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公开(公告)号：CN110220994A
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201910599052.8
申请日：2019-07-04
Applicant: 南通大学附属医院
Abstract: 本发明公开了一种同位素稀释质谱法测定血清miR-224含量的方法，包括如下步骤：(1)合成miR-224核酸单链并配成溶液，建立标准曲线；(2)合成核酸肽探针并配成溶液，用以捕获miR-224；(3)合成同位素标记的多肽并配成溶液作为内标；(4)在血清样本中提取miRNA；(5)将提取出的miRNA生物素化；(6)将上述miRNA与链霉素琼脂糖球反应，形成miRNA-生物素-链霉亲和素琼脂糖球复合物；(7)加入核酸肽探针捕获miR-224-生物素-链霉亲和素琼脂糖球复合物；(8)将上述复合物清洗干净后加入胰蛋白酶酶解，然后将酶解产物固相萃取，将萃取出的多肽吹干并复溶；(9)将复溶后的多肽和同位素标记的多肽样品进行质谱分析；(10)计算血清样本中miR-224含量。本发明准确度高，结果可靠。
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公开(公告)号：CN113684254A
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN202111187105.9
申请日：2021-10-12
Applicant: 南通大学附属医院
IPC: C12Q1/6816 , G01N30/88 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种同位素稀释质谱法定量检测游离DNA含量的方法。首先公开了一种肽核酸探针，所述肽核酸探针中的核酸部分序列如SEQ ID NO：1所示，所述肽核酸探针中的肽部分序列如SEQ ID NO：2所示。还公开了一种同位素稀释质谱法定量检测游离DNA单链含量的方法包括：形成游离DNA‑生物素‑链霉亲和素磁珠复合物；加入肽核酸探针捕获所述游离DNA‑生物素‑链霉亲和素磁珠复合物；酶解；复溶；根据峰面积比间接计算样本中DNA含量；修正DNA浓度得到最终浓度值等步骤。本发明同位素稀释质谱法定量检测游离DNA单链含量的方法具有准确度高，结果可靠等优点。
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公开(公告)号：CN110220994B
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN201910599052.8
申请日：2019-07-04
Applicant: 南通大学附属医院
Abstract: 本发明公开了一种同位素稀释质谱法测定血清miR‑224含量的方法，包括如下步骤：(1)合成miR‑224核酸单链并配成溶液，建立标准曲线；(2)合成核酸肽探针并配成溶液，用以捕获miR‑224；(3)合成同位素标记的多肽并配成溶液作为内标；(4)在血清样本中提取miRNA；(5)将提取出的miRNA生物素化；(6)将上述miRNA与链霉素琼脂糖球反应，形成miRNA‑生物素‑链霉亲和素琼脂糖球复合物；(7)加入核酸肽探针捕获miR‑224‑生物素‑链霉亲和素琼脂糖球复合物；(8)将上述复合物清洗干净后加入胰蛋白酶酶解，然后将酶解产物固相萃取，将萃取出的多肽吹干并复溶；(9)将复溶后的多肽和同位素标记的多肽样品进行质谱分析；(10)计算血清样本中miR‑224含量。本发明准确度高，结果可靠。
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公开(公告)号：CN112342271A
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN202011122900.5
申请日：2020-10-20
Applicant: 南通大学附属医院
IPC: C12Q1/6816 , G01N30/88 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种同位素稀释质谱法定量检测游离DNA含量的方法。首先公开了一种肽核酸探针，所述肽核酸探针中的核酸部分序列如SEQ ID NO：1所示，所述肽核酸探针中的肽部分序列如SEQ ID NO：2所示。还公开了一种同位素稀释质谱法定量检测游离DNA单链含量的方法包括：形成游离DNA‑生物素‑链霉亲和素磁珠复合物；加入肽核酸探针捕获所述游离DNA‑生物素‑链霉亲和素磁珠复合物；酶解；复溶；根据峰面积比间接计算样本中DNA含量；修正DNA浓度得到最终浓度值等步骤。本发明同位素稀释质谱法定量检测游离DNA单链含量的方法具有准确度高，结果可靠等优点。
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