-
公开(公告)号：CN109652455B
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN201910121665.0
申请日：2019-02-19
Applicant: 南京农业大学 , 南京市蔬菜科学研究所
IPC: C12N15/87
Abstract: 为解决不结球白菜再生率低，受基因型影响大，使得转化效率低的技术问题，本发明提供一种磁性纳米载体介导的不结球白菜高效遗传转化方法，包括将含有外源基因的质粒与具有顺磁性、表面覆盖一层PEI薄膜的Fe3O4的磁性纳米载体以质量比1：1连接，得到基因—磁性纳米载体复合物；在花粉培养基中混合基因—磁性纳米载体与待转化植物花粉，在0.1～0.5T的磁场介导下进行磁转化，直接递送基因—磁性纳米载体复合物进入花粉细胞；然后通过植物授粉和受精过程实现待转化植物的外源基因遗传转化。本发明花粉培养基配方、磁性纳米粒子和质粒DNA的质量比、磁转化时间三者的组合，能够保证不结球白菜的花粉活力并有效提高磁转化效率，建立简单高效的遗传转化体系。
-
公开(公告)号：CN109652455A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201910121665.0
申请日：2019-02-19
Applicant: 南京农业大学 , 南京市蔬菜科学研究所
IPC: C12N15/87
Abstract: 为解决不结球白菜再生率低，受基因型影响大，使得转化效率低的技术问题，本发明提供一种磁性纳米载体介导的不结球白菜高效遗传转化方法，包括将含有外源基因的质粒与具有顺磁性、表面覆盖一层PEI薄膜的Fe3O4的磁性纳米载体以质量比1：1连接，得到基因—磁性纳米载体复合物；在花粉培养基中混合基因—磁性纳米载体与待转化植物花粉，在0.1～0.5T的磁场介导下进行磁转化，直接递送基因—磁性纳米载体复合物进入花粉细胞；然后通过植物授粉和受精过程实现待转化植物的外源基因遗传转化。本发明花粉培养基配方、磁性纳米粒子和质粒DNA的质量比、磁转化时间三者的组合，能够保证不结球白菜的花粉活力并有效提高磁转化效率，建立简单高效的遗传转化体系。
-
公开(公告)号：CN117121809A
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202210543449.7
申请日：2022-05-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种培育不结球白菜小孢子植株的方法。该方法包括如下步骤：(1)取样及花蕾挑选；(2)小孢子培育：用次氯酸钠对花蕾消毒，灭菌水清洗2遍，NLN‑13培养基润洗；润洗后的花蕾进行研磨、过滤、离心，黄绿色沉淀用NLN‑13培养基稀释并添加活性炭，加入伏立诺他分装到35mm培养皿，32.5℃热激24h，暗培养7～14天形成胚状体；(3)植株再生：胚状体补光振荡培养后移到改良固体1/2MS培养基中培育60d，炼苗移栽。(4)倍性鉴定：再生植株使用改良流式细胞仪倍性鉴定方法进行倍性鉴定。本发明所述方法能够提高不结球白菜小孢子出胚率，简化操作步骤缩短试验时间，提高再生植株存活率。
-
公开(公告)号：CN116083476A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202211095616.2
申请日：2022-09-08
Applicant: 南京农业大学 , 南京囿圆生物工程有限公司
Abstract: 本发明公开了一种豆瓣菜遗传转化方法，包括以下步骤：(1)豆瓣菜茎段选取；(2)茎段预培养；(3)农杆菌侵染；(4)茎段农杆菌共培养；(5)诱导形成愈伤组织；(6)诱导愈伤组织形成芽；(7)诱导生根再生植株。本发明弥补了国内外豆瓣菜高效遗传转化方法的空白；能够在一个半月左右获得转基因豆瓣菜，较其他园艺作物而言极大的缩短了基因功能验证的时间；使用该遗传转化方法得到的豆瓣菜植株再生率达到100％，转基因阳性率达到10％，成功率远远高于以往的方法。
-
公开(公告)号：CN115380820A
公开(公告)日：2022-11-25
申请号：CN202210865825.4
申请日：2022-07-22
