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公开(公告)号:CN117965592B
公开(公告)日:2025-03-28
申请号:CN202410119509.1
申请日:2024-01-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌菌蜕及其制备方法和应用,所述猪链球菌菌蜕的制备方法包括以下步骤:将包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的四环素诱导调控系统和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的猪链球菌细胞壁穿孔酶Crfp的质粒转入猪链球菌中后培养,由无水四环素诱导Crfp表达后,制得所述猪链球菌菌蜕。经试验验证,添加无水四环素可诱导CrfP表达而产生猪链球菌菌蜕,额外添加穿透肽WR12可促进菌蜕的产率,并实现对猪链球菌的完全灭活。利用本发明制备菌蜕,技术工艺简单,整个过程不添加任何化学灭活的试剂,充分保留表面抗原活性,免疫原性强,为制备猪链球菌菌蜕疫苗奠定基础。
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公开(公告)号:CN115058397A
公开(公告)日:2022-09-16
申请号:CN202210114436.8
申请日:2022-01-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 一种牛肠道病毒分离株及其应用,该病毒的分类命名为牛肠道病毒bovine enterovirus(BEV),该病毒已于2020年7月17日在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)进行的保藏,保藏编号为CCTCC NO:V202028。本发明中的病毒HB1901可在MDBK细胞中高效增殖,病毒浓度可达106.0TCID50/mL,无外源病毒污染;所构建的感染性克隆质粒可直接转染至真核细胞中,无需转录成RNA后再转染,操作简便,成本低廉;携带外源绿色荧光蛋白GFP,并可在细胞中稳定表达。
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公开(公告)号:CN107367608A
公开(公告)日:2017-11-21
申请号:CN201710697248.1
申请日:2017-08-15
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/535
CPC classification number: G01N33/535
Abstract: 本发明涉及一种用于罗非鱼IgM检测的酶标抗体的制备方法,属于生物技术领域,采集罗非鱼血清,用Protein G亲和纯化得到罗非鱼IgM抗体,再将罗非鱼IgM抗体免疫新西兰大白兔,得到兔抗罗非鱼IgG抗体,通过辣根过氧化酶对兔抗罗非鱼IgG抗体进行标记得到酶标二抗。相对于现有技术,本发明的有益效果:本发明采用亲和层析的方法,制备高浓度的兔抗罗非鱼IgM的多克隆抗体,纯化后进行辣根过氧化物酶标记和标记后抗体浓度测定,效价大于1:128000,通过适当稀释用于免疫反应中,用于检测罗非鱼IgM,有助于罗非鱼链球菌病的规模化防控。
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公开(公告)号:CN120081954A
公开(公告)日:2025-06-03
申请号:CN202510570094.4
申请日:2025-05-06
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , G01N33/569 , A61K39/108 , A61P31/04
Abstract: 本发明提供了一种猪腹泻源大肠杆菌多种毒素及菌毛的多表位融合抗原及其应用,所述的多表位融合抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所制得的多表位融合抗原MEAET可以用于制备抗体,也可以用于制备检测致病性大肠杆菌抗体的产品。本发明分析了猪腹泻源大肠杆菌多个毒素/菌毛抗原的表位,并将多个抗原表位优化排布后得到MEAET,其可同时识别多种抗原的抗体。间接ELISA的特异性试验表明MEAET与其他常见病原的阳性血清均不发生交叉反应,仅与猪腹泻大肠杆菌阳性血清产生良好反应,且与共生型大肠杆菌抗体交叉反应小,适合检测猪腹泻大肠杆菌的抗体情况,便于规模样品检测和流行病学监测用。
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公开(公告)号:CN119351593B
公开(公告)日:2025-03-25
申请号:CN202411959185.9
申请日:2024-12-30
Abstract: 本发明提供鉴定巴氏链球菌血清型的多重PCR检测引物组合物及其应用,属于生物技术领域。该多重PCR检测引物组合物包括第一~第五引物对。本发明还提供该多重PCR检测引物组合物在制备鉴定巴氏链球菌血清型的试剂盒中的应用。采用本发明引物组合物通过多重PCR检测,可鉴定巴氏练球菌5种主要血清型,此检测方法具有操作简单、特异性强、检测灵敏度高、抗干扰性强等优点。
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公开(公告)号:CN118255852B
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202410182539.7
