公开(公告)号：CN118792429A

公开(公告)日：2024-10-18

申请号：CN202411184649.3

申请日：2024-08-27

Applicant: 南京市第一医院

Inventor： 范柏月 ,  孔霞 ,  何帮顺 ,  聂珍琳 ,  高路营 ,  韦静 ,  杨昕澄 ,  施昊天 ,  邰萍

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明提供一种基于恒温扩增的肺炎支原体及其耐药基因检测方法，采用前述引物组合，使用LAMP法对待测样本中包含MP耐药位点的23S rRNA基因片段进行扩增，扩增体系中添加pH指示剂，扩增结束后，当扩增体系颜色由紫色变为黄色，则待测样品为肺炎支原体阳性，当扩增体系颜色保持紫色，则待测样品为肺炎支原体阴性；当S1检测结果为肺炎支原体阳性，将S1得到的扩增产物与DNA探针、银离子及还原剂混合，孵育，形成银纳米簇产生荧光；在540nm激发波长下照射观察，当混合体系未发生荧光猝灭，则待测样品中的肺炎支原体为野生型；当混合体系发生荧光减弱，则待测样品中的肺炎支原体为突变型。该方法可以恒温完成扩增和基因识别，结果可直接通过肉眼进行判读，保持高灵敏度的同时操作更加简便。