公开(公告)号：CN113549617B

公开(公告)日：2023-06-30

申请号：CN202110618334.5

申请日：2021-06-03

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张昌伟 ,  潘尧铧 ,  肖栋 ,  任一鸣 ,  刘同坤 ,  侯喜林 ,  李英 ,  胡春梅 ,  王建军

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  C12N15/55 ,  C12N15/29 ,  A01H5/02 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明公开编辑不结球白菜CENH3基因的sgRNA及其CRISPR/Cas9载体和应用，本发明设计了不结球白菜CENH3基因的sg RNA，构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，将连接了目的DNA片段的CRISPR/Cas9载体转入不结球白菜基因组中，通过基因编辑实现对不结球白菜CENH3基因的定点突变。本发明使用花粉纳米磁转化技术结合CRISPR/Cas9技术对不结球白菜内源基因CENH3进行编辑，通过植株抗性筛选、PCR检测、基因测序筛选得到CENH3单倍体诱导系，为在不结球白菜双单倍体育种中利用CENH3介导的染色体消除机制获得单倍体奠定基础。

公开(公告)号：CN113549617A

公开(公告)日：2021-10-26

申请号：CN202110618334.5

申请日：2021-06-03

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张昌伟 ,  潘尧铧 ,  肖栋 ,  任一鸣 ,  刘同坤 ,  侯喜林 ,  李英 ,  胡春梅 ,  王建军

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  C12N15/55 ,  C12N15/29 ,  A01H5/02 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明公开编辑不结球白菜CENH3基因的sgRNA及其CRISPR/Cas9载体和应用，本发明设计了不结球白菜CENH3基因的sg RNA，构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，将连接了目的DNA片段的CRISPR/Cas9载体转入不结球白菜基因组中，通过基因编辑实现对不结球白菜CENH3基因的定点突变。本发明使用花粉纳米磁转化技术结合CRISPR/Cas9技术对不结球白菜内源基因CENH3进行编辑，通过植株抗性筛选、PCR检测、基因测序筛选得到CENH3单倍体诱导系，为在不结球白菜双单倍体育种中利用CENH3介导的染色体消除机制获得单倍体奠定基础。