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公开(公告)号：CN110396535A
公开(公告)日：2019-11-01
申请号：CN201910380148.5
申请日：2019-05-08
Applicant: 南开大学
IPC: C12Q1/6834 , C12Q1/6876 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种应用于探测CGI序列甲基化调控CXXC结构域位点特异性结合的方法。通过构建CGI发夹结构，并将CGI发夹结构连接到反应池的底面和微球表面，在单分子操纵技术的操控下，微球受到拉力，进而在没有CXXC结构域存在的条件下CGI发夹结构被拉伸，CGI发夹结构被迅速打开；当在有CXXC结构域存在的情况下，CGI发夹结构的打开过程被结合在其上的CXXC结构域阻碍，产生停顿信号；对未修饰的CGI序列和甲基化修饰的CGI序列中停顿信号事件的发生次数进行计数，判断CXXC结构域对处于不同表观遗传修饰状态的CGI序列特异性位点结合的变化，从而揭示CGI的表观遗传修饰对基因转录活性的影响机制，为理解细胞的生命活动和细胞的癌变机制提供一种单分子水平的实验检测方法。
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公开(公告)号：CN109750055B
公开(公告)日：2022-12-23
申请号：CN201910188876.6
申请日：2019-03-13
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明提供一种基于α螺旋把手提高蛋白核酸生物耦合效率的方法；首先设计携带非天然氨基酸的把手H‑tag，其次构建含有H‑tag和待测蛋白的融合重组表达质粒，再次表达纯化在H‑tag中含有非天然氨基酸的融合重组蛋白，最后对融合蛋白H‑tag中非天然氨基酸和核酸底物上的耦合基团进行高效点击化学连接。本方法使用α螺旋把手为非天然氨基酸提供可控的蛋白表面反应条件，避免待测蛋白表面复杂的结构、电荷和极性纳米环境，从而实现对蛋白与核酸进行高效点击化学连接等目标。
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公开(公告)号：CN110396535B
公开(公告)日：2022-12-23
申请号：CN201910380148.5
申请日：2019-05-08
Applicant: 南开大学
IPC: C12Q1/6834 , C12Q1/6876 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种应用于探测CGI序列甲基化调控CXXC结构域位点特异性结合的方法。通过构建CGI发夹结构，并将CGI发夹结构连接到反应池的底面和微球表面，在单分子操纵技术的操控下，微球受到拉力，进而在没有CXXC结构域存在的条件下CGI发夹结构被拉伸，CGI发夹结构被迅速打开；当在有CXXC结构域存在的情况下，CGI发夹结构的打开过程被结合在其上的CXXC结构域阻碍，产生停顿信号；对未修饰的CGI序列和甲基化修饰的CGI序列中停顿信号事件的发生次数进行计数，判断CXXC结构域对处于不同表观遗传修饰状态的CGI序列特异性位点结合的变化，从而揭示CGI的表观遗传修饰对基因转录活性的影响机制，为理解细胞的生命活动和细胞的癌变机制提供一种单分子水平的实验检测方法。
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公开(公告)号：CN109750055A
公开(公告)日：2019-05-14
申请号：CN201910188876.6
申请日：2019-03-13
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明提供一种基于α螺旋把手提高蛋白核酸生物耦合效率的方法；首先设计携带非天然氨基酸的把手H-tag，其次构建含有H-tag和待测蛋白的融合重组表达质粒，再次表达纯化在H-tag中含有非天然氨基酸的融合重组蛋白，最后对融合蛋白H-tag中非天然氨基酸和核酸底物上的耦合基团进行高效点击化学连接。本方法使用α螺旋把手为非天然氨基酸提供可控的蛋白表面反应条件，避免待测蛋白表面复杂的结构、电荷和极性纳米环境，从而实现对蛋白与核酸进行高效点击化学连接等目标。
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