公开(公告)号：CN114317677A

公开(公告)日：2022-04-12

申请号：CN202111561034.4

申请日：2021-12-15

Applicant: 南京大学

Inventor： 于涵洋 ,  李喆 ,  孙昕 ,  魏东瀛

IPC: C12Q1/25 ,  C12N15/10 ,  C12N9/00

Abstract: 本发明公开了一种通过体外筛选产生对RNA进行可变剪接分子工具的方法。属于生物医药领域，具体步骤：利用脱氧核酶对前体mRNA进行可变剪接，产生两个待连接片段；利用具有RNA连接活性的脱氧核酶对片段进行连接，形成成熟的RNA，验证脱氧核酶进行体外剪接的可行性；利用具有RNA切割活性的脱氧核酶切除目的前体信使RNA的一个内含子，产生两个待连接的RNA片段；通过体外筛选的技术手段获得具有RNA连接酶活性的苏糖核酸酶；利用苏糖核酸酶连接两个外显子，产生有功能的信使RNA；苏糖核酸酶较天然核酸酶具有稳定性好，不易降解，安全低毒等优点。本发明有效地实现RNA的剪接，为治疗由RNA剪接错误导致的疾病提供一种分子工具。

公开(公告)号：CN119120463A

公开(公告)日：2024-12-13

申请号：CN202411036033.1

申请日：2024-07-31

Applicant: 南京大学

Inventor： 于涵洋 ,  程文宇 ,  魏东瀛

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  A61K31/7088 ,  A61P35/00 ,  A61P11/00

Abstract: 本发明公开了一种具有RNA切割活性的苏糖核酶Tz2及其应用；属于生物医药技术领域，所述苏糖核酶Tz2能在含有镁离子的反应缓冲液中，特异性识别并快速切割RNA底物，将其递送进细胞后，可对含耐药突变的肺癌细胞的靶基因进行沉默，并且可以选择性地杀伤含耐药突变的肺癌细胞，而对不含突变的肺癌细胞的杀伤效果较弱。此外，所述苏糖核酶Tz2作为一种非天然核酸，可以抵抗核酸酶的降解，具备优异的生物稳定性。该苏糖核酶Tz2的特异性、催化活性以及底物通用性均好，能够作为有效的基因沉默分子工具，对抗非小细胞肺癌耐药性。