大肠杆菌DH5α的甲酰化基因盒敲除突变株及其构建方法

    公开(公告)号:CN109694839A

    公开(公告)日:2019-04-30

    申请号:CN201711001699.3

    申请日:2017-10-24

    Inventor: 周敏 王坤 卢颖洪

    Abstract: 本发明公开了一株大肠杆菌DH5α的甲酰化基因盒敲除突变株及其构建方法。所述构建方法利用λRed同源重组技术将大肠杆菌E.coli DH5α染色体上编码甲硫氨酸-tRNA转甲酰化酶的基因fmt和编码肽去甲酰基酶的基因def同时进行基因敲除,经PCR产物电泳和测序鉴定证实,确定所获得的菌株为基因敲除突变株。本发明构建方法简单,且未改变基因组上其他蛋白的表达框,通过氯霉素抗性基因的敲入替换,便于菌株的保藏且有利于后续应用。构建的大肠杆菌DH5α的甲酰化基因盒敲除突变株从基因层面完全消除了PDF的影响,可以作为研究甲酰化-去甲酰化这一生理过程的原始材料,为蛋白质组学和代谢组学等提供了样品。

    一种可溶性水通道蛋白AqpZ融合载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN108265071A

    公开(公告)日:2018-07-10

    申请号:CN201611252469.X

    申请日:2016-12-30

    Abstract: 本发明公开了一种可溶性水通道蛋白AqpZ融合载体及其构建方法。本发明利用除去信号肽的麦芽糖结合蛋白ΔMBP作为N端亲水性标签,利用截短的人类载脂蛋白ApoAI*作为C端两亲性标签,利用C端His作为纯化和检测标签,构建pET28a-ΔMBP-AqpZ-ApoAI*-His重组载体。本发明实现了原为脂溶性的水通道蛋白的水溶化,在不需要借助去污剂的条件下,将其溶解在水相中,同时显著提高了水通道蛋白的表达量,适用于工业化生产。

    基于机器视觉的织物纬斜快速探测方法

    公开(公告)号:CN103866551B

    公开(公告)日:2016-04-20

    申请号:CN201410124279.4

    申请日:2014-03-28

    Abstract: 本发明公开了一种基于机器视觉的织物纬斜快速探测方法。步骤如下:采用CCD摄像机采集织物的纹理图像,使用大津法自动寻找最佳分割阈值T,根据最佳分割阈值T对织物纹理图像进行图像目标与背景的分割,得到二值化的织物纹理图像;通过窗口像素搜索方法跟踪二值化的织物纹理图像中条纹走向,并去除孤立点噪声,确定所跟踪条纹的起点和终点,最终得出条纹纬斜角度;采用条纹空间域约束的方法跟踪多路条纹,得到一组条纹纬斜角度值,对该组条纹纬斜角度值进行选择性平均得到最终的织物纹理图像纬斜角度值。本发明有效地避免了环境光对纬斜角度探测的影响,检测织物纬斜角度精度高,能够高速、实时地检测织物纬斜角度。

    一种细胞内环境下蛋白质相互作用组学的分析方法

    公开(公告)号:CN106979973A

    公开(公告)日:2017-07-25

    申请号:CN201610035717.9

    申请日:2016-01-19

    CPC classification number: G01N27/64

    Abstract: 本发明公开了一种细胞内环境下蛋白质相互作用组学的分析方法,将静电纺丝技术与生物质谱技术相结合,首先利用静电纺丝技术为MALDI质谱分析制备大量所需样品,然后使用蛋白质组学数据库对所得数据进行检索分析,明确各样品颗粒内蛋白质的组成成分,最后利用蛋白质组学数据统计分析软件对各样品颗粒内蛋白质的组成成分进行统计,明确细胞内不同种蛋白质相互作用的几率,最终为构建细胞内各生物分子间的三维相互作用图提供云数据支持。本发明方法操作简便,可实现高通量检测分析,不需要使研究物种被基因修饰,克服了一般质谱方法灵敏度低和需要基质分子促使分析对象发生离子化的缺陷。

