公开(公告)号：CN116555308A

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202310396886.5

申请日：2023-04-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王声斌 ,  林梓煌 ,  牛放 ,  王志鹏 ,  赵芙蓉 ,  彭阳选

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K19/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种促进目标蛋白在大肠杆菌细胞外分泌表达的表达载体，至少包含：(1)目标蛋白编码序列和YebF蛋白编码序列，目标蛋白编码序列与YebF蛋白编码序列通过TEV酶切识别位点编码序列连接；(2)DsbA、DsbC和SecM蛋白编码基因。本发明根据大肠杆菌分泌表达的特点，设计了一个YebF融合标签，可用于引导目的蛋白跨细胞质膜及外膜实现细胞外表达，同时在其C‑末端设置TEV酶的氨基酸识别位点，方便后续目的蛋白的回收与纯化，同时共表达Dsb家族蛋白与SecM蛋白，可以明显提高目标蛋白的分泌表达量。