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公开(公告)号：CN1673377A
公开(公告)日：2005-09-28
申请号：CN200510016627.7
申请日：2005-03-15
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种重组人PSP94蛋白在大肠杆菌中分泌表达的方法，属于采用大肠杆菌分泌表达有生物活性的人PSP94蛋白的方法。提取前列腺组织总RNA，通过RT－PCR方法钓取中国人PSP94 cDNA序列，插入克隆载体pUC19中，PCR粗筛后进行序列测定；将双酶切后的PSP94蛋白编码基因、信号肽和pBV220质粒进行连接，构建重组质粒pBV－PSP94；阳性重组质粒pBV－PSP94分别转化大肠杆菌菌株，蛋白诱导表达最适温度为40℃，最佳表达时间为5小时。本发明的有益效果是，通过分子生物学技术，突变分泌表达载体的信号肽，在信号肽上引入酶切位点，克服了传统分泌表达载体在表达的蛋白前添加多余氨基酸的问题。
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