一种大量扩增NK细胞的方法
    1.
    发明公开

    公开(公告)号:CN109679904A

    公开(公告)日:2019-04-26

    申请号:CN201910174417.2

    申请日:2019-03-08

    IPC分类号: C12N5/0783

    摘要: 本发明涉及一种大量扩增NK细胞的方法,属于生物技术领域,首先制备外周血单个核细胞,然后将外周血单个核细胞接种到含有RetroNectin、美罗华抗体、鼠抗人CD161抗体、IL-2、IL-15、IL-18和自体血浆的培养基中,37℃、5%CO2的条件下培养3d后,用含有IL-2、IL-15、IL-18和自体血浆的培养基调整细胞密度至2-3×106个细胞/mL,37℃、5%CO2的条件下培养10-16d,即得大量的NK细胞。本发明解决了现有技术中无法扩增更大数量NK细胞的问题,该方法操作简单,容易实现,扩增效率高,可以获得更高数量的NK细胞以供临床回输,并且细胞纯度高。

    一种嵌合抗原受体γδT细胞的制备方法

    公开(公告)号:CN109234236A

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201811150244.2

    申请日:2018-09-29

    IPC分类号: C12N5/10 C12N15/86

    摘要: 本发明涉及一种嵌合抗原受体γδT细胞的制备方法,首先制备PBMCs,然后在体外对γδT细胞进行扩增,接着加入CAR病毒和polybrene进行感染,本发明方法中根据γδT细胞纯度,来确定制备CAR-γδT细胞时间,不需要额外进行细胞纯化,简化了操作流程,降低了成本,本发明方法操作简单、成本低,制备的CAR-γδT细胞具有特异性肿瘤杀伤作用,并可产业化生产。

    一种带控温计时功能的免疫细胞运送箱

    公开(公告)号:CN108887262A

    公开(公告)日:2018-11-27

    申请号:CN201811125383.X

    申请日:2018-09-26

    IPC分类号: A01N1/02

    摘要: 本发明公开了一种带控温计时功能的免疫细胞运送箱,包括:外箱体和箱盖,外箱体顶端一侧与箱盖通过合页连接,外箱体左右两边连有背带,外箱体左侧下部安装散热扇;箱盖中间连接有手柄,箱盖的顶端面安装有触控屏,箱盖前部外侧底部设机械电子锁,箱盖内侧中间设有紫外灯;外箱体内设有内箱体,外箱体与内箱体之间形成一个封闭腔体,封闭腔体内装配有套盒和套盒二;外箱体和内箱体的底部位置设蓄电池、制冷模块、散热扇,制冷模块、散热风扇、紫外灯及机械电子锁均与蓄电池连接,制冷模块、紫外灯及机械电子锁均与触控屏连接。本发明可确保免疫细胞制品运送过程的稳定性,确保细胞制品及时、安全运达给患者进行回输。

    一种体外诱导扩增高杀伤活性γδT细胞的方法

    公开(公告)号:CN108949685A

    公开(公告)日:2018-12-07

    申请号:CN201810872610.9

    申请日:2018-08-02

    发明人: 牛超 崔久嵬 李薇

    IPC分类号: C12N5/0783

    摘要: 本发明涉及一种体外诱导扩增γδT细胞的方法,属于生物技术领域。该方法首先是通过淋巴细胞分离液获得外周血单个核细胞(PBMCs),然后利用含有唑来膦酸、IL‑2、IL‑7和IL‑15的无血清培养基进行刺激培养3天;再用含有IL‑2、IL‑7和IL‑15的无血清培养基进行刺激扩增培养;当培养至7‑9天时候,加入尼克酰胺(Nicotinamide)以提高γδT细胞的抗肿瘤活性。本发明无需对PBMCs进行纯化,在培养14天即可获得纯度在90%以上的γδT细胞;尼克酰胺的加入,明显提高了γδT细胞的抗肿瘤活性。本发明可以将γδT细胞扩增1500倍以上,能够满足临床对γδT细胞数量的要求。本发明操作步骤简单,可操作性强,具有很好的推广价值。

    一种体外诱导扩增高杀伤活性γδT细胞的方法

    公开(公告)号:CN108949685B

    公开(公告)日:2022-03-29

    申请号:CN201810872610.9

    申请日:2018-08-02

    发明人: 牛超 崔久嵬 李薇

    IPC分类号: C12N5/0783

    摘要: 本发明涉及一种体外诱导扩增γδT细胞的方法,属于生物技术领域。该方法首先是通过淋巴细胞分离液获得外周血单个核细胞(PBMCs),然后利用含有唑来膦酸、IL‑2、IL‑7和IL‑15的无血清培养基进行刺激培养3天;再用含有IL‑2、IL‑7和IL‑15的无血清培养基进行刺激扩增培养;当培养至7‑9天时候,加入尼克酰胺(Nicotinamide)以提高γδT细胞的抗肿瘤活性。本发明无需对PBMCs进行纯化,在培养14天即可获得纯度在90%以上的γδT细胞;尼克酰胺的加入,明显提高了γδT细胞的抗肿瘤活性。本发明可以将γδT细胞扩增1500倍以上,能够满足临床对γδT细胞数量的要求。本发明操作步骤简单,可操作性强,具有很好的推广价值。

