公开(公告)号：CN119510525A

公开(公告)日：2025-02-25

申请号：CN202411594392.9

申请日：2024-11-09

Applicant: 南京农业大学三亚研究院 ,  南京农业大学

Inventor： 许媛媛 ,  杨健 ,  李嘉华

IPC: G01N27/26 ,  C12Q1/682

Abstract: 本发明开发了一种基于均相生物识别反应和TDT诱导聚合信号放大的ATP电化学检测方法，属于生命科学技术领域。其检测原理为：将一种由ATP适配体和3’末端暴露的发夹DNA组成的DNA复合物，用于在外切酶I(Exo I)存在的情况下与ATP进行均相反应，从而产生末端钝的发夹DNA HP。将巯基化的核酸探针S3固定在预处理后的玻碳电极表面，得到核酸探针S3修饰的金电极。HP被引入S3电极后，在生物素化核酸探针S4的参与下，DNA杂交反应将导致设计的DNA纳米结构的自组装形成。该自组装结构具有三个自由3’端的y型DNA结构，会进一步在dNTP池中激活TdT诱导的聚合反应，生成大量的长单链DNA产物，大量的Ru(NH3)63+可以通过强静电相互作用吸附到带负电荷的DNA磷酸主链上。因此，可以获得显著放大的电化学信号，用于目标的敏感监测。本发明方法提供了一种对ATP有简单、快捷、灵敏的检测方法，具有良好的实用价值，便于推广。