假单胞菌Na+/H+逆向转运蛋白基因及其克隆方法

    公开(公告)号:CN1667122A

    公开(公告)日:2005-09-14

    申请号:CN200510006572.1

    申请日:2005-02-23

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 刘广发 陈启伟

    Abstract: 假单胞菌Na+/H+逆向转运蛋白基因及其克隆方法,涉及一种基因克隆。提供一种假单胞菌的Na+/H+逆向转运蛋白结构基因及一种既快捷又经济的克隆方法,基因长1089bp,编码362个氨基酸。步骤为将极端耐盐假单胞菌接种,培养;提取总DNA;设计引物;PCR反应并将扩增产物凝胶成像系统扫描记录,切下扩增的约1.1kb的条带;在PCR产物末端加上一个腺嘌呤脱氧核糖核苷酸(A),弃上清液,加入20μL重蒸水溶解DNA;载体与DNA的连接,形成单菌落;挑选白色菌落,碱裂解法提取重组质粒;鉴定所扩增的目的基因;检测转化子的耐盐水平;转化子中的重组质粒经鉴定,对其中的克隆基因进行测序;判断克隆基因。

    一种利用螺旋藻培养废液采收盐藻的方法

    公开(公告)号:CN105176827B

    公开(公告)日:2019-03-01

    申请号:CN201510696530.9

    申请日:2015-10-23

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 一种利用螺旋藻培养废液采收盐藻的方法,涉及盐藻的采收方法。1)收集螺旋藻采收后的上清液,测定pH值;2)将步骤1)收集的上清液加至盐藻中,静置后测定采收率;3)取步骤2)的上清液与盐藻培养基混合,接种盐藻细胞,进行循环培养,测定其生长曲线。充分利用螺旋藻生长过程中培养液pH呈碱性,盐藻在高pH下会自动絮凝的特点,实现了盐藻采收。螺旋藻在生长过程中其培养基逐渐升高,而盐藻在高pH下会自动絮凝,可充分利用螺旋藻上清液,采收过后的盐藻上清液可继续用于盐藻的培养,生产成本低。采收的盐藻不引入有机试剂、有毒有害物质,不会形成采收过程中藻糊产品质量的影响,同时充分利用废弃的上清液,不会导致二次污染。

    一种利用螺旋藻培养废液采收盐藻的方法

    公开(公告)号:CN105176827A

    公开(公告)日:2015-12-23

    申请号:CN201510696530.9

    申请日:2015-10-23

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 一种利用螺旋藻培养废液采收盐藻的方法,涉及盐藻的采收方法。1)收集螺旋藻采收后的上清液,测定pH值;2)将步骤1)收集的上清液加至盐藻中,静置后测定采收率;3)取步骤2)的上清液与盐藻培养基混合,接种盐藻细胞,进行循环培养,测定其生长曲线。充分利用螺旋藻生长过程中培养液pH呈碱性,盐藻在高pH下会自动絮凝的特点,实现了盐藻采收。螺旋藻在生长过程中其培养基逐渐升高,而盐藻在高pH下会自动絮凝,可充分利用螺旋藻上清液,采收过后的盐藻上清液可继续用于盐藻的培养,生产成本低。采收的盐藻不引入有机试剂、有毒有害物质,不会形成采收过程中藻糊产品质量的影响,同时充分利用废弃的上清液,不会导致二次污染。

    一种盐藻的采收方法
    5.
    发明公开

    公开(公告)号:CN103103133A

    公开(公告)日:2013-05-15

    申请号:CN201310026310.6

    申请日:2013-01-23

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 一种盐藻的采收方法,涉及一种微藻。提供效率较高、能耗较低的盐藻采收方法。1)在盐藻培养至后期,藻细胞密度达到(1~10)×106个/mL以上时才能采收;2)在藻液中加入絮凝剂母液,搅匀,静置,后除去上清,收集获得藻泥,计算絮凝效率。采用无机絮凝剂来高效絮凝富集高盐度的培养液中的盐藻。絮凝剂用量根据藻液的温度、盐度、pH、细胞浓度确定,最低用量不少于10mg/L,最高不超过2000mg/L。简单经济、利用无机絮凝剂,即通过静电力、分子间引力和氢键等作用使盐藻细胞和絮凝剂互相吸附,团聚、絮凝沉淀,从而达到将藻细胞与培养基分离、富集藻细胞的目的。絮凝剂单独添加,成本低,絮凝体形成迅速,沉降速度快。

    假单胞菌磷酸甘油磷酸酯酶基因及其克隆方法

    公开(公告)号:CN100500851C

    公开(公告)日:2009-06-17

    申请号:CN200410091990.0

    申请日:2004-12-29

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 假单胞菌磷酸甘油磷酸酯酶基因及其克隆方法,涉及一种基因克隆,提供一种假单胞菌的磷酸甘油磷酸酯酶结构基因及其一种既快捷又经济的克隆方法。基因总长810bp,前3个字符“atg”为起始符,最后3个字符“tga”为终止符。提取假单胞菌总DNA,用限制性核酸内切酶对总DNA不完全酶切,经电泳,找酶切片段区域,切出凝胶,回收DNA片段;以E.co RI在人工构建的表达载体,将回收的DNA片段与线性载体共育,形成重组质粒,取转化溶液涂抹在高盐LB琼脂培养基上,挑取长出的单菌落耐盐转化子,接种在培养基上。出现的白色菌落即可初步判断为耐盐转化子;重组质粒,用E.co RI切出其中的插入片段,测序;进行基因和蛋白质的同源性比较。

