一株弓形虫琥珀酸脱氢酶α亚基基因缺失疫苗虫株及其应用

    公开(公告)号:CN118546788B

    公开(公告)日:2024-12-24

    申请号:CN202410651467.6

    申请日:2024-05-24

    Abstract: 本发明公开了一株弓形虫琥珀酸脱氢酶α亚基基因缺失疫苗虫株及其应用,该虫株(Δsdhα)通过基因编辑技术直接敲除弓形虫的TgSDHα得到;敲除TgSDHα后,显著影响弓形虫的生长,减缓虫体体外的增殖速度,并能降低弓形虫体内繁殖数量;Δsdhα虫株具有体外可以传代培养,体内几乎无毒力的特性,感染Δsdhα虫株的小鼠全部存活;对动物免疫接种Δsdhα虫株后可以产生良好的免疫保护力,能抵抗野生型弓形虫的感染。Δsdhα虫株能用于制备抗弓形虫病的疫苗,为防治弓形虫病提供安全、有效的疫苗候选。同时,TgSDHα可以作为弓形虫药物设计靶点,为防治弓形虫病提供更多有效药物靶标与基因资源。

    一种用于牛中常见艾美耳球虫检测和虫种鉴定的巢式PCR方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN114540508B

    公开(公告)日:2023-11-07

    申请号:CN202210228164.4

    申请日:2022-03-08

    Abstract: 本发明公开了一种用于牛中常见艾美耳球虫检测和虫种鉴定的巢式PCR方法及试剂盒。本发明采用牛的艾美耳球虫SSU rRNA基因作为检测靶序列,所述序列中具有保守区域和可变区域,相应扩增片段中包含多个单核苷多态性位点;本发明进一步通过设计巢式PCR引物,建立了牛中常见艾美耳球虫巢式PCR检测方法,可检测出不同的牛中常见艾美耳球虫,进行艾美耳球虫的虫种鉴定。采用本发明的检测方法能够最低检测到一个卵囊,其扩增效率高,检测灵敏,可以准确区分牛感染的不同艾美耳球虫,并确定引起发病的不同虫种,用于牛球虫病的精准防控。

    二苯基脲类化合物在制备抗弓形虫病药物中的应用

    公开(公告)号:CN118436628A

    公开(公告)日:2024-08-06

    申请号:CN202410470536.3

    申请日:2024-04-18

    Abstract: 本发明公开了二苯基脲类化合物在制备抗弓形虫药物中的应用。本发明通过对咪唑苯脲及二苯基脲类化合物的体外抗弓形虫的研究,得到7种能有效抑制弓形虫生长的化合物,对弓形虫的体外抑虫率高,能够显著抑制虫体噬斑的形成,很好地抑制弓形虫的增殖;其中二苯基脲类化合物:1,3‑双(3‑氟苯基)脲、1‑(3‑溴苯基)‑3‑(4‑氯苯基)脲、1‑(3‑氯苯基)‑3‑(4‑氯苯基)脲,细胞毒性较小,还能用于治疗小鼠感染的弓形虫病,显著抑制弓形虫在体内繁殖,且不会影响小鼠生长,具有显著的抑虫效果,可以用于制备和开发更多的抗弓形虫药物。

    CP2蛋白多克隆抗体作为隐孢子虫纳虫空泡膜定位标签抗体的应用

    公开(公告)号:CN118191315A

    公开(公告)日:2024-06-14

    申请号:CN202410322139.1

    申请日:2024-03-20

    Abstract: 本发明公开了CP2蛋白多克隆抗体作为隐孢子虫纳虫空泡膜定位标签抗体的应用。本发明通过对微小隐孢子虫的CP2蛋白进行原核表达,纯化蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,进行ELISA和WB检测抗体效价证明多抗有效,随后进行间接免疫荧光和免疫电镜检测抗体确定其定位于隐孢子虫纳虫空泡膜上,能特异性识别微小隐孢子虫CP2蛋白,即纳虫空泡膜,能作为标签定位隐孢子虫纳虫空泡,对于隐孢子虫未知蛋白的定位研究具有重要作用;通过免疫荧光定位还能对入侵细胞的隐孢子虫进行定位,并鉴定出更多与微小隐孢子虫入侵和发育相关的关键蛋白,用于抗隐孢子虫病的药物或疫苗的开发。

    检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光试剂、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN116068177A

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202310034659.8

    申请日:2023-01-10

    Abstract: 本发明公开了一种检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光试剂、试剂盒及其应用,属于生物技术领域。本发明通过利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原,采用杂交瘤细胞单克隆抗体技术制备获得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体;用荧光染料标记步骤S1所得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体,即获得检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光检测试剂。应用本发明试剂建立的直接免疫荧光检测方法,可用于临床粪便样本及环境中微小隐孢子虫的检测及鉴定,且敏感性高、特异性强、稳定性好、诊断速度快,具有良好的应用前景。

    一种IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁方法及其应用

    公开(公告)号:CN111820185A

    公开(公告)日:2020-10-27

    申请号:CN202010712347.4

    申请日:2020-07-22

    Abstract: 本发明公开了一种IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁方法及其应用,所述扩繁方法为先将购买的IFN–γ基因缺陷杂合子交配,再将其子代中的纯合子和杂合子进行交配,再将子代中的雄性和雌性纯合子交配即可获得大量IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠,实现IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁,同时获得的IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠较直接购买的IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠体质正常,可更好用于隐孢子虫体外感染模型建立,极低剂量即可造成快速、慢性感染,且过程中小鼠死亡率低,可以满足隐孢子虫感染需要较长研究周期的要求。而且扩繁后获得的FN–γ基因缺陷纯合子小鼠可再直接纯纯交配产后代,实现大量扩繁,无需再经过复杂的纯杂交配。

    采用絮凝技术富集水样中寄生虫卵(孢)囊的方法及应用

    公开(公告)号:CN109959551A

    公开(公告)日:2019-07-02

    申请号:CN201910149359.8

    申请日:2019-02-28

    Abstract: 本发明涉及一种采用絮凝技术富集水样中寄生虫卵(孢)囊的方法,包括采集水样;水样中加入絮凝剂,其体积是水样体积的1%‑3%,絮凝剂为摩尔浓度均介于0.5‑1.5mol/L之间的CaCl2水溶液和NaHCO3水溶液,将加入絮凝剂后的水样的pH值调至10±0.1,静置形成第一沉淀;第一沉淀中加入氨基磺酸溶液,离心分离后得第二沉淀,第二沉淀中加入杜氏磷酸盐缓冲液,离心分离后得富集有寄生虫卵(孢)囊的离心沉淀,杂质溶解于氨基磺酸溶液和/或杜氏磷酸盐缓冲液中被去除。本发明还涉及其在寄生虫卵(孢)囊检测中的应用。根据本发明的方法,应用简便、快速,便于后续检测,避免了现有技术中富集操作复杂并引起误差的问题。

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