一种体外诱导扩增高杀伤活性γδT细胞的方法

    公开(公告)号:CN108949685B

    公开(公告)日:2022-03-29

    申请号:CN201810872610.9

    申请日:2018-08-02

    Inventor: 牛超 崔久嵬 李薇

    Abstract: 本发明涉及一种体外诱导扩增γδT细胞的方法,属于生物技术领域。该方法首先是通过淋巴细胞分离液获得外周血单个核细胞(PBMCs),然后利用含有唑来膦酸、IL‑2、IL‑7和IL‑15的无血清培养基进行刺激培养3天;再用含有IL‑2、IL‑7和IL‑15的无血清培养基进行刺激扩增培养;当培养至7‑9天时候,加入尼克酰胺(Nicotinamide)以提高γδT细胞的抗肿瘤活性。本发明无需对PBMCs进行纯化,在培养14天即可获得纯度在90%以上的γδT细胞;尼克酰胺的加入,明显提高了γδT细胞的抗肿瘤活性。本发明可以将γδT细胞扩增1500倍以上,能够满足临床对γδT细胞数量的要求。本发明操作步骤简单,可操作性强,具有很好的推广价值。

    一种大量扩增NK细胞的方法

    公开(公告)号:CN109679904A

    公开(公告)日:2019-04-26

    申请号:CN201910174417.2

    申请日:2019-03-08

    Abstract: 本发明涉及一种大量扩增NK细胞的方法,属于生物技术领域,首先制备外周血单个核细胞,然后将外周血单个核细胞接种到含有RetroNectin、美罗华抗体、鼠抗人CD161抗体、IL-2、IL-15、IL-18和自体血浆的培养基中,37℃、5%CO2的条件下培养3d后,用含有IL-2、IL-15、IL-18和自体血浆的培养基调整细胞密度至2-3×106个细胞/mL,37℃、5%CO2的条件下培养10-16d,即得大量的NK细胞。本发明解决了现有技术中无法扩增更大数量NK细胞的问题,该方法操作简单,容易实现,扩增效率高,可以获得更高数量的NK细胞以供临床回输,并且细胞纯度高。

    一种嵌合抗原受体γδT细胞的制备方法

    公开(公告)号:CN109234236A

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201811150244.2

    申请日:2018-09-29

    Abstract: 本发明涉及一种嵌合抗原受体γδT细胞的制备方法,首先制备PBMCs,然后在体外对γδT细胞进行扩增,接着加入CAR病毒和polybrene进行感染,本发明方法中根据γδT细胞纯度,来确定制备CAR-γδT细胞时间,不需要额外进行细胞纯化,简化了操作流程,降低了成本,本发明方法操作简单、成本低,制备的CAR-γδT细胞具有特异性肿瘤杀伤作用,并可产业化生产。

    一种带控温计时功能的免疫细胞运送箱

    公开(公告)号:CN108887262A

    公开(公告)日:2018-11-27

    申请号:CN201811125383.X

    申请日:2018-09-26

    Abstract: 本发明公开了一种带控温计时功能的免疫细胞运送箱,包括:外箱体和箱盖,外箱体顶端一侧与箱盖通过合页连接,外箱体左右两边连有背带,外箱体左侧下部安装散热扇;箱盖中间连接有手柄,箱盖的顶端面安装有触控屏,箱盖前部外侧底部设机械电子锁,箱盖内侧中间设有紫外灯;外箱体内设有内箱体,外箱体与内箱体之间形成一个封闭腔体,封闭腔体内装配有套盒和套盒二;外箱体和内箱体的底部位置设蓄电池、制冷模块、散热扇,制冷模块、散热风扇、紫外灯及机械电子锁均与蓄电池连接,制冷模块、紫外灯及机械电子锁均与触控屏连接。本发明可确保免疫细胞制品运送过程的稳定性,确保细胞制品及时、安全运达给患者进行回输。

    一种SARS-CoV-2抗原诱发细胞因子风暴模型的建立及应用

    公开(公告)号:CN116355844A

    公开(公告)日:2023-06-30

    申请号:CN202310628453.8

    申请日:2023-05-31

    Inventor: 牛超 崔久嵬

    Abstract: 本发明公开了一种SARS‑CoV‑2抗原诱发细胞因子风暴模型的建立及应用,具体的,所述的方法包括在免疫细胞的培养体系中加入SARS‑CoV‑2抗原和白细胞介素。本发明提供了一种SARS‑CoV‑2抗原诱发细胞因子风暴的模型,该模型操作简单,对实验室级别和硬件要求比较低,适合各大科研院所和企业开发抗SARS‑CoV‑2诱发细胞因子风暴的有效药物,也适用于临床筛选针对SARS‑CoV‑2感染患者的有效治疗药物,具有良好的应用前景。

    一种抗肿瘤功能增强型CAR-T细胞的制备方法

    公开(公告)号:CN115927182A

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202310051620.7

    申请日:2023-02-02

    Abstract: 本发明公开了一种抗肿瘤功能增强型CAR‑T细胞的制备方法。本发明先使用双膦酸盐和包被液共同刺激PBMCs以激活T细胞,再转染含有CAR的载体,获得的CAR‑T细胞不仅对高表达靶抗原的肿瘤细胞表现出较强的杀伤作用,而且对靶抗原表达明显降低的肿瘤细胞也表现出非常强的杀伤作用,能够提高CAR‑T细胞治疗的疗效、降低CAR‑T细胞治疗的耐药和复发。本发明同时简化了CAR‑T细胞的制备工艺,并且安全有效,可用于血液肿瘤和实体肿瘤的免疫细胞治疗。

    一种体外诱导扩增高杀伤活性γδT细胞的方法

    公开(公告)号:CN108949685A

    公开(公告)日:2018-12-07

    申请号:CN201810872610.9

    申请日:2018-08-02

    Inventor: 牛超 崔久嵬 李薇

    Abstract: 本发明涉及一种体外诱导扩增γδT细胞的方法,属于生物技术领域。该方法首先是通过淋巴细胞分离液获得外周血单个核细胞(PBMCs),然后利用含有唑来膦酸、IL‑2、IL‑7和IL‑15的无血清培养基进行刺激培养3天;再用含有IL‑2、IL‑7和IL‑15的无血清培养基进行刺激扩增培养;当培养至7‑9天时候,加入尼克酰胺(Nicotinamide)以提高γδT细胞的抗肿瘤活性。本发明无需对PBMCs进行纯化,在培养14天即可获得纯度在90%以上的γδT细胞;尼克酰胺的加入,明显提高了γδT细胞的抗肿瘤活性。本发明可以将γδT细胞扩增1500倍以上,能够满足临床对γδT细胞数量的要求。本发明操作步骤简单,可操作性强,具有很好的推广价值。

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