    用杜氏藻藻粉制备燃料油气的方法

    公开(公告)号:CN101200647A

    公开(公告)日:2008-06-18

    申请号:CN200710009901.7

    申请日:2007-11-28

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 用杜氏藻藻粉制备燃料油气的方法,涉及一种燃料油气。提供一种用杜氏藻藻粉制备燃料油气的方法。将海水养殖收获后的杜氏藻干燥后制成藻粉;将藻粉与一种固体酸催化剂混合均匀后用N2作为流化气体在流化床反应器内进行催化裂解转化反应,得燃料油气。由于杜氏藻是单细胞真核绿藻,具有光合作用效率高、环境适应能力强、生长周期短、生物产量高和不占用农地等特点,因此杜氏藻可利用浓缩海水、阳光、CO2和少量无机盐生长,成本低,收获干燥后不需前处理即可热解处理。利用固体酸催化剂在较低温度下将杜氏藻催化裂解为燃料油气,可提高油气收率,根据不同目的改变油气比例和产品分布,有助于适应燃料油气多方面的需求,具有突出的效果。

    耐低温杜氏藻的诱变、选育及其鉴定方法

    公开(公告)号:CN1888047A

    公开(公告)日:2007-01-03

    申请号:CN200610036631.4

    申请日:2006-07-24

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 刘广发 周韬 陈昱

    Abstract: 耐低温杜氏藻的诱变、选育及其鉴定方法,涉及一种杜氏藻,提供一种耐低温杜氏藻突变株及采用紫外线诱变选育耐低温杜氏藻及其鉴定方法。取培养基接种杜氏藻;经光照和黑暗诱导后出现同步化生长;取藻液与碘液或溴酚蓝液混匀,灭活杜氏藻,取杜氏藻藻液注入培养皿,置紫外灯下诱变后暗培养,再与新鲜培养液混匀,涂在杜氏藻培养基上低温光照培养;取单藻落接种到培养液中,在低温光照下培养;取样检测比较杜氏藻耐低温突变株和野生型原出发株在低温光照下的生长曲线;提取总DNA进行RAPD比较;计算遗传相似系数;提取总蛋白质进行电泳后染色,记录结果;比较蛋白电泳图谱找出异同点;根据蛋白质分析结果确认获得耐低温杜氏藻突变株。

    克隆原核生物耐盐相关基因方法

    公开(公告)号:CN1266278C

    公开(公告)日:2006-07-26

    申请号:CN200410084812.5

    申请日:2004-10-01

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 克隆原核生物耐盐相关基因方法,涉及基因工程。提供一种克隆原核生物耐盐相关基因的方法。将极端耐盐假单胞菌或其它耐盐原核生物,提取极端耐盐假单胞菌或其它耐盐原核生物的总DNA;对总DNA不完全酶切,酶切后的总DNA经凝胶电泳,找酶切片段区域,切出凝胶,回收DNA片段;完全酶切成线性,将回收的DNA片段与线性载体共育,加入连接酶形成重组质粒,转化用CaCl2处理获得的感受态受体菌;将转化子溶液涂抹在高盐和LB琼脂培养基上,挑选转化子;提取重组质粒,插入片段,测序,同源性比较,判定该基因的性质;绘出转化子与对照的生长曲线,比较两者生长状态的差异,借此再次验证该基因为耐盐相关基因。

    耐高温巴氏杜氏藻诱变选育方法

    公开(公告)号:CN1757707A

    公开(公告)日:2006-04-12

    申请号:CN200510091890.2

    申请日:2005-08-15

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 刘广发 黄瑞芳

    Abstract: 耐高温巴氏杜氏藻诱变选育方法,涉及一种单细胞绿藻,提供一种采用紫外线诱变选育耐高温巴氏杜氏藻及其鉴定方法。培养基分装灭菌并冷却,取藻液接种培养,藻液以等量碘液或溴酚蓝液混匀,灭活,取样计算藻液中巴氏杜氏藻密度;取处于对数生长期的巴氏杜氏藻进行诱变后暗培养;暗培养后的藻液和新鲜培养基混匀培养;取诱变藻液和原出发藻液高温筛选后存活的藻细胞扩大培养,藻液光照培养;取黄色单藻落接种扩大培养,检测其诱变效果;测量细胞长短径;提取杜氏藻总DNA,进行随机扩增多态DNA,计算遗传相似系数:提取H-42和原出发株的总蛋白质进行电泳后用考马斯亮蓝R250染色,记录结果;观察电泳图谱获得结果。

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