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种诱导豆瓣菜芽脱分化的高效再生的方法，包括以下步骤：(1)选取带有叶柄基部的茎段；(2)将茎段接种到含细胞分裂素和植物生长素的培养基上，暗培养至产生畸形膨大芽；(3)将畸形膨大芽绿色组织切除形成创伤，然后接种到含细胞分裂素和植物生长素的培养基上，暗培养至畸形膨大芽伤口形成愈伤团；(4)将整体接种到培养基上，培养至形成丛芽；(5)将整体接种到培养基上，培养至形成不定根，成为完整植株；该方法选择畸形膨大芽来诱导愈伤，畸形膨大芽相对于传统的根、茎或叶而言更加幼嫩，细胞分裂更加旺盛，形成愈伤时间短，培养形成完整植株整个周期37～43天。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113549617A
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN202110618334.5
申请日：2021-06-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开编辑不结球白菜CENH3基因的sgRNA及其CRISPR/Cas9载体和应用，本发明设计了不结球白菜CENH3基因的sg RNA，构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，将连接了目的DNA片段的CRISPR/Cas9载体转入不结球白菜基因组中，通过基因编辑实现对不结球白菜CENH3基因的定点突变。本发明使用花粉纳米磁转化技术结合CRISPR/Cas9技术对不结球白菜内源基因CENH3进行编辑，通过植株抗性筛选、PCR检测、基因测序筛选得到CENH3单倍体诱导系，为在不结球白菜双单倍体育种中利用CENH3介导的染色体消除机制获得单倍体奠定基础。
-
公开(公告)号：CN108513908B
公开(公告)日：2021-09-14
申请号：CN201810442975.8
申请日：2018-05-10
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H1/08
Abstract: 本发明公开了一种四倍体不结球白菜的培育方法，采用细胞微管抑制剂氨磺灵混合水溶液点滴不结球白菜幼苗的生长点，使细胞染色体加倍，苗期进行气孔鉴定，开花期进行花粉鉴定，再通过流式细胞仪鉴定，筛选获得四倍体植株。同时在氨磺灵水溶液中加入吐温80和Silwet L‑77，吐温80能够增强氨磺灵的溶解性，并提高了氨磺灵水溶液的稳定性，而Silwet L‑77能极大降低水的表面张力，利于溶液与叶面的附着，从而提高了四倍体诱变率。该方法利用氨磺灵混合水溶液抑制细胞有丝分裂后期纺锤丝的形成，从而实现染色体加倍，为创造丰富的不结球白菜四倍体新种质和培育四倍体新品种提供了技术支持。
-
公开(公告)号：CN113079746A
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN202110546325.X
申请日：2021-05-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01C1/06
Abstract: 本发明公开了一种黑塌菜种子丸粒化配方及加工方法，包括粘合剂、惰性添加物质、引发剂、杀虫剂、染色剂。粘合剂以百分比为0.5％‑8％的粘合剂水溶液的形式添加，本发明优选的浓度为4.5％聚乙烯醇溶液；惰性添加物质为滑石粉、皂土、高岭土中的一种或几种，本发明优选的为滑石粉。另外，添加了引发剂Vc以及杀虫剂苦参碱和染色剂氧化铁黄。本发明使用的材料环保、安全，丸粒化后种子的发芽势、发芽率以及产量和品质都得到了提高。
-
-
公开(公告)号：CN110590729A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910904189.X
申请日：2019-09-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07D311/62 , A61K47/42 , A61K31/352
Abstract: 本发明属于提高白菜花色苷热稳定性领域，涉及一种采用核桃肽提高白菜花色苷热稳定性的方法。包括以下步骤：选择生长状况良好的白菜，洗净备用；选取酸化的乙醇作为提取剂，将提取液和白菜在超声条件下提取花色苷，获得提取液；提取液离心来，分离上清液得到花色苷的粗提取液；浓缩来，得到花色苷粗提取浓缩液；将花色苷粗提取浓缩液中浸泡2.5-4小时，后再用蒸馏水冲洗大孔树脂，再用解吸液解吸大孔树脂，收集解吸液并浓缩，得到纯化的花色苷溶液；花色苷溶液中加入核桃肽溶液并加热来。本发明通过低浓度的核桃肽的作用来保存花色苷，并且能够较为显著的提高花色苷在一定温度的保存率，这对未来花色苷的保存和开发利用具有积极的作用。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
151
records
(took 0.047 seconds)
