公开(公告)号：CN110747151B

公开(公告)日：2021-06-15

申请号：CN201911243090.6

申请日：2019-12-06

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张玲华 ,  贾军皓 ,  楚品品 ,  曹丁 ,  马苗鹏 ,  邓锦波 ,  明飞平

IPC: C12N1/20 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种促进枯草芽孢杆菌自然生长转化的培养基组合及其转化方法。所述培养基组合包括培养基1和培养基2。本发明利用含有特殊营养物质配方的培养基，高效获得枯草芽孢杆菌感受态细胞，配合自然转化法，更高效，更快速获得有益重组子。进而改善了枯草芽孢杆菌的只能依赖电转化的复杂方法，大大的降低了转化成本，为基于枯草芽孢杆菌的蛋白的定向进化和代谢工程奠定了基础。本发明技术克服了传统转化技术缺点，方法简便易行，转化效率高，便于普及。

公开(公告)号：CN101696394A

公开(公告)日：2010-04-21

申请号：CN200910193082.5

申请日：2009-10-15

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张玲华 ,  夏枫耿 ,  明飞平

IPC: C12N1/20 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种高活性的枯草芽孢杆菌发酵方法及发酵产品。本发明将枯草芽孢菌株经斜面活化及种子的复壮后，得到活性高的发酵种子，再经独特设计发酵工艺发酵，有效提高活菌含量及菌体的活性。经本发明处理的菌种经发酵可达到3×1011CFU/ml，能够显著提高产品活菌的含量、保持菌体的高活性。

公开(公告)号：CN103333921A

公开(公告)日：2013-10-02

申请号：CN201310271420.9

申请日：2013-06-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张玲华 ,  明飞平 ,  邝哲师 ,  夏枫耿 ,  叶明强 ,  赵祥杰 ,  杨军

IPC: C12P1/02 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明属于微生物发酵技术领域，具体公开了一种利用氧载体促进毕赤酵母高密度发酵的方法。所述方法为在毕赤酵母发酵培养0～3h、24～27h、72～75h、96～98h时向发酵液中添加分别占发酵液0.5～1%正已烷，0.5～1%正十二烷，0.08～0.2%吐温-80和0.1～0.5%豆油；通过添加氧载体可以减少气泡的产生，大幅度提高发酵培养体系中的氧气含量，减少消泡剂的使用量，以满足毕赤酵母的生长，并大幅度提高产物的产量。

公开(公告)号：CN109929849A

公开(公告)日：2019-06-25

申请号：CN201910205418.9

申请日：2019-03-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张玲华 ,  贾军皓 ,  曹丁 ,  马苗鹏 ,  明飞平

IPC: C12N15/18 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C07K14/61 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种优化的pGH基因、蛋白及在提高毕赤酵母分泌表达pGH产量和活性中的应用。所述优化的pGH基因(即pGH-C基因)的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明将优化后的pGH基因构建重组表达载体并整合到毕赤酵母中，利用重组毕赤酵母菌株在体外获得大量表达的具有高活性的pGH蛋白，该蛋白能够促进猪的生产性能，在生猪养殖领域有很好的应用前景。通过本发明优化的pGH基因和pGH蛋白可以大大提高毕赤酵母分泌表达pGH的产量和活性，对于推动pGH在生猪养殖业中的应用具有重要意义。

公开(公告)号：CN105176858B

公开(公告)日：2018-09-18

申请号：CN201510335715.7

申请日：2015-06-17

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张玲华 ,  蔡海明 ,  曹丁 ,  明飞平 ,  马苗鹏 ,  杨军

IPC: C12N1/20 ,  C12R1/23 ,  C12R1/02

Abstract: 本发明属于微生物发酵技术领域，具体公开了一种嗜酸乳酸杆菌与醋酸杆菌混合发酵方法。本发明先制备乳酸杆菌种子和醋酸杆菌种子，然后在MRS基础培养基中加入2.8～3.1%葡萄糖、1.8～2.1%可溶性淀粉和0.4～0.7%低聚果糖，按4.8～5.1%的接种量接种乳杆菌种子，36～39℃厌氧发酵15～18h，向发酵液中加入3.3～3.6%无水乙醇，并按8～11%的接种量接种醋酸杆菌种子，28～31℃厌氧混合发酵45～48h，终止发酵。本发明混合发酵方法能够方便快捷地混合发酵嗜酸乳酸杆菌与醋酸杆菌，提高产品活菌的含量、保持菌体的高活性，解决了传统的乳酸杆菌与醋酸杆菌只能单独发酵的技术难题，同时也避免了传统的醋酸杆菌发酵周期很长，达数周之久，设备的利用率低的缺点。

公开(公告)号：CN109929849B

公开(公告)日：2021-05-04

申请号：CN201910205418.9

申请日：2019-03-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张玲华 ,  贾军皓 ,  曹丁 ,  马苗鹏 ,  明飞平

IPC: C12N15/18 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C07K14/61 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种优化的pGH基因、蛋白及在提高毕赤酵母分泌表达pGH产量和活性中的应用。所述优化的pGH基因(即pGH‑C基因)的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明将优化后的pGH基因构建重组表达载体并整合到毕赤酵母中，利用重组毕赤酵母菌株在体外获得大量表达的具有高活性的pGH蛋白，该蛋白能够促进猪的生产性能，在生猪养殖领域有很好的应用前景。通过本发明优化的pGH基因和pGH蛋白可以大大提高毕赤酵母分泌表达pGH的产量和活性，对于推动pGH在生猪养殖业中的应用具有重要意义。

公开(公告)号：CN110747151A

公开(公告)日：2020-02-04

申请号：CN201911243090.6

申请日：2019-12-06

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张玲华 ,  贾军皓 ,  楚品品 ,  曹丁 ,  马苗鹏 ,  邓锦波 ,  明飞平

IPC: C12N1/20 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种促进枯草芽孢杆菌自然生长转化的培养基组合及其转化方法。所述培养基组合包括培养基1和培养基2。本发明利用含有特殊营养物质配方的培养基，高效获得枯草芽孢杆菌感受态细胞，配合自然转化法，更高效，更快速获得有益重组子。进而改善了枯草芽孢杆菌的只能依赖电转化的复杂方法，大大的降低了转化成本，为基于枯草芽孢杆菌的蛋白的定向进化和代谢工程奠定了基础。本发明技术克服了传统转化技术缺点，方法简便易行，转化效率高，便于普及。