公开(公告)号：CN108220260B

公开(公告)日：2021-06-08

申请号：CN201711304614.9

申请日：2017-12-11

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 裴建军 ,  赵林果 ,  董萍 ,  陈安娜

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K19/00 ,  C12P17/06 ,  C12R1/19

Abstract: 一种催化柚皮素生成山萘酚的融合酶及其应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示。本发明通过组合筛选策略获得能有效催化柚皮素生成山萘酚的黄烷酮3‑羟化酶（PeF3H）和黄酮醇合成酶（CuFLS），是目前报道的最佳组合。通过连接肽的筛选，获得了能适合PeF3H和CuFLS功能化融合的连接肽TPTPTPTP，通过该连接肽构建的融合酶（F69）能高效催化柚皮素生成山萘酚。携带该融合酶（F69）的重组菌BL21‑F69，通过高密度发酵，山萘酚的产量达到1010.2 mg/L，是目前报道最高产量的17倍。

公开(公告)号：CN106086046B

公开(公告)日：2019-08-16

申请号：CN201610405275.2

申请日：2016-06-08

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 裴建军 ,  董萍 ,  赵林果 ,  解静聪

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/60 ,  C12R1/19

Abstract: 一组DNA分子及其重组质粒和重组大肠杆菌及其产紫云英苷的应用，包括经优化的拟南芥糖基转移酶基因78D2，蔗糖磷酸化酶基因Basp，尿苷酰转移酶基因ugpA和蔗糖透性酶基因cscB，其核酸序列分别如SEQ ID NO:1，SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:6所示。该重组菌能高效表达全基因优化的糖基转移酶基因op78D2，该酶能高效、特异性的在山萘酚3位羟基进行糖基化；同时通过强化重组菌UDP‑glucose的合成途径，使重组菌能高效供应UDP‑glucose，解除重组菌合成紫云英苷的瓶颈。最终通过发酵条件的优化，实现了紫云英苷的高效合成。

公开(公告)号：CN108220260A

公开(公告)日：2018-06-29

申请号：CN201711304614.9

申请日：2017-12-11

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 裴建军 ,  赵林果 ,  董萍 ,  陈安娜

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K19/00 ,  C12P17/06 ,  C12R1/19

Abstract: 一种催化柚皮素生成山萘酚的融合酶及其应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示。本发明通过组合筛选策略获得能有效催化柚皮素生成山萘酚的黄烷酮3‑羟化酶（PeF3H）和黄酮醇合成酶（CuFLS），是目前报道的最佳组合。通过连接肽的筛选，获得了能适合PeF3H和CuFLS功能化融合的连接肽TPTPTPTP，通过该连接肽构建的融合酶（F69）能高效催化柚皮素生成山萘酚。携带该融合酶（F69）的重组菌BL21‑F69，通过高密度发酵，山萘酚的产量达到1010.2 mg/L，是目前报道最高产量的17倍。

公开(公告)号：CN104988164A

公开(公告)日：2015-10-21

申请号：CN201510439518.X

申请日：2015-07-23

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 裴建军 ,  赵林果 ,  董萍 ,  吴涛

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/60

Abstract: 一种优化的拟南芥糖基转移酶基因及其在制备异槲皮素中的应用，核苷酸序列如SEQ NO:3所示。本发明所用的糖基转移酶专一性高，可以特异性转化槲皮素生成异槲皮素，所提供的异槲皮素生产方法简单，所得的异槲皮素纯度高。

公开(公告)号：CN106086046A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610405275.2

申请日：2016-06-08

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 裴建军 ,  董萍 ,  赵林果 ,  解静聪

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/60 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/1048 ,  C12N9/1051 ,  C12N9/1241 ,  C12N15/70 ,  C12N2800/101 ,  C12N2800/22 ,  C12P19/60 ,  C12Y204/01007

Abstract: 一组DNA分子及其重组质粒和重组大肠杆菌及其产紫云英苷的应用，包括经优化的拟南芥糖基转移酶基因78D2，蔗糖磷酸化酶基因Basp，尿苷酰转移酶基因ugpA和蔗糖透性酶基因cscB，其核酸序列分别如SEQ ID NO:1，SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:6所示。该重组菌能高效表达全基因优化的糖基转移酶基因op78D2，该酶能高效、特异性的在山萘酚3位羟基进行糖基化；同时通过强化重组菌UDP‑glucose的合成途径，使重组菌能高效供应UDP‑glucose，解除重组菌合成紫云英苷的瓶颈。最终通过发酵条件的优化，实现了紫云英苷的高效合成。