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公开(公告)号:CN119351466A
公开(公告)日:2025-01-24
申请号:CN202411503015.X
申请日:2024-10-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/30 , A61K39/002 , A61P33/02
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种弓形虫基因敲除疫苗虫株的构建方法及其应用,通过基因编辑技术直接敲除弓形虫的TGGT1_202920基因得到ΔTGGT1_202920虫株,该虫株具有在体外能够正常培养、在体内几乎无毒的特性;对动物免疫接种ΔTGGT1_202920虫株后,可以产生良好的免疫保护力,能抵抗野生型弓形虫的感染,能用于制备抗弓形虫病疫苗,以预防弓形虫感染。
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公开(公告)号:CN118546788B
公开(公告)日:2024-12-24
申请号:CN202410651467.6
申请日:2024-05-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株弓形虫琥珀酸脱氢酶α亚基基因缺失疫苗虫株及其应用,该虫株(Δsdhα)通过基因编辑技术直接敲除弓形虫的TgSDHα得到;敲除TgSDHα后,显著影响弓形虫的生长,减缓虫体体外的增殖速度,并能降低弓形虫体内繁殖数量;Δsdhα虫株具有体外可以传代培养,体内几乎无毒力的特性,感染Δsdhα虫株的小鼠全部存活;对动物免疫接种Δsdhα虫株后可以产生良好的免疫保护力,能抵抗野生型弓形虫的感染。Δsdhα虫株能用于制备抗弓形虫病的疫苗,为防治弓形虫病提供安全、有效的疫苗候选。同时,TgSDHα可以作为弓形虫药物设计靶点,为防治弓形虫病提供更多有效药物靶标与基因资源。
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公开(公告)号:CN118620731A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202410507540.2
申请日:2024-04-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种泰泽隐孢子虫基因的弓形虫异源表达虫株及其应用。本发明通过基因编辑技术将泰泽隐孢子虫的Ctgp40和Ctgp15基因在弓形虫中进行异源表达,成功构建得到泰泽隐孢子虫基因的弓形虫编辑虫株;通过异源表达,在弓形虫中能表达并定位出CtGP40和CtGP15蛋白;进行动物免疫后,显示随着免疫后的天数增加,小鼠体内的IgG抗体水平也在不断增长,卵囊排泄强度明显减弱,减小阳性小鼠数量,降低感染性,且在免疫后不会影响小鼠生长,免疫后小鼠均未死亡,在感染泰泽隐孢子虫的过程中,发挥了一定的免疫保护作用,能够用于制备泰泽隐孢子虫疫苗虫株,防治泰泽隐孢子虫感染。
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公开(公告)号:CN114540508B
公开(公告)日:2023-11-07
申请号:CN202210228164.4
申请日:2022-03-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6848 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于牛中常见艾美耳球虫检测和虫种鉴定的巢式PCR方法及试剂盒。本发明采用牛的艾美耳球虫SSU rRNA基因作为检测靶序列,所述序列中具有保守区域和可变区域,相应扩增片段中包含多个单核苷多态性位点;本发明进一步通过设计巢式PCR引物,建立了牛中常见艾美耳球虫巢式PCR检测方法,可检测出不同的牛中常见艾美耳球虫,进行艾美耳球虫的虫种鉴定。采用本发明的检测方法能够最低检测到一个卵囊,其扩增效率高,检测灵敏,可以准确区分牛感染的不同艾美耳球虫,并确定引起发病的不同虫种,用于牛球虫病的精准防控。
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公开(公告)号:CN116068177B
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202310034659.8
申请日:2023-01-10
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/533 , G01N33/577 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光试剂、试剂盒及其应用,属于生物技术领域。本发明通过利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原,采用杂交瘤细胞单克隆抗体技术制备获得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体;用荧光染料标记步骤S1所得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体,即获得检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光检测试剂。应用本发明试剂建立的直接免疫荧光检测方法,可用于临床粪便样本及环境中微小隐孢子虫的检测及鉴定,且敏感性高、特异性强、稳定性好、诊断速度快,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN118360157B