    一种NK细胞体外扩增试剂盒

    公开(公告)号:CN208791658U

    公开(公告)日:2019-04-26

    申请号:CN201821375640.0

    申请日:2018-08-24

    IPC分类号: C12M3/00 C12N5/0783

    摘要: 本实用新型涉及一种NK细胞体外扩增试剂盒,包括长方体状的试剂盒盒体和设置在试剂盒盒体上的盒盖,所述试剂盒盒体内设有固定座,所述固定座上左侧设有NK细胞激活无血清培养基放置槽、免疫增强剂放置槽、L-谷氨酰胺放置槽和细胞扩增添加剂放置槽,所述固定座上右侧设有NK细胞激活因子放置槽、PBS放置槽、单克隆抗体放置槽和NK细胞扩增无血清培养基放置槽;所述NK细胞激活因子放置槽为3个以上;所述试剂盒还包括一对子母锁扣,子锁扣和母锁扣分别设置在盒盖的内表面和试剂盒盒体的外表面上。该试剂盒结构简单、使用方便、配套齐全、携带方便,采用配套的扩增方法,可以保证NK细胞体外扩增倍数,提高活化免疫细胞的杀伤活性。

    一种细胞培养袋加液辅助架

    公开(公告)号:CN209669252U

    公开(公告)日:2019-11-22

    申请号:CN201920282572.1

    申请日:2019-03-06

    IPC分类号: C12M3/00

    摘要: 本实用新型涉及一种细胞培养袋加液辅助架,包括底座、主杆和放置架,主杆底端设置有底座,放置架沿主杆长度方向并排设置,各放置架沿主杆的长度方向可滑动、沿主杆周向可旋转设置;放置架包括套环、连接杆和托架,套环套设在主杆上,且套环上沿其径向设置有锁紧通孔,锁紧通孔的外侧设置有六角卡槽,连接杆包括内杆和套设在内杆外侧的外杆,内杆靠近主杆的一端通过螺纹旋设在锁紧通孔内,外杆为与六角卡槽相匹配的六棱管,且六棱管远离主杆的一端设置有托架,托架为圆筒状,圆筒状托架竖直放置。上述技术方案中提供的细胞培养袋加液辅助架,结构简单,使用方便,能有效解决现有技术中存在的安装孔利用不充分时占用空间较大的问题。

    一种细胞培养袋加液装置

    公开(公告)号:CN209816106U

    公开(公告)日:2019-12-20

    申请号:CN201920282591.4

    申请日:2019-03-06

    IPC分类号: C12M1/00

    摘要: 本实用新型涉及一种细胞培养袋加液装置,包括套筒本体和套筒架,套筒本体的一端设置有接管,接管等距均匀设置在套筒本体的一端,接管外壁上设置有凸环;套筒本体的另一端设置有挡圈板,挡圈板呈喇叭状,挡圈板下方的套筒本体外壁上设置有外螺纹;套筒架整体呈圆台状,包括上固定圈和下固定圈,上固定圈为圆筒状,且圆筒状的固定圈内设置有与外螺纹相配合连接的内螺纹,下固定圈与上固定圈之间设置有连接杆,连接杆等距间隔设置在上固定圈和下固定圈之间。上述技术方案中提供的细胞培养袋加液装置,其结构简单,使用方便,能有效解决现有技术中存在的注射器针头、注射器活塞杆的浪费以及仅能一对一加液的问题。

    一种带控温计时功能的免疫细胞运送箱

    公开(公告)号:CN209251517U

    公开(公告)日:2019-08-16

    申请号:CN201821570289.0

    申请日:2018-09-26

    IPC分类号: A01N1/02

    摘要: 本实用新型公开了一种带控温计时功能的免疫细胞运送箱,包括:外箱体和箱盖,外箱体顶端一侧与箱盖通过合页连接,外箱体左右两边连有背带,外箱体左侧下部安装散热扇;箱盖中间连接有手柄,箱盖的顶端面安装有触控屏,箱盖前部外侧底部设机械电子锁,箱盖内侧中间设有紫外灯;外箱体内设有内箱体,外箱体与内箱体之间形成一个封闭腔体,封闭腔体内装配有套盒和套盒二;外箱体和内箱体的底部位置设蓄电池、制冷模块、散热扇,制冷模块、散热风扇、紫外灯及机械电子锁均与蓄电池连接,制冷模块、紫外灯及机械电子锁均与触控屏连接。本实用新型可确保免疫细胞制品运送过程的稳定性,确保细胞制品及时、安全运达给患者进行回输。(ESM)同样的发明创造已同日申请发明专利