检测肝肿瘤组织豪猪音配体的方法

    公开(公告)号:CN113740535B

    公开(公告)日:2024-09-20

    申请号:CN202010479956.X

    申请日:2020-05-29

    申请人: 复旦大学

    摘要: 本发明属生物医药技术领域,涉及检测肝肿瘤组织豪猪音配体的方法,具体涉及基于适配体生物传感技术检测肝肿瘤组织豪猪音配体的方法,本方法包括豪猪音配体的DNA适配体的筛选,建立基于适配体高灵敏特异方法以及微芯片技术检测豪猪音配体。本方法测定肝癌组织中SHh的阳性率与特异性与用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果相当,与癌旁组织的差异显著,其检测特异性和阳性率高,与ELISA相比,方法简单、耗时缩短、操作简便、批次重复性好,结合微流控装置可建成实时检测装置。本发明为监测药物敏感性和进展、预测包括HCC在内的恶性肿瘤的预后提供了手段。

    一种高耐药性Huh-7-DN肝癌细胞株

    公开(公告)号:CN107574152B

    公开(公告)日:2021-07-02

    申请号:CN201610514352.8

    申请日:2016-07-04

    申请人: 复旦大学

    发明人: 吴健 丁佳 周笑天

    IPC分类号: C12N5/09 C12Q1/02

    摘要: 本发明属微生物动物细胞系领域,涉及一种具有高耐药性的人肝癌细胞株Huh‑7‑DN及其建立方法,其保藏编号:CGMCC No.12253。本细胞系为人源性细胞,与其亲本细胞相比,具有以下生物学特性:流式细胞鉴定结果显示其稳定表达CD133/EpCAM双阴性的细胞表面分子标记;呈现上皮细胞间质转化(EMT)特征、高豪猪信号活性和高耐药的特点,并高表达多药耐药相关ABCC1转运蛋白。本发明所述的具有高耐药性的人肝癌细胞株Huh‑7‑DN可作为人肝细胞癌多药耐药的研究细胞模型,其具有独特的分子生物学特性、异质性、多态性,有助于应用在揭示人肝细胞癌的耐药机制和化疗药物的筛选。

    琥珀酸GPR-91受体作为分子靶点在制药中的用途

    公开(公告)号:CN111781369A

    公开(公告)日:2020-10-16

    申请号:CN201911091200.1

    申请日:2019-11-09

    申请人: 复旦大学

    发明人: 吴健 刘雪静 牛辰

    IPC分类号: G01N33/68

    摘要: 本发明属生物医药技术领域,涉及靶向琥珀酸-GPR-91受体信号通路,尤其涉及琥珀酸GPR-91受体作为分子靶点在制备治疗非酒精性脂肪性肝炎相关纤维化的药物中的用途。本发明经体内及体外实验结果表明,非酒精性脂肪性肝炎(NASH)发生时肝细胞内琥珀酸的升高是肝星状细胞(HSC)活化的重要信号分子,肝细胞与HSC间通过琥珀酸-GPR-91受体信号通路的“对话”是NASH肝纤维化关键分子基础。本发明为治疗非酒精性脂肪性肝炎相关肝纤维化提供了一个新的干预方案及思路。

    用于检测肿瘤药物敏感性及转移倾向的微流体共培养装置

    公开(公告)号:CN109385373A

    公开(公告)日:2019-02-26

    申请号:CN201710694244.8

    申请日:2017-08-11

    申请人: 复旦大学

    发明人: 吴健 叶娟

    IPC分类号: C12M3/00 C12M1/34

    摘要: 本发明属生物医药及实验技术领域,涉及一种用于检测肿瘤药物敏感性及转移倾向的微流体共培养装置。本装置由两个培养小室组成,两室间由PEG水凝胶相隔,水凝胶中交联豪猪信号受体PTCH1或SHh特异抗体已捕获豪猪适配体(SHh),两室分别设有进水口和出水口,培养液由液体流量根据压力控制,两室分别安装探测电极其表面标记有SHh适配体DNA,用于结合SHh以产生电信号。本发明采用微流体技术培养手术切除标本,再经表面修饰及电化学感应技术能实时检测微量分子标记,运用适配体技术制备豪猪音配体的实时检测探针,用于监控SHh的水平改变,能预测肝癌组织的转移性及对化疗药物的敏感性。

    Jcad基因flox小鼠及肝不同类型细胞特异敲除小鼠的构建方法及应用

    公开(公告)号:CN117867017A

    公开(公告)日:2024-04-12

    申请号:CN202311717122.8

    申请日:2023-12-13

    申请人: 复旦大学

    摘要: 本发明公开了Jcad基因flox小鼠及肝不同类型细胞特异敲除小鼠的构建方法及应用,所述构建方法包括:(1)对小鼠的Jcad基因的3号外显子两侧插入loxP位点,进行flox修饰,获得Jcad基因的flox小鼠,命名为Jcadflox/flox小鼠;(2)将Jcadflox/flox小鼠分别与Albumin‑Cre小鼠、GFAP‑cre/ERT2小鼠和CK19CreERT小鼠杂交,分别获得Jcad基因的肝实质细胞特异性敲除小鼠、Jcad基因的肝星状细胞特异性敲除小鼠,和Jcad基因的肝脏胆管上皮细胞特异性敲除小鼠。本发明成功构建Jcad肝实质细胞特异性敲除小鼠,助力揭示Jcad基因在大部肝切除后再生修复中关键调控作用;且成功构建Jcad肝星状细胞和胆管细胞特异性敲除鼠,探究Jcad基因在胆汁淤积型肝病及胆管损伤发生和进展中的调控机制。

