一种筛选铜绿假单胞菌LasR基因调控网络未知基因突变体的方法

    公开(公告)号:CN116200418A

    公开(公告)日:2023-06-02

    申请号:CN202111459700.3

    申请日:2021-12-01

    Abstract: 本发明提供了一种筛选铜绿假单胞菌LasR基因调控网络中未知基因突变体的方法。本发明通过在铜绿假单胞菌LasR敲除突变体中过表达易突变基因,利用铜绿假单胞菌LasR敲除突变体不能水解酪蛋白的缺陷,在胁迫环境下进行培养,诱使其发生突变,再通过筛选恢复蛋白水解能力的铜绿假单胞菌,找出相应的突变位点。本发明所述方法更为直接、简便、快捷,能够使得某个具体调控网络中的基因发生定向的未知突变,较现有的方法来说,不仅能更好地发现基因与基因之间的调控关系和调控网络,且大大节省了时间。

    一种对DNA片段3’末端进行生物素标记的方法

    公开(公告)号:CN116004745A

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202111236331.1

    申请日:2021-10-22

    Abstract: 本发明提供了一种对DNA片段3’末端进行生物素标记的方法。本发明通过制备目标DNA片段和辅助DNA片段,所述辅助DNA片段比目标DNA片段在3’端多5~12bp,且在多出部分中至少含有一个A碱基,再利用Klenow片段或T4DNA聚合酶对目标DNA片段3’末端进行生物素标记的方法,使得对DNA片段3’末端进行生物素标记的标记效率高且稳定。与TdT酶标记相比,本发明所述方法的标记效率高,更灵敏,可以进行精准定位,适用于EMSA等对片段定位要求比较高的实验的3’末端生物素标记。此外,本发明所述标记方法较现有常规的标记方法来说,步骤少,操作简便,成本低,具备实际应用价值,适于推广使用。

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