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公开(公告)号：CN116904394A
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202311002601.1
申请日：2023-08-10
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/0775 , A61K35/28 , A61P3/10 , A61P13/12
Abstract: 本发明公开了一种抗炎性间充质干细胞(MSCs)来源外泌体的制备方法及其应用，包括：一、MSCs获取；二、MSCs鉴定；三、传代培养；四、三种方法预处理MSCs：包括(1)低浓度炎症因子预处理；(2)软刚度预处理；(3)低浓度炎症因子联合软刚度预处理；五、24h后获取MSCs培养的上清液；六、将MSCs培养的上清液采用三步离心法处理获得所述外泌体；七、构建糖尿病肾病小鼠模型，尾静脉注射外泌体并进行相关指标测定。本发明选用来源广、易培养、活性强和受低浓度炎症因子刺激反应性较好的MSCs作为提取外泌体的细胞，通过低浓度炎症因子及软刚度刺激后分离外泌体，所获得的抗炎性MSCs来源外泌体富集PD‑L1，具有免疫抑制作用，可调节巨噬细胞从促炎表型向抑炎表型转化。
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公开(公告)号：CN104531609A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410752404.6
申请日：2014-12-10
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种悬浮-贴壁法制备饲养层细胞的方法，包括CF-1 MEFs原代获取、CF-1 MEFs传代培养和CF-1 MEF Feeder制备三个步骤；制备CF-1 MEF Feeder时采用悬浮-贴壁法，即CF-1 MEFs第3代细胞经消化形成单细胞悬液，然后以细胞贴壁后铺满培养瓶/皿的密度加至培养瓶/皿，并于培养箱中进行贴壁处理后加入MMC；MMC处理0.5小时~3.5小时后，迅速吸弃培养皿中含MMC的培养液及未贴壁细胞，只回收贴壁细胞作为Feeder。本发明方法既能充分抑制细胞有丝分裂，又能筛选出状态良好的细胞作为Feeder，提高Feeder的质量，同时可克服由于MEFs增殖速度过快，最佳处理时间不易掌握的缺点，使CF-1 MEF Feeder制备时间更灵活方便。
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公开(公告)号：CN117089517A
公开(公告)日：2023-11-21
申请号：CN202310888917.9
申请日：2023-07-19
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明公开了用于增强间充质干细胞免疫抑制能力和抗衰老能力的方法，该方法包括(1)在较软刚度培养间充质干细胞，本发明所设置的方法制备刚度的规模较大，可培养细胞的数量也较多，能够较好地满足大规模细胞培养的临床转化应用及研究的需求；(2)采用较低浓度LPS、TNF‑α、IFN‑γ等因子处理间充质干细胞；(3)在较软刚度联合较低浓度LPS、TNF‑α、IFN‑γ等因子培养间充质干细胞。上述3种方法，都促进间充质干细胞免疫调节因子分泌，抑制促炎因子分泌，说明可以调控间充质干细胞免疫调节相关因子的表达，从而获得免疫抑制能力更强的间充质干细胞。上述3种方法，还可有效延缓间充质干细胞衰老，维持间充质干细胞的生物学活性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110408594A
公开(公告)日：2019-11-05
申请号：CN201910701425.8
申请日：2019-07-31
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/0793 , C12N5/077
Abstract: 本发明公开的属于生物细胞技术领域，具体为一种将人成纤维细胞高效大量重编程为成熟神经元的方法，S1：培养人包皮成纤维细胞(HFFs)：①将儿童术后包皮置于F12完全培养基(95％DMEM/F12和5％PS)；②在超净工作台中将包皮剪开铺展，1％PS的PBS洗两遍，用眼科剪除去皮下脂肪组织，剪成3mmˉ3mm大小，0.2％中性蛋白酶覆盖4℃过夜；S2：将HFFs重编程为神经细胞，本方法～1KPa的I型胶原基质(Collagen type I，Col)可以促进人成纤维重编程为成熟神经细胞；可以获得接近100％Tuj1+的神经细胞，效率高；10天即可获得表达SYN的成熟神经细胞，时间短。
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公开(公告)号：CN104531609B
