公开(公告)号：CN102719465A

公开(公告)日：2012-10-10

申请号：CN201110077001.2

申请日：2011-03-29

Applicant: 复旦大学

Inventor： 马端 ,  张进 ,  王慧君 ,  罗欣

IPC: C12N15/63 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及可诱导性组织特异性表达载体及其用途。本可诱导性组织特异性表达载体，主要包括以下结构：EF1α启动子，EGFP荧光标记基因，两端连有同向LoxP序列的BGHpolyA加尾转录终止序列和内部引入酶切位点的内含子序列；所述载体为pEFGLPAL-MIR，其使用EF1alpha通用启动子驱动基因表达，EGFP荧光标记基因用于指示基因的表达，两段连有同向LoxP71和LoxP66的BDHpolyA加尾转录终止信号，可被Cre酶诱导；在所述的终止信号其后的是一段内含子序列，表达miRNA前体插入该内含子中。本发明中构建的microRNA表达载体可成功的表达特异的microRNA，并可通过多种方法确定microRNA的表达；所述的表达载体在ES细胞中，microRNA表达不容易被沉默，能成功的应用于转基因小鼠的制备。

公开(公告)号：CN102719465B

公开(公告)日：2014-01-08

申请号：CN201110077001.2

申请日：2011-03-29

Applicant: 复旦大学

Inventor： 马端 ,  张进 ,  王慧君 ,  罗欣

IPC: C12N15/63 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及可诱导性组织特异性表达载体及其用途。本可诱导性组织特异性表达载体，主要包括以下结构：EF1α启动子，EGFP荧光标记基因，两端连有同向LoxP序列的BGHpolyA加尾转录终止序列和内部引入酶切位点的内含子序列；所述载体为pEFGLPAL-MIR，其使用EF1alpha通用启动子驱动基因表达，EGFP荧光标记基因用于指示基因的表达，两段连有同向LoxP71和LoxP66的BDHpolyA加尾转录终止信号，可被Cre酶诱导；在所述的终止信号其后的是一段内含子序列，表达miRNA前体插入该内含子中。本发明中构建的microRNA表达载体可成功的表达特异的microRNA，并可通过多种方法确定microRNA的表达；所述的表达载体在ES细胞中，microRNA表达不容易被沉默，能成功的应用于转基因小鼠的制备。