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公开(公告)号：CN113004375A
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN202110289847.6
申请日：2021-03-15
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/00 , C12N15/11 , C12N15/70 , C12N15/62 , C12N1/21 , C12P21/02 , C12P21/06 , C07K14/435 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，特别涉及一种高效介导重组多肽形成包涵体的小分子蛋白。本发明提供的高效介导重组多肽形成包涵体的小分子蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。该小分子蛋白可以作为融合标签提高重组多肽的包涵体表达水平，在介导抗菌多肽等的表达方面效果显著，具有较大的市场价值与应用前景。本发明还提供了一种包涵体分离纯化的方法，该方法操作非常简便，且不影响目的多肽的生物活性，该技术可广泛应用于多肽的工业化生产、纯化及科学研究工作。
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公开(公告)号：CN118356911A
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202410504125.1
申请日：2024-04-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种四氧化三铁壳聚糖微球的制备方法及蛋白质的固定方法，其中，四氧化三铁壳聚糖微球的制备方法包括使用特定浓度的戊二醛作为交联剂，把壳聚糖和四氧化三铁交联起来，壳聚糖均匀牢靠的把四氧化三铁粒子进行包裹，经过一段时间孵化后最后形成圆润微球；蛋白固定方法包括微球修饰和融合蛋白的修饰。本发明微球以磁性的四氧化三铁为内核，可以依靠系统外部的磁力从反应体系中快速分离，方便快捷、简单高效；建立了基于标签ACP提供巯基的融合蛋白生产方法，固定化过程不依赖于目的蛋白，具有蛋白质固定的通用性，且可便于多种相关蛋白质(酶)的共固定。
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公开(公告)号：CN118308393A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410504378.9
申请日：2024-04-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌无抗生素抗性标记的表达系统及其构建方法与应用，属于生物工程技术领域。所述表达系统以sfp基因作为筛选标记，本发明在大肠杆菌表达系统中去除了抗生素筛选基因，在重组蛋白表达过程中无需加入抗生素提供选择压力，避免了抗生素基因在环境和生物中传播，且保证了表达质粒能在宿主菌株中稳定传代。去除抗生素基因后，减少了宿主细胞的负担。本发明同时优化了大肠杆菌表达重组蛋白的方式，该法在重组蛋白表达过程中无需加入诱导物，是生产重组蛋白的大肠杆菌表达系统领域的技术进步。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113004375B
公开(公告)日：2022-07-01
申请号：CN202110289847.6
申请日：2021-03-15
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/00 , C12N15/11 , C12N15/70 , C12N15/62 , C12N1/21 , C12P21/02 , C12P21/06 , C07K14/435 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，特别涉及一种高效介导重组多肽形成包涵体的小分子蛋白。本发明提供的高效介导重组多肽形成包涵体的小分子蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。该小分子蛋白可以作为融合标签提高重组多肽的包涵体表达水平，在介导抗菌多肽等的表达方面效果显著，具有较大的市场价值与应用前景。本发明还提供了一种包涵体分离纯化的方法，该方法操作非常简便，且不影响目的多肽的生物活性，该技术可广泛应用于多肽的工业化生产、纯化及科学研究工作。
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公开(公告)号：CN104531725B
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201410820070.1
申请日：2014-12-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种可被4’‑磷酸泛酰巯基乙胺修饰的序列及其用于固定蛋白质的方法，属于生物工程技术领域。本发明所述的可被4’‑磷酸泛酰巯基乙胺修饰的序列为如核苷酸序列SEQ ID NO:1所示的大肠杆菌酰基载体蛋白基因序列或如核苷酸序列SEQ ID NO:2所示的可被4’‑磷酸泛酰巯基乙胺修饰的短肽基因中的一种。通过包含上述序列的表达载体构建的大肠杆菌的重组表达系统，获得包含目标蛋白的融合蛋白，经酶AcpS或Sfp催化进行4’‑磷酸泛酰巯基乙胺修饰，然后进行固定化，实现固定目标蛋白。该固定化方法反应条件温和，操作非常简便，固定化效率高，固定的目标蛋白稳定并保持非常高的活性，具有极大的市场价值与应用前景。
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公开(公告)号：CN116555308A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202310396886.5
申请日：2023-04-14
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种促进目标蛋白在大肠杆菌细胞外分泌表达的表达载体，至少包含：(1)目标蛋白编码序列和YebF蛋白编码序列，目标蛋白编码序列与YebF蛋白编码序列通过TEV酶切识别位点编码序列连接；(2)DsbA、DsbC和SecM蛋白编码基因。本发明根据大肠杆菌分泌表达的特点，设计了一个YebF融合标签，可用于引导目的蛋白跨细胞质膜及外膜实现细胞外表达，同时在其C‑末端设置TEV酶的氨基酸识别位点，方便后续目的蛋白的回收与纯化，同时共表达Dsb家族蛋白与SecM蛋白，可以明显提高目标蛋白的分泌表达量。
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公开(公告)号：CN116426558A
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202310396832.9
申请日：2023-04-14
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种硫氧还蛋白介导重组蛋白在大肠杆菌胞外分泌表达的方法，构建表达由OmpA信号肽、TrxA蛋白和目标蛋白组成的融合蛋白的表达载体，将构建的表达载体转入大肠杆菌中进行表达培养。本发明设计信号肽和融合标签TrxA与目的蛋白进行表达，该融合标签TrxA可引导目的蛋白跨大肠杆菌的外膜分泌于培养基上清中，实现了重组蛋白的胞外表达。
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公开(公告)号：CN104531725A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410820070.1
申请日：2014-12-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种可被4’-磷酸泛酰巯基乙胺修饰的序列及其用于固定蛋白质的方法，属于生物工程技术领域。本发明所述的可被4’-磷酸泛酰巯基乙胺修饰的序列为如核苷酸序列SEQ ID NO:1所示的大肠杆菌酰基载体蛋白基因序列或如核苷酸序列SEQ ID NO:2所示的可被4’-磷酸泛酰巯基乙胺修饰的短肽基因中的一种。通过包含上述序列的表达载体构建的大肠杆菌的重组表达系统，获得包含目标蛋白的融合蛋白，经酶AcpS或Sfp催化进行4’-磷酸泛酰巯基乙胺修饰，然后进行固定化，实现固定目标蛋白。该固定化方法反应条件温和，操作非常简便，固定化效率高，固定的目标蛋白稳定并保持非常高的活性，具有极大的市场价值与应用前景。
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