公开(公告)号：CN118638843A

公开(公告)日：2024-09-13

申请号：CN202410847303.0

申请日：2024-06-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  万群 ,  时新 ,  朱涛 ,  年颖晖 ,  缪瑞桢

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/66 ,  C12N9/24 ,  C12N1/19 ,  B09B3/60 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种高效表达木聚糖酶的基因工程菌及其在降解秸秆类农业废弃物中的应用，属于生物工程技术领域。本发明通过优化木聚糖酶基因的表达框和增加Hac1基因的表达量，显著地提高了木聚糖酶的表达量，降低了工业化产酶的成本。本发明中工程菌的成功构建，进一步降低了降解秸秆类农业废弃物生产低聚木糖的成本，适合于工业化生产。

公开(公告)号：CN118581066A

公开(公告)日：2024-09-03

申请号：CN202410756126.5

申请日：2024-06-12

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  万群 ,  鲁梅姿

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/70 ,  C12N15/56 ,  C12N1/21 ,  C12N9/96 ,  C12P19/04 ,  C12P19/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种一种新型木聚糖酶突变体及理性设计方法。通过实验验证，我们获得了八个热稳定性和活性均得到提高的木聚糖酶单点突变体S19T，E31P，G40S，D41G，A57N，E109Y，D135N,H170M。经过理性组合，我们设计出了最佳突变体XynM9。该突变体与野生型相比，其最适反应温度由75℃提高至85℃，Tm从83℃提高至93℃，85℃下的半衰期提高了11倍，达到了5.8 h。在造纸行业需要的极端条件下(80℃和pH 10)，这种超嗜热木聚糖酶可以显著水解小麦秸秆中的半纤维素，释放交联的木质素，从而提高纤维素含量。本发明为传统的化学漂白工艺提供了一种更环保的替代方法。

公开(公告)号：CN108546696A

公开(公告)日：2018-09-18

申请号：CN201810233502.7

申请日：2018-03-21

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 万群 ,  张晓帅 ,  李治宏

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/70

CPC classification number: C12N9/248 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种木聚糖酶表达、纯化方法，包括以下步骤：S01，表达步骤：含有目的基因的大肠杆菌在基本培养基中生长，使目的蛋白大量表达；S02，纯化步骤：含有目的蛋白的融合蛋白通过两步镍亲和层析和酶切，得到高纯度木聚糖酶。本发明利用基本培养基表达木聚糖酶，只需提供大肠杆菌生长所需的基本营养物质以及微量元素，大幅度降低了表达成本。本发明用两次镍亲和层析柱纯化代替以前的离子交换和分子筛层析等纯化方式，可有效地缩短纯化时间（1天），并且采用本发明的木聚糖酶的纯化方法所得木聚糖酶得率高，纯度高，木聚糖酶的纯度大于96%。

公开(公告)号：CN118530969A

公开(公告)日：2024-08-23

申请号：CN202410617583.6

申请日：2024-05-17

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  万群 ,  刘冬阳 ,  杨双浩

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/00 ,  C12P19/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明生物技术领域，具体涉及一种对木质素具有低吸附性的耐高温木聚糖酶及在生产低聚木糖中的应用。本发明所述的木聚糖酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明得到的木聚糖酶带有一个能够降低木质素对酶的非催化性吸附功能的碳水化合物结合模块结构域，最适温度为75℃，具有良好的热稳定性，酶解玉米芯后可得到较高产率的低聚木糖，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN116042578A

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202211206454.5

申请日：2022-09-30

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 万群 ,  沈其荣 ,  孙博 ,  刘东阳

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C07K19/00 ,  C12N9/96 ,  C12N15/62 ,  C12P19/26 ,  C12P19/14

Abstract: 本发明生物技术领域，具体涉及一种几丁质酶及其应用。本发明所述的几丁质酶，其氨基酸序列选自如下（A1）或（A2）：（A1）氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；（A2）将SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与（A1）所示的蛋白质具有相同功能的蛋白质。本发明得到的几丁质酶，最适温度为80℃，并且具有良好的热稳定性，且水解效率较高，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN116004587A

公开(公告)日：2023-04-25

申请号：CN202210950794.2

申请日：2022-08-09

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 万群 ,  沈其荣 ,  陈庆楠 ,  刘东阳

IPC: C12N9/52 ,  C12N15/57 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P21/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及生物技术及应用领域，具体涉及一种耐高温蛋白酶AbTp及其应用。所述蛋白酶AbTp至少包含氨基酸片段TNNHVVEGA、PFTDLAVIRAE和GGALVNAAGQVI的一种或多种。本发明所提供的耐高温的蛋白酶AbTp，其最适温度为70℃，最适pH 6.0，在70℃下的半衰期可达267分钟，比活力可达1877 U·mg‑1。将蛋白酶AbTp应用于虾壳蛋白质的降解中，蛋白降解率可达61%，高于以往生物降解法中通常采用的猪来源胰蛋白酶和猪来源胃蛋白酶。