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公开(公告)号：CN106754904B
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201611196752.5
申请日：2016-12-21
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
Abstract: 一种cDNA的特异性分子标签及其应用，该特异性分子标签包括：如SEQ ID NO.1所示的通用引物序列；如SEQ ID NO.2所示的转座酶接头序列P7；随机序列：(N)n，N为随机序列，共n个；和共有30个T碱的poly(T)序列，具体核苷酸序列如SEQ ID NO.3所。将特异性分子标签应用于cDNA建库中，在RNA逆转录成全长cDNA过程中，该特异性分子标签加在每一个cDNA的5`端，使每一个基因都是独一无二的，后续的信息分析可以根据该特异分子标签的序列量化样品中每一个基因。
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公开(公告)号：CN104293930B
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201410502154.0
申请日：2014-09-28
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种非放射性的3’-5’外切酶活性测定方法，所述方法包括：首先根据单链模板合成有3’错配的引物，将引物与单链模板混合并退火，接着在该反应液中加入3’-5’外切酶活性进行3’碱基外切反应，然后加入足量没有3’-5’外切酶活性的聚合酶延长引物直至获得双链DNA，随后检测反应体系中双链DNA的相对量，由该检测结果推导出外切酶活性程度。该方法与现有技术方法相比，无放射性污染，操作步骤简单快速，可以实现高通量的自动化活性测定，可以用来筛选针对3’-5’外切酶的封闭活性。
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公开(公告)号：CN104293927A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410502151.7
申请日：2014-09-28
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
CPC classification number: C12Q1/34
Abstract: 本发明公开了一种尿嘧啶-DNA糖基化酶活性测定方法，所述方法包括如下步骤：首先是PCR扩增反应：以双链DNA为模板，在dU/A/G/CTP混合物和引物存在下，利用聚合酶进行聚合反应，进行扩增，生成含有dU的扩增产物UDNA双链；其次是尿嘧啶-DNA糖基化酶反应：扩增产物经受尿嘧啶-DNA糖基化酶作用，形成大量碱基缺失的DNA链；最后测定反应体系中单链DNA产物或UDNA双链的相对量，并根据测定结果推导出尿嘧啶-DNA糖基化酶活性程度，其中尿嘧啶-DNA糖基化酶活性程度与反应体系中UDNA双链的量成反比，而与单链DNA产物的量成正比。本发明方法无放射性污染，操作简单便捷，灵敏度高，可以定量检测，并且稳定。
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公开(公告)号：CN104263831A
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201410502155.5
申请日：2014-09-28
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
Inventor： 徐晓昱
Abstract: 本发明公开了一种简便快速的碱性磷酸酶活性测定方法，所述方法包括：获得一条链的5'端磷酸化的双链线性DNA，然后以该双链线性DNA为底物在碱性磷酸酶存在下在反应体系中反应，将反应获得的具有5'端去磷酸化的双链线性DNA的反应物在足量λ核酸外切酶存在下在反应体系中反应，反应完成后测定反应体系中单链DNA或双链DNA的相对量，并由该检测结果推导出碱性磷酸酶的活性程度。该方法与现有技术的方法相比，操作简单快速，可实现高通量、自动化的活性测定，并且灵敏度高，可检测到10mU的碱性磷酸酶。
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公开(公告)号：CN106754812A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611196755.9
申请日：2016-12-21
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
Abstract: 一种可提高加A效率的突变型Taq酶及其制备方法和应用，具体是将野生型Taq酶进行定向突变，使第315位的谷氨酸突变为赖氨酸，第388位的谷氨酸突变为缬氨酸，第507位的谷氨酸突变为赖氨酸，第578位的天冬氨酸突变为甘氨酸，第608位的丙氨酸突变为缬氨酸，第747位的甲硫氨酸突变为精氨酸，得到氨基酸序列如SEQ NO.1所示的突变型Taq酶。该突变型Taq酶的加A效率得到提升，增加了建库效率，可应用于更低起始量模板、增加建库完整性和覆盖度。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104278090B
