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公开(公告)号：CN104789658B
公开(公告)日：2017-12-26
申请号：CN201510139178.9
申请日：2015-03-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种快速检测柑橘半穿刺线虫的环等温扩增引物及其应用。所述引物包括引物对TSF3/ TSB3和引物对TSFIP/ TSBIP，引物的序列分别如SEQ ID NO.1～4所示。本发明以该引物建立了环等温扩增方法，以样品DNA为模板进行环等温扩增，反应结束后可通过两种方式判断结果：一是扩增产物进行电泳，出现特异阶梯状条带的样品判定为阳性；二是通过向反应体系中加入SYBR green I，通过肉眼观察出现颜色变化的样品为阳性。该环等温扩增方法对仪器设备要求低、快速、安全、特异性好、敏感性强，为柑橘半穿刺线虫的检测，尤其是基层检疫单位对柑橘半穿刺线虫的快速检测工作提供了技术支持，具有很好的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN104894248B
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201510269940.5
申请日：2015-05-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组定量检测柑橘半穿刺线虫的实时荧光定量PCR引物和探针及其应用。所述引物包括上游引物TsF1和下游引物TsR2，序列分别如SEQ ID NO.1～2所示；所述探针为Tspro1，探针Tspro1的序列如SEQ ID NO.3所示。利用上述引物和探针建立的实时荧光定量PCR方法不仅能够特异的从混合线虫样品或基质中检测并定量柑橘半穿刺线虫，而且检测灵敏性可达到单条线虫的灵敏度，对实际应用工作，如检验检疫工作，有着重要的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN106399467B
公开(公告)日：2019-06-25
申请号：CN201610338201.1
申请日：2016-05-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一套鉴定甘蔗上三种短体线虫的环介导等温扩增引物及其试剂盒。包括三组引物，分别为外引物对PZF3/PZB3和内引物对PZFIP/PZBIP，外引物对PPF3/PPB3和内引物对PPFIP/PPBIP，外引物对PBF3/PBB3和内引物对PBFIP/PBBIP；其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1～12所示；所述三种短体线虫为玉米短体线虫、拟玉米短体线虫和最短尾短体线虫。本发明的这套引物及其试剂盒对仪器设备要求低、简单、快速、安全、特异性好、灵敏性高，为玉米短体线虫、拟玉米短体线虫和最短尾短体线虫的检测，尤其是基层单位对这三种短体线虫的快速鉴定和区分提供了技术支持。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106399467A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201610338201.1
申请日：2016-05-18
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一套鉴定甘蔗上三种短体线虫的环介导等温扩增引物及其试剂盒。包括三组引物，分别为外引物对PZF3/ PZB3和内引物对PZFIP/ PZBIP，外引物对PPF3/ PPB3和内引物对PPFIP/ PPBIP，外引物对PBF3/ PBB3和内引物对PBFIP/ PBBIP；其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1～12所示；所述三种短体线虫为玉米短体线虫、拟玉米短体线虫和最短尾短体线虫。本发明的这套引物及其试剂盒对仪器设备要求低、简单、快速、安全、特异性好、灵敏性高，为玉米短体线虫、拟玉米短体线虫和最短尾短体线虫的检测，尤其是基层单位对这三种短体线虫的快速鉴定和区分提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN104789658A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510139178.9
申请日：2015-03-28
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开了一种快速检测柑橘半穿刺线虫的环等温扩增引物及其应用。所述引物包括引物对TSF3/TSB3和引物对TSFIP/TSBIP，引物的序列分别如SEQ ID NO.1～4所示。本发明以该引物建立了环等温扩增方法，以样品DNA为模板进行环等温扩增，反应结束后可通过两种方式判断结果：一是扩增产物进行电泳，出现特异阶梯状条带的样品判定为阳性；二是通过向反应体系中加入SYBR green I，通过肉眼观察出现颜色变化的样品为阳性。该环等温扩增方法对仪器设备要求低、快速、安全、特异性好、敏感性强，为柑橘半穿刺线虫的检测，尤其是基层检疫单位对柑橘半穿刺线虫的快速检测工作提供了技术支持，具有很好的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN104830973B
公开(公告)日：2017-12-26
申请号：CN201510139910.2
申请日：2015-03-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一组同时定量检测落选短体线虫和桑尼短体线虫的引物组和探针，所述引物组包括引物对pnF/ pnR和引物对ptF/ ptR，所述探针为prbpn和prbpt。所述引物pnF/ pnR序列分别如SEQ ID NO.1和2所示，引物ptF/ ptR序列分别如SEQ ID NO.4和5所示；所述探针prbpn和prbpt序列分别如SEQ ID NO.3和6所示。利用上述引物组和探针建立的多重实时荧光PCR方法不仅能够特异的从混合线虫样品或基质中同时检测这两种线虫，有效克服工作量大和检测成本高的缺点，而且可达到单条线虫的检测灵敏度。同时，该方法还可对样品中这两种线虫进行定量分析，对实际检测工作有重要的推进意义。
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公开(公告)号：CN104894248A
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201510269940.5
申请日：2015-05-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明公开了一组定量检测柑橘半穿刺线虫的实时荧光定量PCR引物和探针及其应用。所述引物包括上游引物TsF1和下游引物TsR2，序列分别如SEQ？ID？NO.1～2所示；所述探针为Tspro1，探针Tspro1的序列如SEQ？ID？NO.3所示。利用上述引物和探针建立的实时荧光定量PCR方法不仅能够特异的从混合线虫样品或基质中检测并定量柑橘半穿刺线虫，而且检测灵敏性可达到单条线虫的灵敏度，对实际应用工作，如检验检疫工作，有着重要的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN104830973A
公开(公告)日：2015-08-12
申请号：CN201510139910.2
申请日：2015-03-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一组同时定量检测落选短体线虫和桑尼短体线虫的引物组和探针，所述引物组包括引物对pnF/ pnR和引物对ptF/ ptR，所述探针为prbpn和prbpt。所述引物pnF/ pnR序列分别如SEQ ID NO.1和2所示，引物ptF/ ptR序列分别如SEQ ID NO.4和5所示；所述探针prbpn和prbpt序列分别如SEQ ID NO.3和6所示。利用上述引物组和探针建立的多重实时荧光PCR方法不仅能够特异的从混合线虫样品或基质中同时检测这两种线虫，有效克服工作量大和检测成本高的缺点，而且可达到单条线虫的检测灵敏度。同时，该方法还可对样品中这两种线虫进行定量分析，对实际检测工作有重要的推进意义。
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