申请日:2024-02-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/315 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/09 , A61K39/385 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种具有多血清型保护性的猪链球菌多表位抗原,所述猪链球菌多表位抗原MEAS的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了含有所述猪链球菌多表位抗原的猪链球菌亚单位疫苗。本发明中的多表位抗原可激活小鼠体内的细胞免疫与体液免疫应答,免疫小鼠后能达到较高的抗体水平,并具有较强的调理吞噬能力。MEAS还可为小鼠提供多血清型的保护效果,显著降低猪链球菌在小鼠各脏器的细菌载量,调节体内炎性细胞因子表达水平。因此,MEAS可作为猪链球菌亚单位疫苗的候选,其易于表达纯化,产量高,并可刺激机体产生保护性抗体以抵抗多种血清型的猪链球菌感染,有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN119351593A
公开(公告)日:2025-01-24
申请号:CN202411959185.9
申请日:2024-12-30
Abstract: 本发明提供鉴定巴氏链球菌血清型的多重PCR检测引物组合物及其应用,属于生物技术领域。该多重PCR检测引物组合物包括第一~第五引物对。本发明还提供该多重PCR检测引物组合物在制备鉴定巴氏链球菌血清型的试剂盒中的应用。采用本发明引物组合物通过多重PCR检测,可鉴定巴氏练球菌5种主要血清型,此检测方法具有操作简单、特异性强、检测灵敏度高、抗干扰性强等优点。
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公开(公告)号:CN118255852A
公开(公告)日:2024-06-28
申请号:CN202410182539.7
申请日:2024-02-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/315 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/09 , A61K39/385 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种具有多血清型保护性的猪链球菌多表位抗原,所述猪链球菌多表位抗原MEAS的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了含有所述猪链球菌多表位抗原的猪链球菌亚单位疫苗。本发明中的多表位抗原可激活小鼠体内的细胞免疫与体液免疫应答,免疫小鼠后能达到较高的抗体水平,并具有较强的调理吞噬能力。MEAS还可为小鼠提供多血清型的保护效果,显著降低猪链球菌在小鼠各脏器的细菌载量,调节体内炎性细胞因子表达水平。因此,MEAS可作为猪链球菌亚单位疫苗的候选,其易于表达纯化,产量高,并可刺激机体产生保护性抗体以抵抗多种血清型的猪链球菌感染,有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN119899812A
公开(公告)日:2025-04-29
申请号:CN202510405097.2
申请日:2025-04-02
Applicant: 南京农业大学三亚研究院
Abstract: 本发明公开一种硝磺草酮硝基还原酶基因xhctnr、其编码的蛋白及用途。本发明硝磺草酮硝基还原酶基因xhctnr,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码的蛋白Xhctnr即硝磺草酮硝基还原酶Xhctnr,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。硝磺草酮硝基还原酶Xhctnr能够将硝磺草酮降解为产物AMBA而失去除草活性。本发明硝磺草酮硝基还原酶基因xhctnr及其编码的蛋白在硝磺草酮生物降解脱毒和生物修复中具有巨大的应用前景。
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公开(公告)号:CN119639602A
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202411593760.8
申请日:2024-11-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N1/20 , C09K17/18 , C09K17/14 , C12R1/38 , C09K101/00
Abstract: 本发明公开了一株解磷菌4P‑1及其抗旱解磷菌剂。所述的解磷菌4P‑1分类命名为极端东方化假单胞菌(Pseudomonas extremorientalis)4P‑1。本发明提供的假单胞菌株Pseudomonas extremorientalis 4P‑1具有高效的解磷能力,其加入特定物质制备的抗干旱剂(聚谷氨酸和海藻糖按摩尔比3:1配比而成)能显著提高4P‑1的抗旱能力以及在干旱条件下的解磷效率。在相同的干旱胁迫程度下,添加抗干旱剂可以显著提高4P‑1菌剂在干旱环境中的生长量和解磷能力。本发明可为农作物解磷抗旱微生物肥料的开发应用提供技术支持,促进经济作物的生长。
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