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公开(公告)号：CN101344476B
公开(公告)日：2011-03-16
申请号：CN200810051106.9
申请日：2008-08-20
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明涉及一种细菌活的非可培养状态荧光显微镜观察与计数方法，其特征在于：具体步骤是：(1)、VBNC细菌观察样本的前处理；(2)、微孔滤膜疏水性检查与处理；(3)、微孔滤膜染色；(4)、VBNC细菌样本荧光染色；(5)、VBNC细菌荧光标本的制备；(6)、VBNC细菌荧光显微镜计数。其简化了操作流程，克服了现有技术的适用范围狭窄、取材困难、观察结果不准确等缺点，解决了细菌VBNC研究领域中的技术难题，提高同业者的实践操作水平。
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公开(公告)号：CN101423808A
公开(公告)日：2009-05-06
申请号：CN200810051555.3
申请日：2008-12-09
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种VBNC沙门氏菌的复苏液及其制备方法和复苏方法，复苏液是由血清1份、灭菌纯水1～3份组成，经混合搅拌混匀，用微孔滤器过滤除菌制得；将进入VBNC的沙门氏菌置于复苏液中，在热程控循环仪孔内，采取递增升温方式，热程控循环仪复苏升温与温育时间程序选自在5℃到37℃区间，温育时间为2min～1.5h；然后接种于SS液体培养基，并在气浴振荡摇床内，200～220r/min培养；本发明克服现有技术存在的用料多，取材不便等缺点，本发明仅仅采用一种材料，利用程序性升温，对处于VBNC近1年之久的沙门氏菌实现了复苏；不但所用原料较少，操作简便，而且复苏菌浓度在12h内就能达到108个CFU/mL，各项复苏指标(时间、细菌数等)也较原有技术大幅度提高。
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公开(公告)号：CN101423808B
公开(公告)日：2010-08-18
申请号：CN200810051555.3
申请日：2008-12-09
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明目公开了一种VBNC沙门氏菌的复苏液及其制备方法和复苏方法，复苏液是由血清1份、灭菌纯水1～3份组成，经混合搅拌混匀，用微孔滤器过滤除菌制得；将进入VBNC的沙门氏菌置于复苏液中，在热程控循环仪孔内，采取递增升温方式，热程控循环仪复苏升温与温育时间程序选自在5℃到37℃区间，温育时间为2min～1.5h；然后接种于SS液体培养基，并在气浴振荡摇床内，200～220r/min培养；本发明克服现有技术存在的用料多，取材不便等缺点，本发明仅仅采用一种材料，利用程序性升温，对处于VBNC近1年之久的沙门氏菌实现了复苏；不但所用原料较少，操作简便，而且复苏菌浓度在12h内就能达到108个CFU/mL，各项复苏指标(时间、细菌数等)也较原有技术大幅度提高。
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