公开(公告)号：CN105331618A

公开(公告)日：2016-02-17

申请号：CN201510787042.9

申请日：2015-11-16

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 彭昌操 ,  杨紫薇 ,  刘思雯 ,  韩鸿均 ,  刘应波 ,  任陈希 ,  白雪

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明属于分子生物学及基因工程技术领域，公开了一种小桐子蔗糖转运蛋白同源基因(JcSUT1,JcSUT3,JcSUT4)的克隆方法。克隆方法包括以下操作步骤：应用如SEQ ID NO：1所示的引物F，如SEQ ID NO：2所示的引物R，进行反转录PCR扩增JcSUT1；应用如SEQ ID NO：3所示的引物F，如SEQ ID NO：4所示的引物R，进行反转录PCR扩增JcSUT3；应用如SEQ ID NO：5所示的引物F，如SEQ ID NO：6所示的引物R，进行反转录PCR扩增JcSUT4。

公开(公告)号：CN105331574A

公开(公告)日：2016-02-17

申请号：CN201510787020.2

申请日：2015-11-16

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 彭昌操 ,  杨紫薇 ,  刘思雯 ,  韩鸿均 ,  刘应波 ,  任陈希 ,  白雪

IPC: C12N5/04 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明属于分子生物学及基因工程技术领域，公开了一种小桐子组培苗原生质体的制备及基因瞬时表达的方法。其包括以下操作步骤：将小桐子组培苗叶片切成0.5～1mm宽的叶条，置于酶解液中避光、22～25℃静置酶解6～7h，过滤洗涤原生质体，加入一定的质粒DNA、原生质体和PEG4000/Ca2+溶液处理后，培养18～40h后在激光扫描共聚焦显微镜下观察。

公开(公告)号：CN106676054A

公开(公告)日：2017-05-17

申请号：CN201611010468.4

申请日：2016-11-17

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 彭昌操 ,  杨紫薇 ,  刘思雯 ,  朱其金 ,  董甜甜 ,  宋亚男 ,  郑丹菁

IPC: C12N5/04

CPC classification number: C12N5/04 ,  C12N2509/00

Abstract: 本发明属于细胞生物学、生物化学和分子生物学等技术领域，公开了一种快速简易的拟南芥完整叶绿体的提取方法。其中包括以下操作步骤：(1)将拟南芥叶片在Medium I中低速匀浆；(2)过滤之后1500g 4℃水平离心5min；(3)叶绿体沉淀用Medium II悬浮后，在40％/80％percoll梯度中3000g 4℃水平离心30min。(4)吸出完整叶绿体，用SH buffer洗涤两次；(5)叶绿体沉淀用SH buffer悬浮后色素定量。

公开(公告)号：CN108243959B

公开(公告)日：2021-08-24

申请号：CN201810090232.9

申请日：2018-01-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 彭昌操 ,  朱其金 ,  刘思雯 ,  张立定 ,  郑丹菁 ,  董甜甜 ,  宋亚男 ,  黄甜 ,  杨紫薇 ,  王雪 ,  翟雪

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种以黄粱木茎段为外植体的高效再生方法，包括如下步骤：S1：无菌苗的获得:将种子置于37℃‑40℃恒温摇床上震荡浸泡24‑36h；在无菌超净台上，用75％酒精灭菌30s，无菌水冲洗3次，10％NaClO溶液灭菌12‑15min，无菌水彻底冲洗6次，将种子播种培养；S2：茎段的伸长以及获得；S3：茎段的诱导及伸长；S4：生根培养；S5：炼苗及移栽。本发明的高效组织培养和植株再生方法，可摆脱外界条件的影响，规模化和工厂化生产出健壮、整齐一致的黄粱木组培幼苗；与已经报道的以下胚轴、带腋芽的茎段、萌芽条作为外植体构建再生体系相比，该方法不仅能满足市场对种苗的需求，并且可以通过转基因研究对黄粱木种质资源进行改良和创新，为黄粱木种质资源可持续利用奠定基础。

公开(公告)号：CN108243959A

公开(公告)日：2018-07-06

申请号：CN201810090232.9

申请日：2018-01-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 彭昌操 ,  朱其金 ,  刘思雯 ,  张立定 ,  郑丹菁 ,  董甜甜 ,  宋亚男 ,  黄甜 ,  杨紫薇 ,  王雪 ,  翟雪

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种以黄粱木茎段为外植体的高效再生方法，包括如下步骤：S1：无菌苗的获得:将种子置于37℃‑40℃恒温摇床上震荡浸泡24‑36h；在无菌超净台上，用75％酒精灭菌30s，无菌水冲洗3次，10％NaClO溶液灭菌12‑15min，无菌水彻底冲洗6次，将种子播种培养；S2：茎段的伸长以及获得；S3：茎段的诱导及伸长；S4：生根培养；S5：炼苗及移栽。本发明的高效组织培养和植株再生方法，可摆脱外界条件的影响，规模化和工厂化生产出健壮、整齐一致的黄粱木组培幼苗；与已经报道的以下胚轴、带腋芽的茎段、萌芽条作为外植体构建再生体系相比，该方法不仅能满足市场对种苗的需求，并且可以通过转基因研究对黄粱木种质资源进行改良和创新，为黄粱木种质资源可持续利用奠定基础。

公开(公告)号：CN106480064A

公开(公告)日：2017-03-08

申请号：CN201610882279.X

申请日：2016-10-09

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 彭昌操 ,  杨紫薇 ,  任陈希 ,  刘思雯 ,  朱其金 ,  黄甜 ,  董甜甜

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/10

CPC classification number: C07K14/415 ,  C12N15/1096

Abstract: 本发明属于分子生物学及基因工程技术领域，公开了一种黄梁木蔗糖转运蛋白同源基因(NcSUT2、NcSUT3、NcSUT4)的克隆方法。克隆方法包括以下操作步骤：应用如SEQ ID NO：1所示的引物F，如SEQ ID NO：2所示的引物R，进行PCR扩增NcSUT2；应用如SEQ ID NO：3所示的引物F，如SEQ ID NO：4所示的引物R，进行PCR扩增NcSUT3；应用如SEQ ID NO：5所示的引物F，如SEQ ID NO：6所示的引物R，进行PCR扩增NcSUT4。