公开(公告)号：CN101955530A

公开(公告)日：2011-01-26

申请号：CN201010529394.1

申请日：2010-11-02

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘永杰 ,  陆承平 ,  焦大为

IPC: C07K16/06 ,  C07K1/36 ,  C07K1/30 ,  C07K1/18 ,  C07K1/16

Abstract: 本发明涉及鲫鱼IgM提取纯化工艺，一种将鲫鱼IgM从鲫鱼血清中与其它化合物相分离，从而获得高纯度鲫鱼IgM的方法。包括制备鲫鱼血清；通过33%到50%饱和硫酸铵分级沉淀法对鲫鱼血清进行粗提；通过Macro-prephighQ强阴离子交换柱从鲫鱼血清饱和硫酸铵分离沉淀提取物中进一步提取鲫鱼IgM；经离子交换层析获得的样品进一步通过SephacrylTMS-300葡聚糖凝胶层析柱进行精细分离纯化。从5mL鲫鱼血清（蛋白浓度60mg/mL)中纯化得到4.4mgIgM，得率为1.4%，经SDS-PAGE检测、蛋白扫描仪分析，纯度达96%以上。

公开(公告)号：CN101955530B

公开(公告)日：2012-09-12

申请号：CN201010529394.1

申请日：2010-11-02

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘永杰 ,  陆承平 ,  焦大为

IPC: C07K16/06 ,  C07K1/36 ,  C07K1/30 ,  C07K1/18 ,  C07K1/16

Abstract: 本发明涉及鲫鱼IgM提取纯化工艺，一种将鲫鱼IgM从鲫鱼血清中与其它化合物相分离，从而获得高纯度鲫鱼IgM的方法。包括制备鲫鱼血清；通过33%到50%饱和硫酸铵分级沉淀法对鲫鱼血清进行粗提；通过Macro-prephighQ强阴离子交换柱从鲫鱼血清饱和硫酸铵分离沉淀提取物中进一步提取鲫鱼IgM；经离子交换层析获得的样品进一步通过SephacrylTMS-300葡聚糖凝胶层析柱进行精细分离纯化。从5mL鲫鱼血清（蛋白浓度60mg/mL)中纯化得到4.4mgIgM，得率为1.4%，经SDS-PAGE检测、蛋白扫描仪分析，纯度达96%以上。

公开(公告)号：CN102012429A

公开(公告)日：2011-04-13

申请号：CN201010530132.7

申请日：2010-11-02

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘永杰 ,  陆承平 ,  焦大为

IPC: G01N33/569 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C07K14/28 ,  C07K16/12 ,  C07K16/06

Abstract: 本发明提供了嗜水气单胞菌重组气溶素Dot-ELISA检测方法，属于生物技术领域。以硝酸纤维素（NC）膜为固相载体，以嗜水气单胞菌重组气溶素兔抗血清为一抗，HRP-羊抗兔IgG为二抗。本发明一次可进行多个样本的测定，可显著缩短检测样本所需要的时间，且操作简便快速，同时可满足在非实验室条件下进行的要求，能够快速、方便地用于致病性嗜水气单胞菌的检测。

公开(公告)号：CN102012429B

公开(公告)日：2013-04-10

申请号：CN201010530132.7

申请日：2010-11-02

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘永杰 ,  陆承平 ,  焦大为

IPC: G01N33/569 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C07K14/28 ,  C07K16/12 ,  C07K16/06

Abstract: 本发明提供了嗜水气单胞菌重组气溶素Dot-ELISA检测方法，属于生物技术领域。以硝酸纤维素（NC）膜为固相载体，以嗜水气单胞菌重组气溶素兔抗血清为一抗，HRP-羊抗兔IgG为二抗。本发明一次可进行多个样本的测定，可显著缩短检测样本所需要的时间，且操作简便快速，同时可满足在非实验室条件下进行的要求，能够快速、方便地用于致病性嗜水气单胞菌的检测。