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公开(公告)号：CN104293927A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410502151.7
申请日：2014-09-28
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
CPC classification number: C12Q1/34
Abstract: 本发明公开了一种尿嘧啶-DNA糖基化酶活性测定方法，所述方法包括如下步骤：首先是PCR扩增反应：以双链DNA为模板，在dU/A/G/CTP混合物和引物存在下，利用聚合酶进行聚合反应，进行扩增，生成含有dU的扩增产物UDNA双链；其次是尿嘧啶-DNA糖基化酶反应：扩增产物经受尿嘧啶-DNA糖基化酶作用，形成大量碱基缺失的DNA链；最后测定反应体系中单链DNA产物或UDNA双链的相对量，并根据测定结果推导出尿嘧啶-DNA糖基化酶活性程度，其中尿嘧啶-DNA糖基化酶活性程度与反应体系中UDNA双链的量成反比，而与单链DNA产物的量成正比。本发明方法无放射性污染，操作简单便捷，灵敏度高，可以定量检测，并且稳定。
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公开(公告)号：CN110684752A
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201910949628.9
申请日：2019-10-08
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开一种耐受性提高的突变型Taq DNA聚合酶及其制备方法和应用，本发明所述的一种突变型Taq DNA聚合酶，其是对如SEQ ID NO.1所示的Taq DNA聚合酶的氨基酸序列中插入、取代、或缺失1个或多个氨基酸，且与SEQ ID NO.1所示的Taq DNA聚合酶相比，其杂质耐受性显著增强的氨基酸序列。本发明的重组型Taq DNA聚合酶突变体对血液、荧光染料及高离子强度的耐受性明显增强，能够直接进行血液样品的PCR反应检测，节约时间，避免假阴性。
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公开(公告)号：CN104313132A
公开(公告)日：2015-01-28
申请号：CN201410502171.4
申请日：2014-09-28
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
CPC classification number: C12Q1/485
Abstract: 本发明公开了一种T4 DNA聚合酶活性测定方法，所述方法包括：在无dNTP存在的情况下，在以双链线性DNA模板为底物的反应体系中加入T4 DNA聚合酶，反应完成后检测双链DNA的相对量，由此测出T4 DNA聚合酶的外切酶活性，并使T4 DNA聚合酶的外切酶活性与聚合酶活性相关，得到T4 DNA聚合酶的聚合酶活性程度。本发明通过便利地测量外切酶活性，利用T4 DNA聚合酶的外切酶活性与聚合酶活性的相关性测量聚合酶活性。与现有技术的方法相比，无放射性污染，操作简单快速，并且克服了外切酶活性对聚合酶活性测定的干扰，得到的结果因此更准确。
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公开(公告)号：CN104293929A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410502153.6
申请日：2014-09-28
Applicant: 南京诺唯赞生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种定量T4多聚核苷酸激酶活性测定方法，所述方法包括如下步骤：在用于磷酸化的反应体系中，以寡核苷酸为底物，加入ATP，利用T4多聚核苷酸激酶使该寡核苷酸的5’端磷酸化，生成磷酸化寡核苷酸；随后向该反应体系中加入荧光素酶报告基因系统，该荧光素酶报告基因系统中的荧光素酶利用该反应体系中的剩余ATP使荧光素氧化生成氧合荧光素，同时产生化学发光；检测发光数值，由检测结果推导出T4多聚核苷酸激酶活性程度，其中该T4多聚核苷酸激酶活性程度与发光量负相关。与现有技术相比，本发明方法无放射性污染，操作简单方便，并且可以对T4多核苷酸激酶活性进行定量的检测分析。
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