一种制备对维奈托克耐药的急性T淋巴细胞白血病细胞系的方法

    公开(公告)号:CN117965635A

    公开(公告)日:2024-05-03

    申请号:CN202410162338.0

    申请日:2024-02-05

    Abstract: 本申请涉及生物医药技术领域,尤其涉及一种制备对维奈托克耐药的急性T淋巴细胞白血病细胞系的方法;所述方法包括:混合Cas9蛋白和sgRNA‑HDR,并孵育,后加入ssDNA,得到混合物;对急性T淋巴细胞白血病细胞进行重悬,后加入混合物电转,得到编辑后细胞;对编辑后细胞孵育,第一培养,后流式分选,得到单克隆细胞;对单克隆细胞第二培养,后测序筛选,得到单细胞克隆;对单细胞克隆扩大培养并保种,得到急性T淋巴细胞白血病细胞;sgRNA‑HDR包括靶向BCL2基因的耐药突变点位;ssDNA包括BCL2基因的耐药突变点位的识别序列;该方法所得的细胞可以用于探究T‑ALL细胞对维耐托克的耐药机制和克服策略。

    一种新型细胞因子递送平台及其应用

    公开(公告)号:CN119955733A

    公开(公告)日:2025-05-09

    申请号:CN202411921365.8

    申请日:2024-12-25

    Abstract: 本发明公开了一种新型细胞因子递送平台及其应用,属于生物医药技术领域,所述细胞因子递送平台为CD19/IL‑12EVs,即细胞外囊泡表面同时表达IL‑12和CD19。所述细胞因子递送平台可以改善CAR‑T细胞功能,提高与CAR‑T细胞的结合效率,提高CAR‑T细胞在体内的增殖和抗肿瘤活性。本发明利用CD19修饰EVs,从而向抗CD19CAR‑T细胞特异性递送IL‑12,从同时表达CD19和IL‑12的亲代细胞中分离出包膜上显示CD19和IL‑12的EVs(命名为CD19/IL‑12EVs),并检测其对抗CD19CAR‑T细胞的结合能力及功能的影响。体外及体内数据显示CD19/IL‑12EVs能够有效增强CAR‑T细胞的增殖和细胞毒功能,且不会引起全身毒性。本发明提供了原则性证据,证明CAR靶点修饰的EVs是一种有效、安全的多效性细胞因子IL‑12传递系统,也是CAR‑T细胞的生物增强剂。

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