一种马尾松嫩茎原生质体分离纯化及瞬时高效转化方法

    公开(公告)号:CN109055296A

    公开(公告)日:2018-12-21

    申请号:CN201810782286.1

    申请日:2018-07-16

    Abstract: 本发明公开了一种马尾松嫩茎原生质体分离纯化及瞬时高效转化方法,首先使用组合酶将马尾松嫩茎酶解成原生质体,得到的原生质体经分离、纯化和预处理后,利用PEG法将携带GFP标签的空载体转入马尾松原生质体中,经过培养,使得空载体在原生质体中表达。本发明构建得到马尾松原生质体瞬时表达系统,易于操作和实现,该方法的转化效率可达50%。本发明适用于马尾松实生苗,利用嫩茎可得到较高质量的原生质体,原生质体活力可达80%以上,对于野外的成熟茎段组织也适用,为马尾松功能基因研究提供了快速便捷的研究平台。

    一种调控马尾松开花的关键基因PmARF6及其应用

    公开(公告)号:CN111118029B

    公开(公告)日:2021-12-14

    申请号:CN202010063470.8

    申请日:2020-01-19

    Abstract: 本发明公开了一种调控马尾松开花的关键基因PmARF6及其应用,属于植物基因工程技术领域。所述的调控马尾松开花的关键基因PmARF6,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,其表达的蛋白产物氨基酸序列如SEQ ID No.2所示,为马尾松ARF转录因子。本发明通过转化拟南芥,得到超表达PmARF6基因的拟南芥,其植株的开花显著延迟,说明了PmARF6基因维持营养生长、抑制生殖转变(开花),为马尾松开花的负调控因子,可应用于调控植物营养生长与生殖生长时间:过表达该基因,营养生长时间延长或生殖生长时间推迟;敲除该基因,营养生长时间缩短或生殖生长时间提前。该基因在林木育种领域有重要应用价值。

    一种樟树分枝调控因子WRKY2/DIB1基因的应用

    公开(公告)号:CN112063629A

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN202010840313.3

    申请日:2020-08-19

    Abstract: 本发明公开了一种樟树分枝调控因子WRKY2/DIB1基因的应用,属于植物基因工程技术领域。本发明以樟树叶RNA为材料,采用RACE基因全长克隆的方法,获得樟树分枝调控因子DIB1基因的全长序列,如SEQ ID NO.1所示。DIB1基因编码WRKY转录因子WRKY2。采用Gateway克隆技术构建植物过量表达载体pBI12l‑DIB1,利用农杆菌介导法将pBI121‑DIB1转入受体材料杨树中,过量表达DIB1的转基因杨树植株茎尖表现出分枝现象。因此本发明提供的调控因子,可以参与植物顶端发育调控,可以在植物基因工程中,改良植物的株型,改良品种选育进程。

    银杏类黄酮3`,5`-羟化酶GbF3`5`H1基因及其蛋白和应用

    公开(公告)号:CN111286508A

    公开(公告)日:2020-06-16

    申请号:CN201910806305.4

    申请日:2019-08-29

    Abstract: 本发明公开了银杏类黄酮3′,5′-羟化酶GbF3′5′H1基因及其蛋白和应用,属于基因工程技术领域。该类黄酮3′,5′-羟化酶GbF3′5′H1基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示,该类黄酮3′,5′-羟化酶GbF3′5′H1的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。该类黄酮3′,5′-羟化酶GbF3′5′H1的基因序列来源于银杏。本发明从银杏中克隆出该类黄酮3′,5′-羟化酶GbF3′5′H1基因,并对其功能进行了系统鉴定,发现了该基因可以提高植物类黄酮相关代谢物的含量,并且可以在转基因杨树中参与和促进类黄酮相关代谢物的合成。

    一种银杏GbFLSa基因及其表达蛋白和应用

    公开(公告)号:CN111254150A

    公开(公告)日:2020-06-09

    申请号:CN202010092212.2

    申请日:2020-02-13

    Abstract: 本发明公开了一种银杏GbFLSa基因及其表达蛋白和应用,属于植物基因工程技术领域。银杏GbFLSa基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示,通过将银杏的GbFLSa基因转基因到山新杨中,发现转基因杨树中儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素、没食子儿茶素等原花青素含量显著降低,此外,DFR、ANS、LAR酶基因的表达水平也显著低于对照。表明GbFLSa编码的是一种功能蛋白,对原花青素的生物合成起负调控作用。有助于揭示GbFLSa在植物代谢中的作用,更好地了解类黄酮生物合成的潜在分子机制。

    一种银杏类黄酮3′-羟化酶基因GbF3′H1及其应用

    公开(公告)号:CN110592111A

    公开(公告)日:2019-12-20

    申请号:CN201910903596.9

    申请日:2019-09-23

    Abstract: 本发明公开了一种银杏类黄酮3′-羟化酶基因GbF3′H1及其应用,属于分子生物学技术领域。基因GbF3′H1核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,其表达的蛋白产物氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明通过构建基因GbF3′H1载体转化山新杨,并对转化的山新杨和非转基因型进行过量表达分析和差异代谢物分析,结果显示,与非转基因植株相比,转基因植株生长相对较慢,叶片容易沉积红色素,黄酮类化合物合成的下游产物浓度明显高于非转基因植株,表明过量表达基因GbF3′H1能够提高植物类黄酮产量,可以作为促进植物体内积累黄酮类化合物的重要参考和科学依据。

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