一种适配体或核糖开关与配体结合亲密度和特异性的检测方法

    公开(公告)号:CN118374576A

    公开(公告)日:2024-07-23

    申请号:CN202410659789.5

    申请日:2024-05-27

    Applicant: 华侨大学

    Abstract: 本发明公开了一种适配体或核糖开关与配体结合亲密度和特异性的检测方法,通过共享一个由几个碱基对组成的桥,将一个锤头核酶整合到候选适配体(或核糖开关)中。当配体与结构化RNA的结合时,导致构象改变,从而改变整合了的锤头核酶的构象变化,导致锤头核酶剪切效率的变化。据此,不仅可以体外测量配体结合的特异性和结合亲和力(KD),也可以分析核酶的裂解动力学(Kobs)。本发明灵敏度高,只要nM水平的RNA就能检测和观察到核酶的剪切,同时KD的检测水平在uM范围,而且不需要放射性元素和贵重的仪器,在普通的实验装备条件下就能开展。

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