公开(公告)号：CN118731368A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202410911553.6

申请日：2024-07-09

Applicant: 华侨大学

Inventor： 李三暑 ,  方杉杉 ,  林叶子 ,  樊可心 ,  赖宇晴

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/533 ,  G01N33/58 ,  C12Q1/6806 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种苯丙氨酸的荧光检测试剂盒及其应用，具有荧光链、淬灭链、替换链和单链DNA异构酶。本发明建立了一种基于苯丙氨酸单链DNA异构核酶和链替代反应的苯丙氨酸荧光检测新方法，采用苯丙氨酸单链DNA异构核酶、链替代反应以及荧光标记的方法进行检测，不需要放射性安全防护，不需要胶分离，而且可以使用96孔板进行高通量检测。

公开(公告)号：CN118374576A

公开(公告)日：2024-07-23

申请号：CN202410659789.5

申请日：2024-05-27

Applicant: 华侨大学

Inventor： 李三暑 ,  张生岚 ,  方杉杉

IPC: C12Q1/6813 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/44 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种适配体或核糖开关与配体结合亲密度和特异性的检测方法，通过共享一个由几个碱基对组成的桥，将一个锤头核酶整合到候选适配体(或核糖开关)中。当配体与结构化RNA的结合时，导致构象改变，从而改变整合了的锤头核酶的构象变化，导致锤头核酶剪切效率的变化。据此，不仅可以体外测量配体结合的特异性和结合亲和力(KD)，也可以分析核酶的裂解动力学(Kobs)。本发明灵敏度高，只要nM水平的RNA就能检测和观察到核酶的剪切，同时KD的检测水平在uM范围，而且不需要放射性元素和贵重的仪器，在普通的实验装备条件下就能开展。

公开(公告)号：CN115747203B

公开(公告)日：2024-08-27

申请号：CN202211166888.7

申请日：2022-09-23

Applicant: 华侨大学

Inventor： 李三暑 ,  陈彬汾 ,  霍喜龙 ,  方杉杉

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/115 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了基于DNA核酶和SELEX技术的适配体筛选方法及苯丙氨酸适配体。本发明的筛选方法可以解决目前SELEX技术所存在的实验设计困难、筛选流程复杂等问题，更重要的是，运用此方法筛选得到的适配体一方面是适体酶，另一方面又是能够自我剪切的DNA核酶，是一种异构核酶(Allosteric ribozyme)，可以直接通过剪切片段显示配体的结合程度，并用于定量检测配体的浓度。另外，该方法不需要固定配体或者适配体，使得筛选过程更加简便。总而言之，此方法可以用于筛选产生适配体从而用于科研和临床检测等多种用途。

公开(公告)号：CN115747203A

公开(公告)日：2023-03-07

申请号：CN202211166888.7

申请日：2022-09-23

Applicant: 华侨大学

Inventor： 李三暑 ,  陈彬汾 ,  霍喜龙 ,  方杉杉

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/115 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了基于DNA核酶和SELEX技术的适配体筛选方法及苯丙氨酸适配体。本发明的筛选方法可以解决目前SELEX技术所存在的实验设计困难、筛选流程复杂等问题，更重要的是，运用此方法筛选得到的适配体一方面是适体酶，另一方面又是能够自我剪切的DNA核酶，是一种异构核酶(Allosteric ribozyme)，可以直接通过剪切片段显示配体的结合程度，并用于定量检测配体的浓度。另外，该方法不需要固定配体或者适配体，使得筛选过程更加简便。总而言之，此方法可以用于筛选产生适配体从而用于科研和临床检测等多种用途。