    一种基于环境辐射改变的现场目标发射率测量系统及方法

    公开(公告)号:CN104266762A

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201410484662.0

    申请日:2014-09-19

    Abstract: 本发明公开了一种基于环境辐射改变的现场目标发射率测量系统及方法。该系统包括沿光路方向依次共光轴设置的目标、分光镜和红外探测器;该系统还包括黑体和聚光镜,所述黑体的辐射光经聚光镜汇聚于分光镜上,并由分光镜反射到达目标,黑体的辐射光通过与目标作用然后反射至分光镜并到达探测器。首先对红外探测器进行辐射定标;采用黑体辐射为基准建立系统响应函数;测量在环境辐射强度为Vs1的条件下,红外探测器的输出响应值V1;改变环境辐射强度为Vs2的条件下,测量红外探测器的输出响应值V2;根据测得的两种不同的辐射强度条件下红外探测器的输出响应值,算出目标的反射率并求得目标的发射率。本发明为红外辐射非接触精确测温提供了必要参量。

    基于机器视觉的织物纬斜快速探测方法

    公开(公告)号:CN103866551A

    公开(公告)日:2014-06-18

    申请号:CN201410124279.4

    申请日:2014-03-28

    Abstract: 本发明公开了一种基于机器视觉的织物纬斜快速探测方法。步骤如下:采用CCD摄像机采集织物的纹理图像,使用大津法自动寻找最佳分割阈值T,根据最佳分割阈值T对织物纹理图像进行图像目标与背景的分割,得到二值化的织物纹理图像;通过窗口像素搜索方法跟踪二值化的织物纹理图像中条纹走向,并去除孤立点噪声,确定所跟踪条纹的起点和终点,最终得出条纹纬斜角度;采用条纹空间域约束的方法跟踪多路条纹,得到一组条纹纬斜角度值,对该组条纹纬斜角度值进行选择性平均得到最终的织物纹理图像纬斜角度值。本发明有效地避免了环境光对纬斜角度探测的影响,检测织物纬斜角度精度高,能够高速、实时地检测织物纬斜角度。

    核酸酶蛋白Cas9的表达载体、构建方法及其表达纯化

    公开(公告)号:CN110499305A

    公开(公告)日:2019-11-26

    申请号:CN201810481535.3

    申请日:2018-05-18

    Abstract: 本发明公开了一种核酸酶蛋白Cas9的表达载体、构建方法及其表达纯化。所述的核酸酶蛋白Cas9的表达载体以扩增的硫氧还原蛋白-组氨酸标签-烟草蚀纹病毒蛋白酶识别位点的cDNA替代pET32a中原有的硫氧还原蛋白序列,将密码子优化成易于在宿主中表达的、C端融合NLS核定位信号肽和3×FLAG标签序列的Cas9的基因序列整合到硫氧还原蛋白序列中。本发明利用密码子优化和硫氧还原蛋白融合表达获得大量的核酸酶Cas9蛋白,在仅使用LB培养基的情况下,每克大肠杆菌Tuner(DE3)湿菌最后能获得10mg高纯度的活性Cas9蛋白,实现了低成本下,高保真核酸酶蛋白Cas9的高表达。本发明对宿主要求不高,获得的蛋白可以用于大批量的生物体外组装、体内基因编辑实验。

    一种细胞内环境下蛋白质相互作用组学的分析方法

    公开(公告)号:CN106979973B

    公开(公告)日:2019-05-07

    申请号:CN201610035717.9

    申请日:2016-01-19

    Abstract: 本发明公开了一种细胞内环境下蛋白质相互作用组学的分析方法,将静电纺丝技术与生物质谱技术相结合,首先利用静电纺丝技术为MALDI质谱分析制备大量所需样品,然后使用蛋白质组学数据库对所得数据进行检索分析,明确各样品颗粒内蛋白质的组成成分,最后利用蛋白质组学数据统计分析软件对各样品颗粒内蛋白质的组成成分进行统计,明确细胞内不同种蛋白质相互作用的几率,最终为构建细胞内各生物分子间的三维相互作用图提供云数据支持。本发明方法操作简便,可实现高通量检测分析,不需要使研究物种被基因修饰,克服了一般质谱方法灵敏度低和需要基质分子促使分析对象发生离子化的缺陷。

    一种纬斜信号处理电路
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN104019769A

    公开(公告)日:2014-09-03

    申请号:CN201410148966.X

    申请日:2014-04-14

    Abstract: 本发明提出一种纬斜信号处理电路。包括电流电压转换器及低通滤波器电路、交流放大及高通滤波电路、整形电路和限幅电路;电流电压转换器及低通滤波器电路、交流放大及高通滤波电路、整形电路和限幅电路依次连接。本发明能够实时、精确、快速地测量织物的纬斜信息。

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