公开(公告)号：CN103276058A

公开(公告)日：2013-09-04

申请号：CN201310150907.1

申请日：2013-04-26

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 崔艳华 ,  曲晓军 ,  陈章庭 ,  张超 ,  王超 ,  丁忠庆

IPC: C12Q1/68 ,  C12R1/01

Abstract: 一种乳酸菌IIa类抗菌肽的PCR筛选方法，涉及一种抗菌肽的筛选方法。本发明是要解决传统的抗菌肽筛选方法存在的敏感性低的技术问题。本发明的方法为：一、IIa类抗菌肽聚类分析与筛选引物设计，PCR产物的获得；二、PCR产物载体连接与测序，获得乳酸菌IIa类抗菌肽。本发明PCR筛选的抗菌肽的基因序列与enterocin A的编码基因的同源性为99％，敏感性高。本发明应用于抗菌肽的筛选领域。

公开(公告)号：CN102043057A

公开(公告)日：2011-05-04

申请号：CN201010540962.8

申请日：2010-11-11

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 崔艳华 ,  马莺 ,  徐桂连 ,  代翠红 ,  丁忠庆

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/558 ,  G01N33/532

Abstract: 一种用于检测肉类及水产品中土霉素残留的试纸条及其制备方法，涉及一种检测食源性土霉素残留的试纸条及其制备方法。本发明为了解决现有检测土霉素的方法操作繁琐，样品处理复杂，不适合现场检测的问题。试纸条由PVC背板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫组成。制备方法：一、土霉素人工抗原的合成；二、制备土霉素-载体蛋白偶联物，制成检测线和质控线；三、制备抗土霉素单克隆抗体；四、制备胶体金溶液，制得抗土霉素单克隆抗体-胶体金标记物，然后包被在结合垫上；五、在PVC背板上依次粘附样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，即得到用于检测肉类及水产品中土霉素残留的试纸条。应用于食源性土霉素残留检测领域。

公开(公告)号：CN101995469A

公开(公告)日：2011-03-30

申请号：CN201010543868.8

申请日：2010-11-15

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 崔艳华 ,  马莺 ,  徐桂连 ,  代翠红 ,  丁忠庆

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/558

Abstract: 一种用于检测肉类及水产品中金霉素残留的免疫层析试纸条及其制备方法，涉及用于检测金霉素残留的试纸条及其制备方法。解决现有金霉素残留检测的方法，仪器分析法存在操作繁琐、样品处理复杂、成本高、不适合现场检测，酶联免疫检测方法所需试剂主要依赖进口，费用较高的问题。试纸条由PVC背衬、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组成。合成金霉素-载体蛋白偶联物，将其包被在硝酸纤维素膜上构成检测线，羊抗鼠IgG构成质控线；然后制备金霉素单克隆抗体-胶体金标记物，包被在结合垫上，组装加工即可。试纸条特异性强，灵敏度高，检出限5μg/kg，4℃下保存至120天仍有效，检测样品制备简单，检测操作简易，适于实地现场操作。

公开(公告)号：CN102559733A

公开(公告)日：2012-07-11

申请号：CN201210065114.5

申请日：2012-03-13

Applicant: 黑龙江省科学院微生物研究所 ,  哈尔滨工业大学

Inventor： 曲晓军 ,  崔艳华 ,  张超 ,  孙建华 ,  夏海华 ,  王金英 ,  于冲

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/01

Abstract: 导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法，涉及一种导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法。是要解决目前使用大肠杆菌作为宿主表达clfA基因，研制基因工程疫苗存在侵袭性和毒性问题。方法：提取金黄色葡萄球菌的基因组DNA；以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板进行PCR扩增，获得clfA基因；提取保存于大肠杆菌JM109中的质粒pMG36c；分别对clfA基因和质粒pMG36c进行双酶切，将酶切后产物连接；将连接产物转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中，采用氯霉素筛选转化子，构建重组质粒；将重组质粒电转化乳酸乳球菌，即完成。本发明可用于研制基因工程疫苗，安全、无致病性。