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公开(公告)号：CN119510525A
公开(公告)日：2025-02-25
申请号：CN202411594392.9
申请日：2024-11-09
Applicant: 南京农业大学三亚研究院 , 南京农业大学
Abstract: 本发明开发了一种基于均相生物识别反应和TDT诱导聚合信号放大的ATP电化学检测方法，属于生命科学技术领域。其检测原理为：将一种由ATP适配体和3’末端暴露的发夹DNA组成的DNA复合物，用于在外切酶I(Exo I)存在的情况下与ATP进行均相反应，从而产生末端钝的发夹DNA HP。将巯基化的核酸探针S3固定在预处理后的玻碳电极表面，得到核酸探针S3修饰的金电极。HP被引入S3电极后，在生物素化核酸探针S4的参与下，DNA杂交反应将导致设计的DNA纳米结构的自组装形成。该自组装结构具有三个自由3’端的y型DNA结构，会进一步在dNTP池中激活TdT诱导的聚合反应，生成大量的长单链DNA产物，大量的Ru(NH3)63+可以通过强静电相互作用吸附到带负电荷的DNA磷酸主链上。因此，可以获得显著放大的电化学信号，用于目标的敏感监测。本发明方法提供了一种对ATP有简单、快捷、灵敏的检测方法，具有良好的实用价值，便于推广。
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公开(公告)号：CN118957164B
公开(公告)日：2025-02-21
申请号：CN202411425937.3
申请日：2024-10-14
Applicant: 南京农业大学三亚研究院 , 南京农业大学
IPC: C12Q1/70 , G01N27/327 , G01N27/48 , C12Q1/682 , C12Q1/6825 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于金纳米颗粒信号放大的口岸鲤春病毒血症病毒超敏电化学检测方法，包括以下步骤：S1.制备MBs‑探针1；S2.制备AuNPs‑探针2；S3.制备AuNPs‑探针4；S4.丝网印刷电极表面镀金并将核酸探针共价修饰于表面，再吸附六氨合钌，进行电化学测定，获取SVCV的浓度。本发明通过结合高亲和力探针，基于六氨合钌吸附的金纳米颗粒信号放大原理建立了针对SVCV超敏便携式电化学检测的方法，能够使信号得到几何倍数放大，灵敏度极大提高，对SVCV的检测限为0.0646nM，回收率为95%‑102%，特异性高，稳定性和重现性号，操作更为简单，缩短了检测所需时间，提高了检测效率。
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公开(公告)号：CN118957164A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202411425937.3
申请日：2024-10-14
Applicant: 南京农业大学三亚研究院 , 南京农业大学
IPC: C12Q1/70 , G01N27/327 , G01N27/48 , C12Q1/682 , C12Q1/6825 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于金纳米颗粒信号放大的口岸鲤春病毒血症病毒超敏电化学检测方法，包括以下步骤：S1.制备MBs‑探针1；S2.制备AuNPs‑探针2；S3.制备AuNPs‑探针4；S4.丝网印刷电极表面镀金并将核酸探针共价修饰于表面，再吸附六氨合钌，进行电化学测定，获取SVCV的浓度。本发明通过结合高亲和力探针，基于六氨合钌吸附的金纳米颗粒信号放大原理建立了针对SVCV超敏便携式电化学检测的方法，能够使信号得到几何倍数放大，灵敏度极大提高，对SVCV的检测限为0.0646nM，回收率为95%‑102%，特异性高，稳定性和重现性号，操作更为简单，缩短了检测所需时间，提高了检测效率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117568500B
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202410059465.8
申请日：2024-01-16
Applicant: 南京农业大学三亚研究院
Abstract: 本发明公开了一种水产品中病原菌的双重PCR检测试剂盒，包括检测副溶血性弧菌的引物对、检测无乳链球菌的引物对、2×PCR PreMix和RNase‑free Water，检测副溶血性弧菌的引物对为特异性针对副溶血性弧菌的Tlh基因，检测无乳链球菌的引物对为特异性针对无乳链球菌的Sip基因。本发明的检测试剂盒利用特异性针对副溶血性弧菌Tlh基因和特异性针对无乳链球菌的Sip基因的引物，通过单管同步检测，实现可同时鉴别副溶血性弧菌和无乳链球菌两种病原菌，具有灵敏度高，特异性强、操作简便的特点，解决了单次快速有效检测两种病原菌的问题，为水产养殖业的发展起到了促进作用。
