公开(公告)号：CN111607638A

公开(公告)日：2020-09-01

申请号：CN202010567593.5

申请日：2020-06-19

Applicant: 吉林大学

Inventor： 柳巨雄 ,  阚兴池 ,  付守鹏 ,  陈应生 ,  冉鑫 ,  郭文晋 ,  曹禹

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/6883 ,  A61K31/7024 ,  A61P15/14

Abstract: 本发明公开了一种具栖冬青苷用于乳腺炎疾病治疗的实验方法，具体包括以下内容：S1、本实验选取分娩后3至7天的ICR小鼠作为实验对象。实验分为5组，分别是空白对照组(NT)、单独给药组(PE)、乳腺炎模型组(LPS)、药物治疗组(LPS+PE)、地塞米松阳性对照组(LPS+DEX)，每组9只小鼠。S2、用戊巴比妥钠(45mg/kg)将小鼠麻醉并保定，然后在小鼠的第四对乳头内注射LPS(0.2mg/kg)用于构建乳腺炎模型，并在24h后收集样品。此具栖冬青苷用于治疗乳腺炎的实验方法，通过石蜡切片的方法检测了乳腺组织的病理损伤情况，利用荧光定量PCR技术评估了乳腺组织中炎性基因IL-1β的表达情况，实验结果表明具栖冬青苷能够有效的治疗LPS诱导的乳腺炎。

公开(公告)号：CN118576360A

公开(公告)日：2024-09-03

申请号：CN202410818316.5

申请日：2024-06-24

Applicant: 吉林大学

Inventor： 付守鹏 ,  郭文晋 ,  张萌 ,  毕峻龙 ,  曹宇 ,  柳巨雄 ,  柳舒 ,  胡惠洁 ,  王蕾

IPC: A61D7/00 ,  C12Q1/6888 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6883 ,  C12Q1/6851 ,  G01N33/68 ,  G01N33/543 ,  A61D3/00

Abstract: 本发明涉及实验动物模型技术领域，本发明提供的一种小鼠乳腺衰老模型的构建方法，构建方法包括如下步骤：选取分娩后1天的C57/BL6母鼠作为实验对象，将母鼠分为空白对照组(NT)和乳腺衰老模型组(D‑Galactose)，每组的样本量为5只。腹腔注射戊巴比妥钠将小鼠麻醉并保定，以乳导管灌注的方法对第四对乳头注射D‑半乳糖，注1个周期注射四次，每隔1天注射一次，共进行4个周期，并在最后一次D‑半乳糖注射后的48h后收集乳腺衰老模型组的乳腺组织乳腺样品。本发明构建的模型能够模拟临床上奶牛乳腺衰老过程中乳腺组织发生的病理变化特点，并且具有良好的可重复性和便捷性，因此该模型具有巨大的实际应用价值。

公开(公告)号：CN110376366A

公开(公告)日：2019-10-25

申请号：CN201910655276.6

申请日：2019-07-19

Applicant: 吉林大学

Inventor： 柳巨雄 ,  郭文晋 ,  付守鹏 ,  曹宇 ,  阚兴池

IPC: G01N33/50 ,  G01N21/64 ,  C12Q1/6876

Abstract: 本发明公开了一种烟酸通过GPR109A受体应用于治疗奶牛乳腺炎的实验方法，包括以下步骤：S1、乳腺炎奶牛的筛选：初步筛选出乳腺炎为阳性的奶牛，其体细胞数约为80-200万/mL；S2、奶牛血清和乳清中促炎因子的检测：分别在第0天和第7天收集正常奶牛、乳腺炎奶牛和饲喂烟酸的乳腺炎奶牛中的外周血，然后提取血液中的血清。本发明通过制定全新的奶牛乳腺炎治疗策略，通过分离奶牛的血清和乳清检测了烟酸治疗后乳腺炎奶牛体内促炎介质的表达，利用分子生物学方法全面的评估了烟酸对奶牛乳腺炎的治疗效果，烟酸能够有效减少奶牛血清和乳清中促炎介质的表达，从而达到保护乳腺缓解炎症的功效。

