公开(公告)号：CN102382819B

公开(公告)日：2013-08-07

申请号：CN201110340265.2

申请日：2010-02-25

Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所

Inventor： 彭德良 ,  王琼 ,  耿丽凤 ,  李佳 ,  彭焕 ,  张东升

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明“一种罹病植物组织中香蕉穿孔线虫DNA提取液、提取方法及其应用”，涉及植物病害的分子生物学检测技术。所述DNA提取液其组分及各组分的终浓度如下：Tris-HCl200mM，PH 8.0；NaCl 400mM；EDTA 10mM，PH 8.0；CTAB 3％(W/V)；β-巯基乙醇4％(V/V)。该提取液作为罹病植物香蕉穿孔线虫DNA的裂解液，能够将感染植物组织的极少量的香蕉穿孔线虫的DNA完好地提取出来，而不受植物组织的酚类、蛋白酶类、解酶等物质的降解。本发明提供的DNA提取液及提取方法是采用PCR等分子生物学手段早期监测香蕉穿孔线虫感染以便于早期治理预防感染的重要基础。

公开(公告)号：CN101792755A

公开(公告)日：2010-08-04

申请号：CN201010113930.X

申请日：2010-02-25

Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所

Inventor： 彭德良 ,  王琼 ,  耿丽凤 ,  李佳 ,  彭焕 ,  张东升

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明为“一种香蕉穿孔线虫早期分子检测方法”，属生物技术领域。本发明涉及罹病植物组织中香蕉穿孔线虫DNA提取液配方和提取方法；香蕉穿孔线虫特异性引物RsF1/RsR1序列；香蕉穿孔线虫特异性引物和D3A和D3B的引物结合的一步双重PCR的反应液的配方和快速特异性扩增程序的检测技术方法。本发明的检测方法在提高分子检测灵敏度的同时且快速准确，在香蕉穿孔线虫检测和香蕉穿孔线虫病的早期诊断方面具有很高的应用价值。

公开(公告)号：CN102154476A

公开(公告)日：2011-08-17

申请号：CN201110032956.6

申请日：2011-01-31

Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所

Inventor： 彭德良 ,  彭焕 ,  王琼

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明为“一种香蕉穿孔线虫特异性LAMP检测方法及其应用”，属生物技术领域。一种香蕉穿孔线虫特异性的循环恒温扩增(LAMP)检测方法，其反应体系中香蕉穿孔线虫特异性LAMP检测引物RSF3、RSB3、RSFIP、RSBIP和RSLF，通过对罹病植物组织中香蕉穿孔线虫或单头香蕉穿孔线虫DNA提取，LAMP等温扩增，从而快速和特异性检测香蕉穿孔线虫。本发明的检测方法特异性强、灵敏度高、成本低廉、操作简便，在香蕉穿孔线虫现场快速检测和香蕉穿孔线虫病的早期诊断方面具有很高的应用价值。

公开(公告)号：CN102154476B

公开(公告)日：2014-06-25

申请号：CN201110032956.6

申请日：2011-01-31

Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所

Inventor： 彭德良 ,  彭焕 ,  王琼

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明为“一种香蕉穿孔线虫特异性LAMP检测方法及其应用”，属生物技术领域。一种香蕉穿孔线虫特异性的循环恒温扩增(LAMP)检测方法，其反应体系中香蕉穿孔线虫特异性LAMP检测引物RSF3、RSB3、RSFIP、RSBIP和RSLF，通过对罹病植物组织中香蕉穿孔线虫或单头香蕉穿孔线虫DNA提取，LAMP等温扩增，从而快速和特异性检测香蕉穿孔线虫。本发明的检测方法特异性强、灵敏度高、成本低廉、操作简便，在香蕉穿孔线虫现场快速检测和香蕉穿孔线虫病的早期诊断方面具有很高的应用价值。

公开(公告)号：CN102382819A

公开(公告)日：2012-03-21

申请号：CN201110340265.2

申请日：2010-02-25

Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所

Inventor： 彭德良 ,  王琼 ,  耿丽凤 ,  李佳 ,  彭焕 ,  张东升

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明“一种罹病植物组织中香蕉穿孔线虫DNA提取液、提取方法及其应用”，涉及植物病害的分子生物学检测技术。所述DNA提取液其组分及各组分的终浓度如下：Tris-HCl 200mM，pH 8.0；NaCl 400mM；EDTA 10mM，pH 8.0；CTAB 3％(W/V)；β-巯基乙醇4％(V/V)。该提取液作为罹病植物香蕉穿孔线虫DNA的裂解液，能够将感染植物组织的极少量的香蕉穿孔线虫的DNA完好地提取出来，而不受植物组织的酚类、蛋白酶类、解酶等物质的降解。本发明提供的DNA提取液及提取方法是采用PCR等分子生物学手段早期监测香蕉穿孔线虫感染以便于早期治理预防感染的重要基础。

公开(公告)号：CN101792755B

公开(公告)日：2011-12-28

申请号：CN201010113930.X

申请日：2010-02-25

Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所

Inventor： 彭德良 ,  王琼 ,  耿丽凤 ,  李佳 ,  彭焕 ,  张东升

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明为“一种香蕉穿孔线虫早期分子检测方法”，属生物技术领域。本发明涉及罹病植物组织中香蕉穿孔线虫DNA提取液配方和提取方法；香蕉穿孔线虫特异性引物RsF1/RsR1序列；香蕉穿孔线虫特异性引物和D3A和D3B的引物结合的一步双重PCR的反应液的配方和快速特异性扩增程序的检测技术方法。本发明的检测方法在提高分子检测灵敏度的同时且快速准确，在香蕉穿孔线虫检测和香蕉穿孔线虫病的早期诊断方面具有很高的应用价值。