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公开(公告)号：CN117589978A
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202310301568.6
申请日：2023-03-24
Applicant: 南京农业大学三亚研究院 , 南京农业大学
IPC: G01N33/53 , C12Q1/6825 , G01N21/78 , G01N21/31
Abstract: 一种卡那霉素残留检测的比色生物传感方法，其检测原理为：首先在载银的聚多巴胺纳米颗粒表面修饰百里香酚酞TP和信号探针SpKAN形成PDANS@Ag/TP/SpKAN作为信号元件，同时将核酸适配体AptKAN与互补探针CpKAN杂交并修饰在链霉亲和素偶联磁珠MBs表面形成MBs/dsDNA作为识别元件，当卡那霉素存在时会与识别元件中的AptKAN特异性结合，释放出的CpKAN与信号元件中的SpKAN杂交，实现信号元件在识别元件表面的富集，再加入碱性试剂后，PDANS@Ag表面负载的TP显色，在594nm处出现特征紫外吸收峰，通过测量不同浓度卡那霉素所对应的紫外‑可见吸收光谱值，绘制标准曲线，通过计算即可实现卡那霉素含量的灵敏检测，该方法灵敏度高，特异性好，操作便捷，对卡那霉素残留分析具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117568500A
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202410059465.8
申请日：2024-01-16
Applicant: 南京农业大学三亚研究院
Abstract: 本发明公开了一种水产品中病原菌的双重PCR检测试剂盒，包括检测副溶血性弧菌的引物对、检测无乳链球菌的引物对、2×PCR PreMix和RNase‑free Water，检测副溶血性弧菌的引物对为特异性针对副溶血性弧菌的Tlh基因，检测无乳链球菌的引物对为特异性针对无乳链球菌的Sip基因。本发明的检测试剂盒利用特异性针对副溶血性弧菌Tlh基因和特异性针对无乳链球菌的Sip基因的引物，通过单管同步检测，实现可同时鉴别副溶血性弧菌和无乳链球菌两种病原菌，具有灵敏度高，特异性强、操作简便的特点，解决了单次快速有效检测两种病原菌的问题，为水产养殖业的发展起到了促进作用。
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公开(公告)号：CN117630352A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202310301476.8
申请日：2023-03-24
Applicant: 南京农业大学三亚研究院 , 南京农业大学
IPC: G01N33/53 , C12Q1/6825 , G01N21/78
Abstract: 一种基于智能手机的通用型多重抗生素残留检测方法，以土霉素、卡那霉素和链霉素为模型，其检测原理为：(1)制备聚多巴胺载银颗粒，分别修饰上各通道对应的显色剂和信号探针得显色纳米颗粒，(2)将各通道对应的适配体及互补探针杂交所得dsDNA修饰于磁珠表面得磁性复合物，(3)当实际牛奶样品中任一待测物存在时，与磁性复合物表面dsDNA中的适配体结合，导致互补探针恢复单链后与信号探针互补配对，显色纳米颗粒因此富集在磁珠表面，(4)加NaOH后，各通道显色剂会大量释放至溶液呈现不同颜色，利用智能手机测定的R、G、B比值分析后，绘制标准曲线，计算可得待测物浓度，(5)通过更换待测物所对应的适配体及探针，可对其他物质进行定量分析。
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公开(公告)号：CN117191902A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202310330728.X
申请日：2023-03-30
Applicant: 南京农业大学三亚研究院 , 南京农业大学
Abstract: 一种基于铜纳米花和eATRP反应级联信号放大的通用病毒电化学检测方法，其检测原理为：合成功能化磁性颗粒及杂化铜纳米花分别用作病毒特异序列的识别和信号标签。目标病毒存在时，通过磁性分离可以将信号标签杂化铜纳米花引入反应体系，进一步通过抗坏血酸AA还原生成亚铜离子，结合原子转移自由基聚合eATRP反应，可实现电信号分子甲基丙烯酸二茂铁FMMA在核酸探针Sp修饰的金电极表面的聚合，产生级联放大电化学信号，经方波伏安法测定电流强度，绘制电流强度与目标病毒浓度的标准曲线，实现病毒浓度的定量。该方法特异性好，灵敏性高，通过更换目标病毒特异性序列以及相应探针可进行各种病毒的通用检测。
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