公开(公告)号：CN116983290A

公开(公告)日：2023-11-03

申请号：CN202310979358.2

申请日：2023-08-05

Applicant: 吉林大学

Inventor： 付守鹏 ,  郭文晋 ,  耿睿奇 ,  柳巨雄 ,  柳舒 ,  胡惠洁

IPC: A61K31/122 ,  G01N33/68 ,  C12Q1/6883 ,  G01N21/78 ,  A61P15/14 ,  A61K49/00

Abstract: 本发明公开了一种虾青素治疗乳腺炎疾病治疗的实验方法，具体包括以下内容:S1、本实验选取分娩后3至15天的ICR小鼠作为实验对象，实验分为组，分别是空白对照组(NT)、单独给药组(Ax)、乳腺炎模型组(LPS)、药物治疗组(LPS+Ax)，每组9只小鼠，S2、用戊巴比妥钠(45mg/kg)将小鼠麻醉并保定，然后在小鼠的第四对乳头内注射LPS(0.2mg/kg)用于构建乳腺炎模型，并在24h后收集样品，此虾青素首用于治疗乳腺炎的实验方法，通过石蜡切片的方法检测了乳腺组织的病理损伤情况，利用荧光定量PCR技术评估了乳腺组织中炎性基因IL‑1β、TNF‑α的表达情况并且利用western blot技术检测了IκB‑α信号轴，实验结果表明虾青素能够有效的治疗LPS诱导的乳腺炎。

公开(公告)号：CN114667969B

公开(公告)日：2023-10-10

申请号：CN202210318087.1

申请日：2022-03-29

Applicant: 吉林大学

Inventor： 付守鹏 ,  徐平 ,  柳巨雄 ,  阚兴池 ,  胡桂秋 ,  郭文晋 ,  曹宇

IPC: A01K67/027 ,  C12Q1/6883 ,  G01N33/68 ,  G01N1/30 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种小鼠乳腺纤维化模型的构建方法及其应用。本发明的构建方法包括如下步骤：本实验选取分娩后1天的C57/BL6母鼠作为实验对象，将母鼠分为空白对照组(NT)和乳腺纤维化模型组(TGF‑β1)，每组的样本量包含5只母鼠。腹腔注射戊巴比妥钠将小鼠麻醉并保定，以乳导管灌注的方法对第四对乳头注射TGF‑β1，注射浓度为100ng/mL，注射频率为和次数分别为，每两天注射一次共四次，并在最后一次TGF‑β1注射后的24h后收集乳腺样品。本发明构建的模型能够模拟临床上奶牛乳腺纤维化过程中乳腺组织发生的病理变化特点，并且具有良好的可重复性和便捷性，因此该模型具有巨大的实际应用价值。

公开(公告)号：CN111607638B

公开(公告)日：2023-05-16

申请号：CN202010567593.5

申请日：2020-06-19

Applicant: 吉林大学

Inventor： 柳巨雄 ,  阚兴池 ,  付守鹏 ,  陈应生 ,  冉鑫 ,  郭文晋 ,  曹禹

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/6883 ,  A61K31/7024 ,  A61P15/14

Abstract: 本发明公开了一种具栖冬青苷用于乳腺炎疾病治疗的实验方法，具体包括以下内容：S1、本实验选取分娩后3至7天的ICR小鼠作为实验对象。实验分为5组，分别是空白对照组(NT)、单独给药组(PE)、乳腺炎模型组(LPS)、药物治疗组(LPS+PE)、地塞米松阳性对照组(LPS+DEX)，每组9只小鼠。S2、用戊巴比妥钠(45mg/kg)将小鼠麻醉并保定，然后在小鼠的第四对乳头内注射LPS(0.2mg/kg)用于构建乳腺炎模型，并在24h后收集样品。此具栖冬青苷用于治疗乳腺炎的实验方法，通过石蜡切片的方法检测了乳腺组织的病理损伤情况，利用荧光定量PCR技术评估了乳腺组织中炎性基因IL‑1β的表达情况，实验结果表明具栖冬青苷能够有效的治疗LPS诱导的乳腺炎。

公开(公告)号：CN113564221B

公开(公告)日：2023-04-25

申请号：CN202110851372.5

申请日：2021-07-27

Applicant: 吉林大学

Inventor： 付守鹏 ,  柳巨雄 ,  阚兴池 ,  郭文晋 ,  徐平 ,  黄雅萍 ,  曹宇

IPC: C12Q1/02 ,  A61K31/455 ,  A61P15/14

Abstract: 本发明公开了一种烟酸通过GPR109A受体制备缓解奶牛乳腺纤维化药物的应用，包括以下步骤：S1、体内和体外实验对比在正常奶牛和纤维化倾向奶牛乳腺中GPR109A受体表达差异情况的分析，明确GPR109A受体在乳腺纤维化奶牛乳腺重高表达。S2、奶牛乳腺上皮细胞中纤维化表型的检测：具体分别在奶牛乳腺上皮细胞中检测TGF‑β1、α‑SMA、Collagen2、E‑cadherin、在烟酸缓解后的变化情况。本发明制定全新的奶牛乳腺纤维化倾向的缓解策略，通过收集正常和乳腺纤维化的乳腺组织，分离原代奶牛乳腺上皮细胞，利用分子生物学方法全面的评估了烟酸对奶牛乳腺纤维化倾向的缓解效果。烟酸能够有效减少乳腺上皮细胞中纤维化表型的升高，从而达到保护乳腺纤维化疾病发生的目的。

