公开(公告)号：CN108243959B

公开(公告)日：2021-08-24

申请号：CN201810090232.9

申请日：2018-01-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 彭昌操 ,  朱其金 ,  刘思雯 ,  张立定 ,  郑丹菁 ,  董甜甜 ,  宋亚男 ,  黄甜 ,  杨紫薇 ,  王雪 ,  翟雪

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种以黄粱木茎段为外植体的高效再生方法，包括如下步骤：S1：无菌苗的获得:将种子置于37℃‑40℃恒温摇床上震荡浸泡24‑36h；在无菌超净台上，用75％酒精灭菌30s，无菌水冲洗3次，10％NaClO溶液灭菌12‑15min，无菌水彻底冲洗6次，将种子播种培养；S2：茎段的伸长以及获得；S3：茎段的诱导及伸长；S4：生根培养；S5：炼苗及移栽。本发明的高效组织培养和植株再生方法，可摆脱外界条件的影响，规模化和工厂化生产出健壮、整齐一致的黄粱木组培幼苗；与已经报道的以下胚轴、带腋芽的茎段、萌芽条作为外植体构建再生体系相比，该方法不仅能满足市场对种苗的需求，并且可以通过转基因研究对黄粱木种质资源进行改良和创新，为黄粱木种质资源可持续利用奠定基础。

公开(公告)号：CN108243959A

公开(公告)日：2018-07-06

申请号：CN201810090232.9

申请日：2018-01-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 彭昌操 ,  朱其金 ,  刘思雯 ,  张立定 ,  郑丹菁 ,  董甜甜 ,  宋亚男 ,  黄甜 ,  杨紫薇 ,  王雪 ,  翟雪

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种以黄粱木茎段为外植体的高效再生方法，包括如下步骤：S1：无菌苗的获得:将种子置于37℃‑40℃恒温摇床上震荡浸泡24‑36h；在无菌超净台上，用75％酒精灭菌30s，无菌水冲洗3次，10％NaClO溶液灭菌12‑15min，无菌水彻底冲洗6次，将种子播种培养；S2：茎段的伸长以及获得；S3：茎段的诱导及伸长；S4：生根培养；S5：炼苗及移栽。本发明的高效组织培养和植株再生方法，可摆脱外界条件的影响，规模化和工厂化生产出健壮、整齐一致的黄粱木组培幼苗；与已经报道的以下胚轴、带腋芽的茎段、萌芽条作为外植体构建再生体系相比，该方法不仅能满足市场对种苗的需求，并且可以通过转基因研究对黄粱木种质资源进行改良和创新，为黄粱木种质资源可持续利用奠定基础。

公开(公告)号：CN106676054A

公开(公告)日：2017-05-17

申请号：CN201611010468.4

申请日：2016-11-17

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 彭昌操 ,  杨紫薇 ,  刘思雯 ,  朱其金 ,  董甜甜 ,  宋亚男 ,  郑丹菁

IPC: C12N5/04

CPC classification number: C12N5/04 ,  C12N2509/00

Abstract: 本发明属于细胞生物学、生物化学和分子生物学等技术领域，公开了一种快速简易的拟南芥完整叶绿体的提取方法。其中包括以下操作步骤：(1)将拟南芥叶片在Medium I中低速匀浆；(2)过滤之后1500g 4℃水平离心5min；(3)叶绿体沉淀用Medium II悬浮后，在40％/80％percoll梯度中3000g 4℃水平离心30min。(4)吸出完整叶绿体，用SH buffer洗涤两次；(5)叶绿体沉淀用SH buffer悬浮后色素定量。