公开(公告)号：CN102260672A

公开(公告)日：2011-11-30

申请号：CN201110150855.9

申请日：2011-06-07

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张永亮 ,  杨林 ,  习欠云 ,  林海丹 ,  何玮璇 ,  蔡伟光

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C12N15/63 ,  C12N15/867 ,  A61K48/00 ,  A61P43/00

Abstract: 本发明公开了一种抑制猪生长抑素受体2基因表达的siRNA，属于基因工程技术领域。本发明所述的siRNA正义链具有SEQIDNO:1~3所示的任一序列。本发明还公开了含有该siRNA的shRNA编码基因及由其构建的慢病毒干扰质粒pshRNA-copGFPLentivector。通过实时定量Real-timePCR检测发现，各siRNA片段能使猪生长抑素受体2mRNA表达量显著降低约70%以上，ELISA检测SSTR2蛋白表达量降低30%以上。本发明的siRNA片段及其表达载体可用于制备抑制猪生长抑素受体2表达的制剂，能够显著下调SSTR2基因的表达量。

公开(公告)号：CN102260672B

公开(公告)日：2012-08-22

申请号：CN201110150855.9

申请日：2011-06-07

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张永亮 ,  杨林 ,  习欠云 ,  林海丹 ,  何玮璇 ,  蔡伟光

IPC: C12N15/113

Abstract: 本发明公开了一种抑制猪生长抑素受体2基因表达的siRNA，属于基因工程技术领域。本发明所述的siRNA正义链具有SEQIDNO:1~3所示的任一序列。本发明还公开了含有该siRNA的shRNA编码基因及由其构建的慢病毒干扰质粒pshRNA-copGFPLentivector。通过实时定量Real-timePCR检测发现，各siRNA片段能使猪生长抑素受体2mRNA表达量显著降低约70%以上，ELISA检测SSTR2蛋白表达量降低30%以上。本发明的siRNA片段及其表达载体可用于制备抑制猪生长抑素受体2表达的制剂，能够显著下调SSTR2基因的表达量。

公开(公告)号：CN101654687A

公开(公告)日：2010-02-24

申请号：CN200910192144.0

申请日：2009-09-08

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张永亮 ,  习欠云 ,  丁景华 ,  吴珍芳 ,  蔡伟光 ,  张守全 ,  江青艳

IPC: C12N15/867 ,  A61D19/02

Abstract: 本发明公开了一种慢病毒与精子孵育制备转基因猪的方法，包括如下步骤：慢病毒载体与精子共孵育后，使精子吸附慢病毒载体；然后经人工授精雌性动物，在子代动物筛选转基因猪。本发明采用慢病毒与精子共孵育的技术，通过精子吸附慢病毒后再人工授精或体外受精，将慢病毒导入受精卵中，并将外源基因整合到胚胎基因组中，从而制备转基因猪。从而克服了精子吸附裸DNA介导转基因猪整合率非常低、遗传不稳定等问题。该方法的突出特点是结合了慢病毒与精子载体的各自优点，操作简便、成本较低。利用慢病毒载体与精子孵育，是一种低成本、操作简便、转基因效率较高的转基因方法。