公开(公告)号：CN113855740A

公开(公告)日：2021-12-31

申请号：CN202111306686.3

申请日：2021-11-05

Applicant: 吉林大学

Inventor： 付守鹏 ,  郭文晋 ,  刘松奇 ,  柳巨雄 ,  胡桂秋 ,  曹宇

IPC: A61K36/78 ,  A61K36/855 ,  A61K9/06 ,  A61K47/06 ,  A61K47/10 ,  A61P15/14 ,  A61P31/04 ,  A61K31/045

Abstract: 本发明公开了一种用于治疗奶牛乳腺炎的外用膏剂，包括以下重量份数配比的原料药：薄荷醇20g，冰片20g，茜草100g，夏枯草100g，鱼腥草100g，大蓟根50g，芙蓉根50g。该用于治疗奶牛乳腺炎的膏剂的应用及方法，首先筛选患有临床型乳腺炎的奶牛，随后使用此膏剂对患病乳腺进行治疗，在实验的第0天和第8天进行尾静脉采血和无菌采集乳汁，通过ELISA检测血清和乳清中的IL‑1β，IL‑6和TNF‑α等炎性因子的表达情况，结果表明本膏剂能够显著抑制乳清和血清中炎性因子的表达，缓解乳腺炎奶牛的炎症反应，有力的说明了本外用膏剂能够减轻乳腺的炎症反应，对临床型奶牛乳腺炎具有一定的治疗作用。

公开(公告)号：CN113564221A

公开(公告)日：2021-10-29

申请号：CN202110851372.5

申请日：2021-07-27

Applicant: 吉林大学

Inventor： 付守鹏 ,  柳巨雄 ,  阚兴池 ,  郭文晋 ,  徐平 ,  黄雅萍 ,  曹宇

IPC: C12Q1/02 ,  A61K31/455 ,  A61P15/14

Abstract: 本发明公开了一种烟酸通过GPR109A受体制备缓解奶牛乳腺纤维化药物的应用，包括以下步骤：S1、体内和体外实验对比在正常奶牛和纤维化倾向奶牛乳腺中GPR109A受体表达差异情况的分析，明确GPR109A受体在乳腺纤维化奶牛乳腺重高表达。S2、奶牛乳腺上皮细胞中纤维化表型的检测：具体分别在奶牛乳腺上皮细胞中检测TGF‑β1、α‑SMA、Collagen2、E‑cadherin、在烟酸缓解后的变化情况。本发明制定全新的奶牛乳腺纤维化倾向的缓解策略，通过收集正常和乳腺纤维化的乳腺组织，分离原代奶牛乳腺上皮细胞，利用分子生物学方法全面的评估了烟酸对奶牛乳腺纤维化倾向的缓解效果。烟酸能够有效减少乳腺上皮细胞中纤维化表型的升高，从而达到保护乳腺纤维化疾病发生的目的。

公开(公告)号：CN111424008A

公开(公告)日：2020-07-17

申请号：CN202010244771.0

申请日：2020-03-31

Applicant: 吉林大学

Inventor： 付守鹏 ,  曹宇 ,  柳巨雄 ,  郭文晋 ,  阚兴池

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种用于烟酸促进动物乳腺发育的实验方法，包括以下步骤：S1、选取20只怀孕母鼠并进行单独培养，采用12h:12h昼夜间断照明，自由进食饮水；S2、待孕鼠分娩后并由母鼠照料4周后人为给小鼠断奶，并分别两组，NT组(10只)和烟酸组(10只)，NT组饲养条件不变，烟酸组日粮添加0.5％烟酸；S3、饲养3周后颈椎脱臼处死小鼠，摘取小鼠第4对乳腺用于Whole mount染色。该烟酸用于促进青春期乳腺发育的方法，通过体内外实验分别检测了EPH4EV细胞和小鼠乳腺增殖和周期蛋白的表达，利用分子生物学全面评估了烟酸对EPH4EV增殖和小鼠乳腺发育的效果，烟酸能显著促进细胞和小鼠乳腺中细胞增殖标志物的表达，从而促进细胞增殖和乳腺发育。