一种植物组织内植物寄生线虫的快速富集分离方法

    公开(公告)号:CN116803257A

    公开(公告)日:2023-09-26

    申请号:CN202310998375.0

    申请日:2023-08-09

    Abstract: 本发明公开了一种植物组织内植物寄生线虫的快速富集分离方法,属于生物技术领域,该方法用纤维素酶和果胶酶裂解植物组织,裂解后的植物组织研磨,并进行梯度冲洗过滤,获得不同龄期的植物寄生线虫。本发明经反复筛选和实验验证发现,采用特定的纤维素酶和果胶酶能够高效、充分裂解植物的细胞壁,利用橡皮塞轻轻磨破植物组织,从而使得寄生在植物根系内的线虫释放出来;将裂解的植物组织通过不同孔径大小的筛网,获得不同龄期的植物线虫,再通过蔗糖溶液离心,即可分离富集出不同龄期植物线虫;本发明操作简单,安全且成本低,可以迅速地从植物组织内获得大量的植物线虫,为获取不同龄期植物线虫及其研究提供了一种有效方法。

    一种快速检测菲利普孢囊线虫的RPA引物和探针、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN114507743B

    公开(公告)日:2022-11-25

    申请号:CN202210106161.3

    申请日:2022-01-28

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测菲利普孢囊线虫的RPA引物和探针、试剂盒及应用,属于植物寄生线虫的检测领域。所述RPA引物如SEQIDNO:1‑2所示和探针如SEQID NO:3所示。本发明利用RPA引物和探针建立了RPA检测菲利普孢囊线虫的方法,该方法灵敏度高,特异性非常强,检测阈值为10‑3个二龄幼虫DNA,10‑4个单孢囊DNA和0.01ng基因组DNA,灵敏度是普通PCR检测的100倍;与常见的密切相关的植物寄生线虫之间没有交叉反应。RPA整个检测过程可以在1小时内完成。该检测方法特异性强、灵敏度高、结果可视化、快速、准确,在菲利普孢囊线虫病的早期诊断和田间检测预警等方面具有很高的应用价值。

    一种快速检测菲利普孢囊线虫的RPA引物和探针、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN114507743A

    公开(公告)日:2022-05-17

    申请号:CN202210106161.3

    申请日:2022-01-28

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测菲利普孢囊线虫的RPA引物和探针、试剂盒及应用,属于植物寄生线虫的检测领域。所述RPA引物如SEQIDNO:1‑2所示和探针如SEQID NO:3所示。本发明利用RPA引物和探针建立了RPA检测菲利普孢囊线虫的方法,该方法灵敏度高,特异性非常强,检测阈值为10‑3个二龄幼虫DNA,10‑4个单孢囊DNA和0.01ng基因组DNA,灵敏度是普通PCR检测的100倍;与常见的密切相关的植物寄生线虫之间没有交叉反应。RPA整个检测过程可以在1小时内完成。该检测方法特异性强、灵敏度高、结果可视化、快速、准确,在菲利普孢囊线虫病的早期诊断和田间检测预警等方面具有很高的应用价值。

    一种罹病植物组织中香蕉穿孔线虫DNA提取方法及其应用

    公开(公告)号:CN102382819B

    公开(公告)日:2013-08-07

    申请号:CN201110340265.2

    申请日:2010-02-25

    Abstract: 本发明“一种罹病植物组织中香蕉穿孔线虫DNA提取液、提取方法及其应用”,涉及植物病害的分子生物学检测技术。所述DNA提取液其组分及各组分的终浓度如下:Tris-HCl200mM,PH 8.0;NaCl 400mM;EDTA 10mM,PH 8.0;CTAB 3%(W/V);β-巯基乙醇4%(V/V)。该提取液作为罹病植物香蕉穿孔线虫DNA的裂解液,能够将感染植物组织的极少量的香蕉穿孔线虫的DNA完好地提取出来,而不受植物组织的酚类、蛋白酶类、解酶等物质的降解。本发明提供的DNA提取液及提取方法是采用PCR等分子生物学手段早期监测香蕉穿孔线虫感染以便于早期治理预防感染的重要基础。

    一种禾谷孢囊线虫LAMP快速检测方法及应用

    公开(公告)号:CN103045751A

    公开(公告)日:2013-04-17

    申请号:CN201310020383.4

    申请日:2013-01-20

    Abstract: 本发明涉及一种禾谷孢囊线虫LAMP快速检测方法及应用。根据克隆得到的禾谷孢囊线虫RAPD序列,设计筛选5条LAMP引物HA5-F3、HA5-B3、HA5-FIP、HA5-BIP和HA5-LB;配制并优化了LAMP反应体系。通过对禾谷孢囊线虫DNA提取,环介导等温扩增、扩增产物显色和观察,从而快速检测出禾谷孢囊线虫。本发明的检测方法特异性强、灵敏度高、成本低廉、操作简便,在禾谷孢囊线虫快速检测和禾谷孢囊线虫病的早期和田间诊断方面具有很高的应用价值。

Patent Agency Ranking