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201410502851.6
申请日：2014-09-28
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种DNA连接酶活性测定方法，所述方法包括以下步骤：首先根据单链DNA模板合成毗连的两段引物，其中按引物的5’至3’方向来说，5’方向的引物的3’端与3’方向的引物的5’相邻，并且5’方向的引物为正常引物，而3’方向的引物为3’末端被磷酸化的引物；然后将这两段引物与单链DNA模板退火，以形成的单链DNA模板/正常引物‑3’末端磷酸化引物复合物为底物，在DNA连接酶存在下进行连接反应；随后以连接反应的产物为底物，在具有链置换活性的聚合酶作用下进行聚合反应，然后检测双链DNA或单链DNA的相对量，并以该相对量为基础推导出DNA连接酶的活性程度。本发明方法无放射性污染；操作简单快速；并且可以对DNA连接酶活性进行定量的检测分析。
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公开(公告)号：CN104297221A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410502144.7
申请日：2014-09-28
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
Inventor： 徐晓昱
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种λ核酸外切酶活性测定方法，所述方法包括以下步骤：获得一条链的5'端磷酸化的双链DNA，然后以该双链DNA为底物在λ核酸外切酶存在下在反应体系中反应，反应完成后测定反应体系中单链DNA或双链DNA的相对量，并由该检测结果推导出λ核酸外切酶的活性程度。本发明方法与现有技术的方法相比，无放射性污染，操作简单快捷，灵敏度高。
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公开(公告)号：CN104293930A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410502154.0
申请日：2014-09-28
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种非放射性的3’-5’外切酶活性测定方法，所述方法包括：首先根据单链模板合成有3’错配的引物，将引物与单链模板混合并退火，接着在该反应液中加入3’-5’外切酶活性进行3’碱基外切反应，然后加入足量没有3’-5’外切酶活性的聚合酶延长引物直至获得双链DNA，随后检测反应体系中双链DNA的相对量，由该检测结果推导出外切酶活性程度。该方法与现有技术方法相比，无放射性污染，操作步骤简单快速，可以实现高通量的自动化活性测定，可以用来筛选针对3’-5’外切酶的封闭活性。
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公开(公告)号：CN104293928A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410502152.1
申请日：2014-09-28
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
CPC classification number: C12Q1/44
Abstract: 本发明公开了一种定量核酸外切酶I活性测定方法，所述方法包括以下步骤：首先提供与单链DNA模板互补的引物，随后加入核酸外切酶I进行外切反应；外切反应后，加入单链DNA模板并退火，形成单链DNA模板/引物复合物；其后加入聚合酶，合成双链DNA；接着测定反应体系中单链或双链DNA的相对量，并由测定结果推导出核酸外切酶I活性程度，其中核酸外切酶I活性程度与反应体系中双链DNA的量成反比。与现有技术相比，本发明的方法无放射性污染，操作简单便捷，可以对核酸外切酶Ⅰ活性进行定量的检测分析。
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公开(公告)号：CN106754812B
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201611196755.9
申请日：2016-12-21
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
IPC: C12N9/12 , C12N15/54 , C12N15/63 , C12Q1/6869
Abstract: 一种可提高加A效率的突变型Taq酶及其制备方法和应用，具体是将野生型Taq酶进行定向突变，使第315位的谷氨酸突变为赖氨酸，第388位的谷氨酸突变为缬氨酸，第507位的谷氨酸突变为赖氨酸，第578位的天冬氨酸突变为甘氨酸，第608位的丙氨酸突变为缬氨酸，第747位的甲硫氨酸突变为精氨酸，得到氨基酸序列如SEQ NO.1所示的突变型Taq酶。该突变型Taq酶的加A效率得到提升，增加了建库效率，可应用于更低起始量模板、增加建库完整性和覆盖度。
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