公开(公告)日:2024-12-24
申请号:CN202410336425.3
申请日:2024-03-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/11 , C12N15/85 , C12N15/52 , C12N9/22 , C12N15/113 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开了一株弓形虫琥珀酰辅酶A合成酶α亚基基因缺失疫苗虫株及其应用。本发明提供一株弓形虫基因缺失疫苗虫株(Δscsα),该虫株通过基因编辑技术敲除弓形虫琥珀酰辅酶A合成酶α亚基(TgSCSα)基因得到;弓形虫敲除TgSCSα后在体外仍可培养、在体内具有几乎无毒的特性;动物免疫接种Δscsα后,能够产生良好的免疫保护力,有效抵抗野生型弓形虫的感染。TgSCSα具有作为弓形虫疫苗设计靶点的潜力,能用于制备弓形虫基因缺失疫苗虫株。Δscsα是一株具备良好应用前景的候选疫苗虫株,可以为弓形虫病的防控提供更多选择和策略。
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公开(公告)号:CN118853411A
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202310482743.6
申请日:2023-04-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种构建兔大型艾美耳球虫ALI体外培养模型的方法,本发明提供的构建方法,通过分离兔回肠隐窝,经过类器官培养获得大量具有干性的肠道细胞,将兔回肠类器官转移至细胞培养板上实现单层肠道细胞的ALI体外培养,再感染大型艾美耳球虫子孢子,通过模拟兔肠道的体内环境,从而实现大型艾美耳球虫的体外培养。本发明提供的兔回肠ALI体外培养模型在感染大型艾美耳球虫子孢子后144HPI仍具有细胞活性,且大型艾美耳球虫可发育至裂殖体阶段,相较于球虫常用的MDBK细胞体外培养模型,该模型可以为大型艾美耳球虫提供更为长期的生长发育需求,对于大型艾美耳球虫分子层面和免疫相关的研究具有重要意义。
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公开(公告)号:CN116445530A
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202211608052.8
申请日:2022-12-14
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供磷酸核糖焦磷酸激酶PrsA基因在制备抗弓形虫病药物中的应用。本发明通过分析磷酸核糖焦磷酸激酶(PrsA)在弓形虫生长中的作用,显示通过CRISPR/Cas9系统敲除野生型弓形虫的TgPrsA基因后,缺失TgPrsA基因减缓虫体体外的复制和虫体体外空斑的形成,可以显著减缓虫体体外生长,并在体外传代培养15d后虫体完全死亡。表明TgPrsA基因对弓形虫生长非常重要,能够作为药物作用靶点,在治疗药物的开发和弓形虫病的防治中具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN114933970B
公开(公告)日:2023-03-24
申请号:CN202210723393.3
申请日:2022-06-24
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N1/11 , C12N15/53 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/79 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开了一种弓形虫基因敲除虫株,该虫株缺失核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的弓形虫6‑磷酸葡萄糖酸脱氢酶1基因(Tg6PGDH1)。本发明还公开了该虫株的构建方法以及在制备弓形虫疫苗中的应用。所述弓形虫基因敲除虫株在体外可以正常培养,虫体可以正常生长复制,但是在体内毒力减弱且对动物具有很高的免疫保护力,有成为抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
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公开(公告)号:CN114933970A
公开(公告)日:2022-08-23
申请号:CN202210723393.3
申请日:2022-06-24
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N1/11 , C12N15/53 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/79 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开了一种弓形虫基因敲除虫株,该虫株缺失核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的弓形虫6‑磷酸葡萄糖酸脱氢酶1基因(Tg6PGDH1)。本发明还公开了该虫株的构建方法以及在制备弓形虫疫苗中的应用。所述弓形虫基因敲除虫株在体外可以正常培养,虫体可以正常生长复制,但是在体内毒力减弱且对动物具有很高的免疫保护力,有成为抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
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