筛选以及中和抗体筛选等方面应用广泛。