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201410752404.6
申请日：2014-12-10
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种悬浮‑贴壁法制备饲养层细胞的方法，包括CF‑1 MEFs原代获取、CF‑1 MEFs传代培养和CF‑1 MEF Feeder制备三个步骤；制备CF‑1 MEF Feeder时采用悬浮‑贴壁法，即CF‑1 MEFs第3代细胞经消化形成单细胞悬液，然后以细胞贴壁后铺满培养瓶/皿的密度加至培养瓶/皿，并于培养箱中进行贴壁处理后加入MMC；MMC处理0.5小时~3.5小时后，迅速吸弃培养皿中含MMC的培养液及未贴壁细胞，只回收贴壁细胞作为Feeder。本发明方法既能充分抑制细胞有丝分裂，又能筛选出状态良好的细胞作为Feeder，提高Feeder的质量，同时可克服由于MEFs增殖速度过快，最佳处理时间不易掌握的缺点，使CF‑1 MEF Feeder制备时间更灵活方便。
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公开(公告)号：CN104388382B
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201410673462.X
申请日：2014-11-21
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种利用搅拌式细胞培养转瓶机快速制备Feeder细胞的方法，包括CF‑1 MEFs原代获取、CF‑1 MEFs传代培养和CF‑1 MEF Feeder制备等三个步骤；制备CF‑1 MEF Feeder时以搅拌式细胞培养转瓶机作为细胞处理设备，转瓶机的搅拌锤可在电磁场作用下不断旋转，使细胞在悬浮状态下与培养液中的MMC充分接触，可提高MMC抑制细胞增殖的效率，缩短处理时间；转瓶机专用培养瓶的容积是普通培养瓶皿的几倍甚至上百倍，培养瓶能重复使用，可节省大量细胞培养瓶皿，降低Feeder的制备成本，提高Feeder制备效率，节约大量实验时间；另外本方法是在悬浮状态下处理细胞，回收细胞时无需消化液处理，可减少消化对细胞带来的损伤，最大限度地保持细胞的良好状态。
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公开(公告)号：CN104388382A
公开(公告)日：2015-03-04
申请号：CN201410673462.X
申请日：2014-11-21
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种利用搅拌式细胞培养转瓶机快速制备Feeder细胞的方法，包括CF-1MEFs原代获取、CF-1MEFs传代培养和CF-1MEFFeeder制备等三个步骤；制备CF-1MEFFeeder时以搅拌式细胞培养转瓶机作为细胞处理设备，转瓶机的搅拌锤可在电磁场作用下不断旋转，使细胞在悬浮状态下与培养液中的MMC充分接触，可提高MMC抑制细胞增殖的效率，缩短处理时间；转瓶机专用培养瓶的容积是普通培养瓶/皿的几倍甚至上百倍，培养瓶能重复使用，可节省大量细胞培养瓶/皿，降低Feeder的制备成本，提高Feeder制备效率，节约大量实验时间；另外本方法是在悬浮状态下处理细胞，回收细胞时无需消化液处理，可减少消化对细胞带来的损伤，最大限度地保持细胞的良好状态。
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公开(公告)号：CN114717088A
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202210279974.2
申请日：2022-03-21
Applicant: 吉林大学第一医院
IPC: C12M1/02 , C12M1/00 , C12N5/071 , B01F27/90 , B01F27/191 , B01F27/054 , B01J19/18 , B01D21/01 , B01F23/43
Abstract: 本发明涉及混合设备领域，具体涉及一种外泌体提取装置及提取方法。搅拌桶通过导管和离心机构相连通，用于将搅拌桶内搅拌完成的物料输送至离心机构内。搅多个支撑框沿转动轴周向均布，且支撑框与转动轴固接。每个支撑框内设有多个支撑杆，支撑杆和转动轴径向方向重合，支撑杆的一端与转动轴固接，多个支撑杆沿转动轴轴向方向均布设置。阻力板用于在受到阻力变大时，带动搅拌叶片向远离转动轴的一侧滑动，搅拌叶片沿支撑杆周向转动。转向机构带动改搅拌叶片相邻的两个搅拌叶片发生转动，使得搅拌叶片对物料的引导方向发生改变，进而使搅拌桶内物料的流动性增强，进而提高对物料的搅拌效率，使样本和聚合物溶液充分混合。
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