公开(公告)号：CN109055425A

公开(公告)日：2018-12-21

申请号：CN201810781605.7

申请日：2018-07-17

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 赵春青 ,  盛成旺 ,  贾忠强 ,  黄秋堂 ,  韩召军 ,  刘泽文

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65

CPC classification number: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N2800/106

Abstract: 本发明公开了带有黄色或红色荧光标签的可用于非洲爪蟾卵母细胞表达的载体及应用，通过分子生物学手段对pGH19质粒进行改造，具体开发成含有增强型黄色或单体红色荧光蛋白标签且适合非洲爪蟾卵母细胞表达的载体pGH19‑EYFP或pGH19‑mRFP。本发明所述载体既可正常表达目的基因，又可通过荧光显微镜或共聚焦显微镜检测带有黄色或红色荧光标签的靶蛋白的分布情况和表达模式，为非洲爪蟾卵母细胞表达的蛋白情况提供更直观简洁的检测方式；可实时观察蛋白表达的时空动态；对于目的蛋白后期的提取、纯化、鉴定和功能性分析，仅需使用通用型抗体即可检测到靶标蛋白的表达情况，大大简化了实验流程，节省了实验时间和经济成本。

公开(公告)号：CN109055425B

公开(公告)日：2021-10-29

申请号：CN201810781605.7

申请日：2018-07-17

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 赵春青 ,  盛成旺 ,  贾忠强 ,  黄秋堂 ,  韩召军 ,  刘泽文

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65

Abstract: 本发明公开了带有黄色或红色荧光标签的可用于非洲爪蟾卵母细胞表达的载体及应用，通过分子生物学手段对pGH19质粒进行改造，具体开发成含有增强型黄色或单体红色荧光蛋白标签且适合非洲爪蟾卵母细胞表达的载体pGH19‑EYFP或pGH19‑mRFP。本发明所述载体既可正常表达目的基因，又可通过荧光显微镜或共聚焦显微镜检测带有黄色或红色荧光标签的靶蛋白的分布情况和表达模式，为非洲爪蟾卵母细胞表达的蛋白情况提供更直观简洁的检测方式；可实时观察蛋白表达的时空动态；对于目的蛋白后期的提取、纯化、鉴定和功能性分析，仅需使用通用型抗体即可检测到靶标蛋白的表达情况，大大简化了实验流程，节省了实验时间和经济成本。

公开(公告)号：CN110117612A

公开(公告)日：2019-08-13

申请号：CN201810109496.4

申请日：2018-02-05

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 赵春青 ,  盛成旺 ,  贾忠强 ,  黄秋堂 ,  韩召军 ,  刘泽文

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/66 ,  G01N33/68 ,  C07K1/14

Abstract: 本发明公开了一种带有绿色荧光蛋白标签的可用于非洲爪蟾卵母细胞表达的载体pGH19-EGFP及应用，通过分子生物学手段对pGH19质粒进行改造，开发成一种含有增强型绿色荧光蛋白标签且适合非洲爪蟾卵母细胞表达的载体pGH19-EGFP。该载体既可正常表达目的基因，又可通过荧光显微镜或共聚焦显微镜检测带有绿色荧光标签的靶蛋白的分布情况和表达模式，为非洲爪蟾卵母细胞表达的蛋白情况提供更直观简洁的检测方式；可以实时观察蛋白表达的时空动态；对于目的蛋白后期的提取、纯化、鉴定和功能性分析，仅需使用通用型抗体即可检测到靶标蛋白的表达情况，大大简化了实验流程，节省了实验时间和经济成本。

公开(公告)号：CN107501199A

公开(公告)日：2017-12-22

申请号：CN201710701591.9

申请日：2017-08-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 赵春青 ,  贾忠强 ,  宋萍萍 ,  韩召军

IPC: C07D261/04

CPC classification number: C07D261/04

Abstract: 本发明公开一种氟雷拉纳单体化合物的提取和纯化方法，包括如下步骤：1)Bravecto制剂粉碎成粉末后，依次用石油醚、二氯甲烷、甲醇进行索式提取直至回流液澄清，将二氯甲烷提取液或三种提取液分别低压旋转蒸发得到粗提物；2)称取与粗提物等质量的硅胶，石油醚溶解后倒入层析柱，记为1个高度单位，再加入6～8个高度单位的硅胶；3)将步骤1)获得的粗提物加入层析柱内；4)用不同体积比的石油醚-乙酸乙酯混合溶液进行层析分离，得到目标产物。本发明所述方法可以成功从Bravecto中提取得到高纯度的氟雷拉纳化合物，满足对该化合物的需求问题或检测检验等问题。