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公开(公告)号：CN117783384A
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202311817831.3
申请日：2023-12-27
申请人： 南京医科大学
摘要： 本发明公开了一种气相色谱‑串联质谱测定母乳及乳制品中多胺的方法，包括：取20～200μL母乳及乳制品，加入同位素混合标准溶液，混匀，随后加入裂解液，充分涡旋，离心，取上清液离心浓缩干燥，干燥后的样品在乙酸乙酯和三氟乙酸酐混合液中重悬，然后在40～80℃水浴中衍生化0.5～3小时，衍生化结束后继续离心浓缩干燥，二氯甲烷复溶后进行固相萃取净化，净化液氮吹至近干，加入20～200μL异丙醇和乙酸乙酯混合液复溶进行气相色谱‑串联质谱检测；根据定性离子对和保留时间对多胺进行定性；将多胺的定量子离子的峰面积与氘代同位素内标的定量子离子的峰面积的比值分别代入多胺的基质匹配内标标准曲线，获得多胺的浓度。
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公开(公告)号：CN112011538B
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202010751843.0
申请日：2020-07-30
申请人： 南京医科大学附属逸夫医院
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , A01K67/027
摘要： 本发明公开一种Mutyh基因条件性敲除小鼠模型的构建方法，利用CRISPR/Cas9技术，通过同源重组的原理，对Mutyh基因进行flox修饰，该flox小鼠与特异性的Cre工具鼠交配后，可敲除Mutyh基因第3‑15外显子，获得基因组织或细胞特异性敲除的模型小鼠，MUTYH基因变异可能通过诱导线粒体功能障碍，成为能量代谢障碍相关疾病发生的风险因素，心肌能量代谢障碍是导致并促进心力衰竭的发生发展的重要因素。本发明Mutyh基因条件性敲除小鼠模型稳定性好，为进一步研究心力衰竭的发病机制以及基因治疗提供经济、简单、可靠的动物模型。
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公开(公告)号：CN115480014B
公开(公告)日：2024-06-28
申请号：CN202211205589.X
申请日：2022-09-30
申请人： 南京医科大学
摘要： 本发明公开了一种基于分子印迹固相萃取‑气相色谱‑串联质谱测定PM2.5中DBfkT的方法，包括：取采集有PM2.5的玻璃纤维膜，剪碎，加入萃取剂，进行超声萃取得到提取液，采用分子印迹固相萃取小柱对提取液进行净化处理，氮吹浓缩得到进样液，再进行气相色谱‑串联质谱检测，根据DBfkT的保留时间和定性离子进行定性；将DBfkT定量子离子的峰面积代入DBfkT标准曲线中，获得进样液中DBfkT的浓度，根据PM2.5采样时的空气体积换算成DBfkT的最终浓度。本发明方法能够高效、准确、灵敏地定量PM2.5中痕量环境污染物DBfkT，适用于PM2.5及类似的颗粒性状的环境介质中DBfkT的残留分析。
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公开(公告)号：CN115420835B
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202211205592.1
申请日：2022-09-30
申请人： 南京医科大学
摘要： 本发明公开了一种PM2.5中MW328多环芳烃的气相色谱‑串联质谱定性筛查方法，其特征在于：包括：步骤(1)、取PM2.5采样膜，剪碎，加入萃取剂，进行超声萃取得到提取液，提取液氮吹浓缩后，加入二氯甲烷复溶，制得进样液；步骤(2)、取空白玻璃纤维膜，按照步骤(1)制得程序空白样；步骤(3)、进样液和程序空白样分别进行气相色谱‑串联质谱检测，根据定性离子对筛查MW328多环芳烃：与程序空白样相比，进样液定性离子对的峰面积增强或出现新的定性离子对，说明PM2.5样品中含有MW328多环芳烃。本发明方法所需样品量少，前处理简单，且灵敏度高、特异性强，能有效筛查出PM2.5中潜在的MW328多环芳烃。
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公开(公告)号：CN112011538A
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN202010751843.0
申请日：2020-07-30
申请人： 南京医科大学附属逸夫医院
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , A01K67/027
摘要： 本发明公开一种Mutyh基因条件性敲除小鼠模型的构建方法，利用CRISPR/Cas9技术，通过同源重组的原理，对Mutyh基因进行flox修饰，该flox小鼠与特异性的Cre工具鼠交配后，可敲除Mutyh基因第3-15外显子，获得基因组织或细胞特异性敲除的模型小鼠，MUTYH基因变异可能通过诱导线粒体功能障碍，成为能量代谢障碍相关疾病发生的风险因素，心肌能量代谢障碍是导致并促进心力衰竭的发生发展的重要因素。本发明Mutyh基因条件性敲除小鼠模型稳定性好，为进一步研究心力衰竭的发病机制以及基因治疗提供经济、简单、可靠的动物模型。
