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公开(公告)号：CN116004745A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202111236331.1
申请日：2021-10-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12P19/34
Abstract: 本发明提供了一种对DNA片段3’末端进行生物素标记的方法。本发明通过制备目标DNA片段和辅助DNA片段，所述辅助DNA片段比目标DNA片段在3’端多5～12bp，且在多出部分中至少含有一个A碱基，再利用Klenow片段或T4DNA聚合酶对目标DNA片段3’末端进行生物素标记的方法，使得对DNA片段3’末端进行生物素标记的标记效率高且稳定。与TdT酶标记相比，本发明所述方法的标记效率高，更灵敏，可以进行精准定位，适用于EMSA等对片段定位要求比较高的实验的3’末端生物素标记。此外，本发明所述标记方法较现有常规的标记方法来说，步骤少，操作简便，成本低，具备实际应用价值，适于推广使用。
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公开(公告)号：CN108611306A
公开(公告)日：2018-10-02
申请号：CN201810289378.6
申请日：2018-04-03
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种慢生根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum USDA110)的基因的功能的研究方法。本发明提出一种利用铜绿假单胞菌作为宿主菌的原核表达体系。所述铜绿假单胞菌为铜绿假单胞菌PAO1（Pseudomonas aeruginosa PAO1）。本发明直接在背景机制研究比较清楚的铜绿假单胞菌中进行慢生根瘤菌有关胞内信使环鸟苷二磷酸（c-di-GMP）合成和降解基因功能的表型研究，观察铜绿假单胞菌性状上变化，初步得到目标基因的功能，提出一种新的原核表达体系。将慢生根瘤菌的基因在该体系中表达，考察菌落形态，运动性，胞外多糖产生和生物膜的形成量，初步得到慢生根瘤菌基因的功能，节约了时间和耗材成本，加快实验研究进度，有利于慢生根瘤菌基因功能的研究。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110055271B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN201910104211.2
申请日：2019-01-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种促进根瘤菌和植物之间的共生效应方法。本发明构建慢生根瘤菌USDA110 bll4347基因过表达菌株，其接种豆科植物进行共生，与不接种菌的空白对照豆科植物相比，能够明显增强豆科植物株高，鲜重，统计学分析具有极显著差异；bll4347基因过表达菌株与豆科植物根毛早期粘附(共培养4h)实验表明，比空载表达质粒菌株具有更强的粘附根毛能力；bll4347基因过表达菌株接种豆科植物，测定结瘤中菌总固氮酶活表明，与空载表达质粒菌株接种的豆科植物相比，能够明显的提高结瘤中总固氮酶活，可以显著提升植物的固氮能力，可作为生物固氮的新技术应用于工、农业生产，有很大的价值，值得大面积推广应用。
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公开(公告)号：CN108611306B
公开(公告)日：2021-05-25
申请号：CN201810289378.6
申请日：2018-04-03
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种慢生根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum USDA110)的基因的功能的研究方法。本发明提出一种利用铜绿假单胞菌作为宿主菌的原核表达体系。所述铜绿假单胞菌为铜绿假单胞菌PAO1（Pseudomonas aeruginosa PAO1）。本发明直接在背景机制研究比较清楚的铜绿假单胞菌中进行慢生根瘤菌有关胞内信使环鸟苷二磷酸（c‑di‑GMP）合成和降解基因功能的表型研究，观察铜绿假单胞菌性状上变化，初步得到目标基因的功能，提出一种新的原核表达体系。将慢生根瘤菌的基因在该体系中表达，考察菌落形态，运动性，胞外多糖产生和生物膜的形成量，初步得到慢生根瘤菌基因的功能，节约了时间和耗材成本，加快实验研究进度，有利于慢生根瘤菌基因功能的研究。
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公开(公告)号：CN110055271A
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201910104211.2
申请日：2019-01-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种促进根瘤菌和植物之间的共生效应方法。本发明构建慢生根瘤菌USDA110 bll4347基因过表达菌株，其接种豆科植物进行共生，与不接种菌的空白对照豆科植物相比，能够明显增强豆科植物株高，鲜重，统计学分析具有极显著差异；bll4347基因过表达菌株与豆科植物根毛早期粘附(共培养4h)实验表明，比空载表达质粒菌株具有更强的粘附根毛能力；bll4347基因过表达菌株接种豆科植物，测定结瘤中菌总固氮酶活表明，与空载表达质粒菌株接种的豆科植物相比，能够明显的提高结瘤中总固氮酶活，可以显著提升植物的固氮能力，可作为生物固氮的新技术应用于工、农业生产，有很大的价值，值得大面积推广应用。
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公开(公告)号：CN116200418A
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202111459700.3
申请日：2021-12-01
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种筛选铜绿假单胞菌LasR基因调控网络中未知基因突变体的方法。本发明通过在铜绿假单胞菌LasR敲除突变体中过表达易突变基因，利用铜绿假单胞菌LasR敲除突变体不能水解酪蛋白的缺陷，在胁迫环境下进行培养，诱使其发生突变，再通过筛选恢复蛋白水解能力的铜绿假单胞菌，找出相应的突变位点。本发明所述方法更为直接、简便、快捷，能够使得某个具体调控网络中的基因发生定向的未知突变，较现有的方法来说，不仅能更好地发现基因与基因之间的调控关系和调控网络，且大大节省了时间。
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公开(公告)号：CN116077621A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202111308996.9
申请日：2021-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了香石竹意大利环斑病毒P19蛋白在调控绿脓杆菌毒力中的应用。本发明通过构建香石竹意大利环斑病毒P19蛋白的重组表达载体并转入绿脓杆菌中发现，该蛋白可以调控绿脓菌素的合成，影响绿脓杆菌的毒力，进而可将其用于防治绿脓杆菌，为绿脓杆菌的防治提供了新方法。
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