    构建小鼠非酒精性脂肪性肝炎模型的方法

    公开(公告)号:CN110150222A

    公开(公告)日:2019-08-23

    申请号:CN201810138709.6

    申请日:2018-02-10

    申请人: 复旦大学

    发明人: 吴健 刘雪静

    摘要: 本发明属于生物医学领域,涉及动物模型的构建方法,具体涉及一种非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型优化构建方法。本发明基于饮食方式和饲养周期的改变,在比较三种饲养方式所形成模型特征的基础上,确定获得与NASH临床指征最为相似的小鼠模型。本发明建立的模型的量化观察指标适用于药物临床前疗效终点评估,为进一步为研究比较不同药物优劣提供一个标准化小鼠NASH模型。

    用于检测肿瘤药物敏感性及转移倾向的微流体共培养装置

    公开(公告)号:CN109385373B

    公开(公告)日:2022-01-18

    申请号:CN201710694244.8

    申请日:2017-08-11

    申请人: 复旦大学

    发明人: 吴健 叶娟

    IPC分类号: C12M3/00 C12M1/34

    摘要: 本发明属生物医药及实验技术领域,涉及一种用于检测肿瘤药物敏感性及转移倾向的微流体共培养装置。本装置由两个培养小室组成,两室间由PEG水凝胶相隔,水凝胶中交联豪猪信号受体PTCH1或SHh特异抗体已捕获豪猪适配体(SHh),两室分别设有进水口和出水口,培养液由液体流量根据压力控制,两室分别安装探测电极其表面标记有SHh适配体DNA,用于结合SHh以产生电信号。本发明采用微流体技术培养手术切除标本,再经表面修饰及电化学感应技术能实时检测微量分子标记,运用适配体技术制备豪猪音配体的实时检测探针,用于监控SHh的水平改变,能预测肝癌组织的转移性及对化疗药物的敏感性。

    检测肝肿瘤组织豪猪音配体的方法

    公开(公告)号:CN113740535A

    公开(公告)日:2021-12-03

    申请号:CN202010479956.X

    申请日:2020-05-29

    申请人: 复旦大学

    摘要: 本发明属生物医药技术领域,涉及检测肝肿瘤组织豪猪音配体的方法,具体涉及基于适配体生物传感技术检测肝肿瘤组织豪猪音配体的方法,本方法包括豪猪音配体的DNA适配体的筛选,建立基于适配体高灵敏特异方法以及微芯片技术检测豪猪音配体。本方法测定肝癌组织中SHh的阳性率与特异性与用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果相当,与癌旁组织的差异显著,其检测特异性和阳性率高,与ELISA相比,方法简单、耗时缩短、操作简便、批次重复性好,结合微流控装置可建成实时检测装置。本发明为监测药物敏感性和进展、预测包括HCC在内的恶性肿瘤的预后提供了手段。

    促癌基因JCAD及其作为靶点在制备治疗肝癌的药物中的用途

    公开(公告)号:CN109381701A

    公开(公告)日:2019-02-26

    申请号:CN201710694242.9

    申请日:2017-08-11

    申请人: 复旦大学

    发明人: 吴健 叶娟

    摘要: 本发明属生物医药技术领域具体涉及促癌基因JCAD及其作为靶点在制备治疗肝癌的药物中的用途。经试验表明,本发明的潜在促癌基因JCAD在HCC细胞系及临床样本中高表达,在癌症发生过程中与LATS2发生相互作用并且抑制LATS2磷酸化YAP,使后者的磷酸化水平低下,通过Hippo信号通路促进肝癌细胞的增殖;本发明公开了具干扰作用的shRNA序列,其干扰JCAD在细胞中的表达,本发明还包括重组慢病毒介导JCAD过表达及相应JCAD过表达细胞株。本发明的促癌基因JCAD有助于肝癌疾病的发病机制研究,能作为肝癌治疗的新靶点为制备治疗肝癌的药物。

    一种高耐药性Huh-7-DN肝癌细胞株

    公开(公告)号:CN107574152A

    公开(公告)日:2018-01-12

    申请号:CN201610514352.8

    申请日:2016-07-04

    申请人: 复旦大学

    发明人: 吴健 丁佳 周笑天

    IPC分类号: C12N5/09 C12Q1/02

    摘要: 本发明属微生物动物细胞系领域,涉及一种具有高耐药性的人肝癌细胞株Huh-7-DN及其建立方法,其保藏编号:CGMCC No.12253。本细胞系为人源性细胞,与其亲本细胞相比,具有以下生物学特性:流式细胞鉴定结果显示其稳定表达CD133/EpCAM双阴性的细胞表面分子标记;呈现上皮细胞间质转化(EMT)特征、高豪猪信号活性和高耐药的特点,并高表达多药耐药相关ABCC1转运蛋白。本发明所述的具有高耐药性的人肝癌细胞株Huh-7-DN可作为人肝细胞癌多药耐药的研究细胞模型,其具有独特的分子生物学特性、异质性、多态性,有助于应用在揭示人肝细胞癌的耐药机制和化疗药物的筛选。