一种用于病原微生物检测的测序文库构建方法和试剂盒

    公开(公告)号:CN111188094A

    公开(公告)日:2020-05-22

    申请号:CN202010111731.9

    申请日:2020-02-24

    Abstract: 本发明公开一种用于病原微生物检测的测序文库构建方法和试剂盒,所述方法包括(1)将提取的样本放入样本保存液,进行DNA/RNA共提取,并对宿主rRNA进行去除;(2)加入逆转录酶使其中的RNA逆转录形成RNA/cDNA复合双链;(3)逆转录产物cDNA/RNA复合双链和DNA双链的混合物中直接加入突变型Tn5转座酶及打断缓冲液进行片段化,片段化结束后用终止反应液5×TS-plus进行终止反应;(3)加入扩增缓冲液、链置换和扩增酶混合物,进行PCR扩增;(4)磁珠纯化即得到原始DNA/RNA的可测序文库。所述方法大大减少了建库步骤,缩短建库时间,降低对样本起始量的要求,提高文库产出和下机数据质量。

    一种DNA和RNA同时构建测序文库的方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN111139532A

    公开(公告)日:2020-05-12

    申请号:CN202010111715.X

    申请日:2020-02-24

    Abstract: 本发明公开了一种一种DNA和RNA同时构建测序文库的方法及试剂盒,所述方法包括以下步骤:(1)将反应底物中的RNA逆转录形成RNA/cDNA复合双链;(2)在逆转录产物cDNA/RNA复合双链和DNA双链的混合物中直接加入Tn5转座酶及打断缓冲液进行片段化,打断的同时在双链的5’端加上部分接头序列;(3)链置换和文库扩增:所得产物中加入扩增缓冲液、链置换和扩增酶混合物,进行PCR扩增;(4)磁珠纯化即可得到原始DNA/RNA的可测序文库。本发明所述方法大大减少了建库步骤,缩短了建库时间,提高文库产出和下机数据质量,帮助得到更多真实信息。

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