公开(公告)号：CN117143845A

公开(公告)日：2023-12-01

申请号：CN202311063801.8

申请日：2023-08-23

Applicant: 南开大学

Inventor： 孔德明 ,  李庆楠 ,  戴智琦 ,  王星文 ,  王东霞

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12Q1/6816

Abstract: 本发明涉及一种低背景CRISPR/Cas12a生物传感器及应用，利用"RESET"效应，通过精心设计CRISPR/Cas12a系统的激活链AS，引入"13+3RESET"效应，激活链的长度由原来的20个碱基完全与crRNA互补配对缩短为两部分配对，即13和3个碱基分别与crRNA配对；制备得到的激活链长度虽然缩短了但是其激活Cas酶活性的能力和20个碱基长的激活链能力基本一致，但是加了与AS部分互补配对的BS封闭链后其背景信号大大降低，有效解决了高背景的问题。背景信号显著降低，检测灵敏度提高，能够用于不同目标物的灵敏和特异性检测，包括核酸、酶和生物小分子。得益于低背景，这些生物传感器被证明可以很好地用于活细胞中不同生物分子的精确成像分析。并且可以和试纸条相结合，以实现对靶标分子的即时检测。