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公开(公告)号：CN111748615A
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN202010409002.1
申请日：2020-05-14
申请人： 南京医科大学附属逸夫医院
IPC分类号： C12Q1/6883 , G01N33/68 , C12N15/11
摘要： 本发明公开一种RBP4作为肌少症治疗靶点的检测方法，检测包括RBP4在肌少症患者的腓肠肌组织中表达变化，腺病毒沉默小鼠骨骼肌RBP4表达后小鼠运动耐量的改变，和RBP4在小鼠C2C12成肌细胞分化过程的表达变化。本发明检测方法通过肌少症患者腓肠肌组织中提取蛋白样品检测RBP4的表达水平；利用腺病毒沉默小鼠腓肠肌RBP4基因表达，测量小鼠运动耐量；以及从分化不同程度的C2C12成肌细胞中提取RNA检测RBP4的表达。操作简单、快速、稳定性好；为肌少症患者的临床诊治提供强有力的理论支持，具有临床意义和推广价值。
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公开(公告)号：CN116371503A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202310400631.1
申请日：2023-04-14
申请人： 南京医科大学
摘要： 本发明公开了一种用于微孔板的辅助加样装置，该辅助加样装置包括控制器（10）和辅助加样板（2），在辅助加样板（2）上设有与微孔板上的加样孔一一对应的辅助加样孔（21），任一辅助加样孔（21）的内腔内壁上配置有判定是否已加样的加样感应器（22）且任一辅助加样孔（21）的旁侧设有一一对应设置的加样指示灯（23），与加样感应器（22）联动的加样指示灯（23）能够在加样过程中分别以不亮表示未加样、闪烁表示待加样、常亮表示已加样，加样感应器（22）和加样指示灯（23）分别通过线路与控制器（10）相连接。本发明的辅助加样装置通过红外信号感应和加样指示灯的相互配合，按序加样，杜绝了实验者加错孔的可能。
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公开(公告)号：CN115480014A
公开(公告)日：2022-12-16
申请号：CN202211205589.X
申请日：2022-09-30
申请人： 南京医科大学
摘要： 本发明公开了一种基于分子印迹固相萃取‑气相色谱‑串联质谱测定PM2.5中DBfkT的方法，包括：取采集有PM2.5的玻璃纤维膜，剪碎，加入萃取剂，进行超声萃取得到提取液，采用分子印迹固相萃取小柱对提取液进行净化处理，氮吹浓缩得到进样液，再进行气相色谱‑串联质谱检测，根据DBfkT的保留时间和定性离子进行定性；将DBfkT定量子离子的峰面积代入DBfkT标准曲线中，获得进样液中DBfkT的浓度，根据PM2.5采样时的空气体积换算成DBfkT的最终浓度。本发明方法能够高效、准确、灵敏地定量PM2.5中痕量环境污染物DBfkT，适用于PM2.5及类似的颗粒性状的环境介质中DBfkT的残留分析。
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公开(公告)号：CN115389651B
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202210885992.5
申请日：2022-07-26
申请人： 南京医科大学
摘要： 本发明公开了一种基于气相色谱‑串联质谱快速测定微量人血清中尼古丁和可替宁的方法，包括：取15～100μL血清，加入5～50μL氘代同位素内标溶液混匀，再加入45～300μL甲醇，充分涡旋，离心，取上清液进行气相色谱‑串联质谱检测；根据定性离子对和保留时间对尼古丁、可替宁进行定性；将尼古丁或可替宁的定量离子的峰面积与氘代同位素内标的峰面积的比值分别代入尼古丁或可替宁的基质匹配内标标准曲线，获得尼古丁和可替宁的浓度。本发明仅需微量血清样品，基于特定的毛细管柱有效分离尼古丁和可替宁，利用优化的串联四级杆监测参数，就可以准确、灵敏、省时、高效的获得尼古丁和可替宁残留数据，且成本低。
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公开(公告)号：CN115389651A
公开(公告)日：2022-11-25
申请号：CN202210885992.5
申请日：2022-07-26
申请人： 南京医科大学
摘要： 本发明公开了一种基于气相色谱‑串联质谱快速测定微量人血清中尼古丁和可替宁的方法，包括：取15～100μL血清，加入5～50μL氘代同位素内标溶液混匀，再加入45～300μL甲醇，充分涡旋，离心，取上清液进行气相色谱‑串联质谱检测；根据定性离子对和保留时间对尼古丁、可替宁进行定性；将尼古丁或可替宁的定量离子的峰面积与氘代同位素内标的峰面积的比值分别代入尼古丁或可替宁的基质匹配内标标准曲线，获得尼古丁和可替宁的浓度。本发明仅需微量血清样品，基于特定的毛细管柱有效分离尼古丁和可替宁，利用优化的串联四级杆监测参数，就可以准确、灵敏、省时、高效的获得尼古丁和可替宁残留数据，且成本低。
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